Роман процесс для 3D печати Decellularized матрицы

Этот метод позволяет совместно печатать как структурную синтетику, так и биологические компоненты для тканевых эшафотов. Эти леса могут реплицировать родной среде ткани более точно, что может быть полезным для культурных клеток. Основным преимуществом этой техники является то, что он может печатать механически звуковые структуры, не повреждая биологический материал, инкапсулированный в лесах в все-в-одном метод для тканевой инженерии.

Производите микросферы с нужной матрицей, инкапсулированной. Эти микросферы были сделаны с децеллюляризованным хрящом из свиных задних конечностей. Они различаются по размеру.

Работа с сито машины для получения микросфер одинакового размера. Убедитесь, что три подноса сито были тщательно очищены и высушены перед использованием. Соберите сито шейкер с большим лоток сетки на вершине и меньше сетки лоток в середине.

Положите сито кастрюлю на дно. Поместите сухие микросферы в самый верхний лоток. Затем поместите крышку на поднос.

Грубое сито в течение восьми-десяти минут. Затем мелкое сито в течение восьми-десяти минут. Ожидая, организовать взвешивание бумаги для просеяных сфер.

Когда сито завершено, аккуратно снимите сито лоток. Поместите лоток вверх дном на бумагу для взвешивания. Аккуратно коснитесь сторон, чтобы обеспечить большинство сфер выпадают.

Со всеми сито пластины опорожняются на вес бумаги, отказаться от негабаритных и негабаритных сфер. Остальные сферы имеют правильный размер для использования в последующих шагах. Поместите эти сферы в помеченную центрифугу.

Храните трубку в морозильной камере 20 градусов по Цельсию до необходимости. Взвесить материал, необходимый для того, чтобы сделать материал нити. Сделайте соотношение веса микросфер от одного до четырех с порошоком поликапролактона не менее чем 25 граммами микросфер.

Перенесите порошковую смесь в миниатюрный скользящий миксер. Смешайте порошок при 20 вращениях в минуту в течение пяти минут. Через пять минут остановите вращение и переверните контейнер.

Затем перемешать при 20 об/мин в течение еще пяти минут. Чтобы продолжить, возьмите смесь на экструдер и катушки установки. Настройка экструдера таким образом, чтобы его розетка была примерно в 60 сантиметрах от входной части катушки.

Затем на экструдере нагревательный элемент, убедитесь, что нет изоляционной куртки. Поместите настольный вентилятор примерно на полпути между экструдером и spooler, чтобы охладить экструдат. Положите еще один вентилятор возле нагревательной куртки, чтобы охладить его с окружающим воздухом.

Далее убедитесь, что надлежащее сопло крепится к экструдеру и устанавливает температуру нагревательного элемента. Запустите вентиляторы охлаждения и позвольте инструменту достичь стабильного состояния. Через 20-30 минут, получить микросферу PCL смеси и заполнить экструдер бункера.

Включите катушки и экструдер auger инициировать экструзии нити. Используйте типсы и вручную потяните начальную экструдированную нить. Кормите нитью нитью катушки.

Как это экструдированный, наблюдать нить, чтобы определить его состав. Через некоторое время нить состава появится равномерной, которая является желаемой. Оберните ленту вокруг нити, чтобы отметить начало равномерной области.

Помимо катушковых роликов, следите за диаметром нити. Используйте калиперы, чтобы проверить, если диаметр близок к желаемому 1,75 мм. Отрегулируйте скорость и температуру выдавитель и выдавитель по мере необходимости.

Чтобы отрегулировать диаметр нити, сначала измените скорость катушки и экструдера. Вы также можете изменить температуру экструдера, хотя это, как правило, не требуется. Продолжайте заправку бункера и экструдирование до тех пор, пока не будет использован весь порошок.

Когда бункер почти пуст, добавьте порошок PCL в бункер, чтобы избавиться от микросферной смеси. Мониторинг экструдата при добавлении порошка PCL. Во-первых, микросферы будут по-прежнему видны в экструдате.

В конце концов, когда больше не микросферы видны, прекратить добавлять PCL. Отделить и обозначить нить микросферами в нужной концентрации. Когда в бункере есть минимальный порошок, прекратите экструдирование и выключите оборудование.

Нить может быть использована в стандартном сплавленном принтере моделирования осаждения. Загрузите нить в принтер, который оснащен соплами нужного диаметра. С помощью загруженной модели установите температуру и линейную скорость для печати и начните хранение нити.

Обычай нити откладывается слой за слоем. Обратите особое внимание на первый слой и отрегулируйте настройки по мере необходимости. Эти два 3D печатных леса трудно различить в этом масштабе.

Один имеет нить, содержащую поликапарактон, pcL только. Другой имеет нить PCL со встроенными микросферами полилактической кислоты и децеллюализованных матриц. Рассматривается с помощью сканирующей электронной микроскопии, PCL только эшафот появляется в основном гладкой.

В отличие от других нитей, микросферы, встроенные в PCL видны по всему образцу. При попытке этой процедуры, важно помнить, что более или недостаточно микросферы могут повлиять на динамику потока материала в экструдере. По этой причине, не забудьте правильно подготовить ваши микросферы до использования.

Для того, чтобы свести к минимуму отходы, желательно создать одну большую партию нити, необходимых для всех экспериментов, а не создавать меньшие партии чаще. Экспертиза в производстве нити придет с течением времени. Scaffolds производства после этой процедуры могут быть дополнительно оценены в пробирке и in vivo ответить на дополнительные вопросы о повышенной индукции и механической прочности по сравнению с другими био-печатных лесов.

После своего развития, этот метод проложил путь для исследователей в области тканевой инженерии, чтобы исследовать противопоказанные индукции decelluarized свиной матрицы в 3D леса. Не забывайте, что работа с мелкими частицами может представлять респираторную опасность. Ношение небольшой маски твердых частиц во время этой процедуры рекомендуется.