Обнаружение 3-Нитротирозин в атмосферных условиях через высокую производительность системы жидкого хроматографии электрохимический детектор

Этот метод может помочь ответить на ключевой вопрос в экологических исследованиях о Nitrapyrin и 3-нитротирозин. Основным преимуществом этой техники является то, что это уникальный и очень чувствительный метод обнаружения 3-нитротирозина на фильтрах образца воздуха. Чтобы собрать всего взвешенных частиц или твердых частиц размером менее семи микрон, сначала взвесим кварцевый фильтр binder 3 и закрепим его на высокотом объемном пробоиборнике воздуха. Обложка фильтра с селектором размера частицы, чтобы собрать PM7 или оставить фильтр обнаружили, чтобы собрать общее приостановлено частиц. Запуск пробоя воздуха на 1000 литров в минуту непрерывно в течение семи дней. Загрузите предфильтры в единицу классификации размеров и установите единицу классификации размеров и резервный фильтр на низкотомный пробоитр воздуха. Запустите пробоиборщик воздуха на 116 пометов в минуту непрерывно в течение семи дней, чтобы собрать PM2.5 на резервном фильтре. При отделке выборки записывают общий объем потока. Взвесить фильтр и рассчитать вес собранных частиц. Печать фильтра в полиэтиленовый пакет и хранить его на 30 градусов по Цельсию.Следующий подготовить 500 микролитров 6X неспецифических протеазы коктейль и ацетат буфера и поместить его в dalasis мембраны с молекулярной массы отсечения 5000 дальтонов. Погрузите заполненную мембрану в 1 л ацетатного буфера и перемешайте ее при 4 градусах по Цельсию в течение 24-36 часов, заменяя буфер каждые 12 часов, чтобы удалить индогенный 3-нитротирозин и нитрит.Затем измерьте концентрацию белка в растворе диализной протеазы с помощью анализа белка бицинхониновой кислоты. После этого снимите фильтр из морозильной камеры и дайте ему прогреться до комнатной температуры, все еще запечатанный в сумке. Затем пробить до пяти 6 миллиметров в ширину кругов от твердых частиц, покрытых области фильтра, и поместить круги в 1,5 миллилитров микро центрифуги трубки. Подготовка 300 микролитров буфера ацетата, содержащего 50