Колориметрический метод измерения содержания железа в растениях

Мы представляем простой и надежный протокол для измерения содержания железа в тканях растений, с помощью метода колориметрические лазурь.

Только с медицинской точки зрения это может помочь ответить на ключевой вопрос в области биологии. Например, как мы можем легко количественно определить содержание железа в биологических образцах керна. Основная особенность этой техники заключается в том, что она проста в производстве и очень точна в изготовлении.

Отдавая предпочтение этой методике, следует избегать загрязнения железом. Наглядная демонстрация этого метода поможет вам разобраться в его различных этапах. Чтобы начать эту процедуру, подготовьте горшки размером пять на пять сантиметров, наполнив их стандартным горшечным наполнителем.

Посадите по одному семени табака в каждый горшок. Перенесите растения в комнату для выращивания с постоянной температурой, в условиях долгого дня 23 градуса по Цельсию. Поливайте водопроводной водой, пока вода не стечет из горшка, и выращивайте растения примерно 50 дней.

По истечении этого времени начинайте обработку железом при орошении в концентрациях, подходящих для эксперимента. Орошайте растения этим раствором каждые два дня в течение шести-восьми дней. Затем отделите листья от стебля вручную, стараясь не использовать металлическое оборудование.

С помощью пульверизатора, наполненного двойной дистиллированной водой, очистите каждый лист. Обсушите листья на бумажном полотенце, а затем переложите их в бумажный пакет. Поместите наполненные листьями мешочки в духовку, установленную на постоянную температуру 80 градусов Цельсия, на два-три дня.

Очистите ступку и дважды пестиком, 4%-ным раствором соляной кислоты. И используйте фильтровальную бумагу для сушки. С помощью ступки и пестика измельчите сухие листья в порошок.

Затем переложите порошок в стерильные пластиковые тубы объемом 15 миллилитров. Для начала взвесьте новый, запечатанный 20-миллилитровый сцинтилляционный флакон без крышки. Либо обратите внимание на вес, либо прижмите весы.

Затем добавьте измельченные листья. Взвесьте пробу во флаконе, и обратите внимание на вес. Используйте минеральную вату, чтобы закрыть флакон.

Взвесьте три дополнительных флакона, не добавляя образцы, для использования в качестве контрольных, отмечая каждый вес. Далее перенесите образец и контрольные флаконы в печь. Сожгите листья, как указано в текстовом протоколе.

После этого дайте образцам остыть примерно до 100 градусов по Цельсию. Используя плотные перчатки и пинцет, достаньте образцы из печи, убедившись, что флакон находится снаружи. Поместите флаконы на ровную поверхность.

Удалите минеральную вату и закройте флаконы оригинальными крышками. Затем взвесьте три контрольных флакона, и рассчитайте их средний прирост веса. Если прирост веса равен или превышает 1% от веса золы, используйте это значение в качестве оценки погрешности измерения.

Весит пластиковая трубка объемом 15 миллилитров. Либо запишите вес, либо прижмите весы. Затем переложите золу в трубку.

Запишите это значение, которое является весом золы. Далее добавьте в золу пять миллилитров одного молярного раствора соляной кислоты. Процедите золу через фильтр 22 микрометра.

Затем добавьте еще пять миллилитров одного молярного раствора соляной кислоты через тот же фильтр, в результате чего итоговый объем образца составит 10 миллилитров. После этого из каждого образца удаляют по четыре миллилитра для измерения методом атомной спектроскопии. И определить концентрацию железа на грамм золы, как указано в текстовом протоколе.

Для начала добавьте четыре грамма ферроцианида калия в 100 миллилитров дважды дистиллированной воды, чтобы приготовить раствор прусской лазуи. Перемешайте вортекс и храните при температуре 4 градуса Цельсия до готовности к использованию. Когда вы будете готовы к использованию, смешайте 50 миллилитров раствора берлинской лазури с 50 миллилитрами одной молярной соляной кислоты, которая будет использоваться в качестве пустого раствора.

Затем с помощью пипетки смешайте 0,5 миллилитра ранее полученного образца, с 0,5 миллилитрами раствора берлинской лазури. Дайте этой смеси отдохнуть хотя бы одну минуту, но менее пяти минут. Перенесите эту смесь в кювету, и с помощью спектрофотометра измерьте оптическую плотность на 715 нанометрах.

Затем определите оптическую плотность на грамм золы и постройте график линейной регрессии между концентрациями железа, как указано в текстовом протоколе. Репрезентативные результаты 21 образца табачного листа показывают, что концентрация железа в поливной воде сильно влияет на содержание железа в листе. Затем спектры всех 21 репрезентативных образцов проверяются методом прусского синего.

Как видно на рисунке, поглощение на 715 нанометрах является оптимальной длиной волны при измерении растворов, содержащих различные концентрации железа-2 и железа-три. Кривая линейной регрессии, полученная путем сопоставления значений концентрации железа, полученных с помощью атомной спектроскопии, со значениями поглощения, полученными методом прусского синего, позволяет анализировать новые образцы того же типа растений. Не забывайте, что работа с HCL может быть чрезвычайно опасной.

И меры предосторожности, такие как защита глаз, всегда должны приниматься во время выполнения этой процедуры. При линейной регрессии важно убедиться, что результаты находятся в реалистичном диапазоне. После его разработки этот метод может помочь исследователям-биологам исследовать дополнительные растения для производства продуктов питания или биоремедиации.