Повышенные плюс лабиринт тест, в сочетании с видео, отслеживания программного обеспечения, чтобы исследовать Анксиолитический эффект экзогенных кетогенной добавки

Здесь мы представляем протокол для изучения изменений в уровень тревожности грызунов животных моделей. Повышенные плюс лабиринт (EPM) тест, используемый вместе с видео, отслеживания программного обеспечения, обеспечивает надежный метод для документирования эффект различных потенциальных анксиолитическое лечения в сценариях доклинических лаборатории.

Повышенный плюс лабиринт является методом документирования влияния различных потенциально анксиолитических методов лечения на лабораторные модели грызунов более гуманным способом по сравнению с другими методами. Основным преимуществом этого метода является то, что опирается на инстинктивную склонность грызунов как к темным, так и к закрытым пространствам, в дополнение к безусловному страху высоты и избеганию открытых пространств. Коллин Парк, сотрудник моей лаборатории, поможет продемонстрировать процедуру.

За несколько дней до тестирования, обрабатывать животных, собирая их за туловище и удерживая их в течение минуты, чтобы акклиматизировать их к экспериментатору. Затем, измерить вес тела животных, прежде чем начать какие-либо процедуры, чтобы определить дозировку расчета для лечения. Далее, ознакомить животных с интрагастрическим методом gavage с помощью воды по gavage в течение пяти дней до кетона добавок.

Для анализа тревоги используйте повышенный плюс лабиринт или EPM Apparatus, аппарат plus shaped с четырьмя руками с двумя открытыми и двумя закрытыми. Зажмите аппарат EPM, используя непрямое освещение с потолка вместо того, чтобы непосредственно освещать его. Убедитесь, что все четыре руки одинаково освещены.

Подключите клавишу установки программного обеспечения отслеживания движения в порт USB 2.0 и установите программное обеспечение. Затем зафиксируйте камеру над экспериментальной областью и убедитесь, что она будет оставаться неподвижной в течение всего эксперимента. Наконец, найте новый эксперимент в системе отслеживания движения с помощью руководства по обучению.

Поместите животное в экспериментальную зону. Затем начните процесс сбора данных, нажав кнопку «Пуск» на панели управления временем. В испытательном зале собирают данные EPM двумя способами, вручную и с помощью программного обеспечения.

Ослепленные наблюдатели разделены занавесом. Подождите, пока ene процесса отслеживания записи или нажмите кнопку остановки на панели управления временем. Затем удалите животное из экспериментальной зоны.

Наконец, чтобы получить доступ к инструменту анализа нажмите кнопку анализа в баре помощника эксперимента. Выберите испытания и интервалы времени для анализа и создания отчета. Начните с передачи крыс в их домашней клетке в экспериментальную комнату за 30 минут до начала эксперимента.

Поместите крысу на пересечении четырех рук EPM лицом к открытой руке напротив экспериментатора. Запустите программное обеспечение для отслеживания видео, а также вручную записывают поведение животного в течение пяти минут. Затем, если животное падает с EPM, возьмите его и поместите его обратно на той же точке EPM, где он упал.

Исключите поведенческие данные этого животного из анализа. В конце пятиминутного теста остановите программное обеспечение для отслеживания видео. Удалите животное из EPM, и поместите его обратно на свою домашнюю клетку.

Наконец, очистите EPM с дезинфицирующим моющим средством с последующим водопроводной водой. Высушите аппарат бумажными полотенцами. После хронического кормления крысы в группе KSMCT провели значительно больше времени на сеяных объятиях по сравнению с контрольной группой.

Группа KS провела в центре значительно больше времени по сравнению с контрольной группой. И меньше времени тратится в закрытых руках в LKE, KS, KSMCT групп по сравнению с контролем. Крысы в группах KS и KSMCT преодолевали значительно большие расстояния на открытых объятиях.

В то время как крысы в группах LKE, KS и KSMCT показали значительно меньшее расстояние, пройденное в закрытых руках по сравнению с контрольной группой. Кроме того, после семи дней устного gavage время, проведенное в сеяных объятиях было больше в группе KE, но сократилось в центре для КЕ, KS, и KSMCT групп. После семи дней работы в группах КЕ и КС число лиц, ввяленных в закрытое оружие, также значительно сократилось.

Очень важно разместить всех крыс на оборудовании в последовательной усадьбе на пересечении, обращенной от экспериментатора. Анализ EPM на грызунах является подходящим и чувствительным методом для исследования влияния различных методов лечения, которые влияют на области мозга, участвующие в анксиолитический эффект и механизмы действия.