Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells

Katherine Chan; Amy  Hin Yan Tong; Kevin  R Brown; Patricia Mero; Jason Moffat

doi:10.3791/59780

Объединенные ГЕНЕТИЧЕСКИе экраны на основе CRISPR в клетках млекопитающих

JoVE Journal
Genetics

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Genetics

Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells

Объединенные ГЕНЕТИЧЕСКИе экраны на основе CRISPR в клетках млекопитающих

Full Text

23,293 Views

09:05 min

September 4, 2019

DOI: 10.3791/59780-v

Katherine Chan*¹, Amy Hin Yan Tong*¹, Kevin R Brown¹, Patricia Mero¹, Jason Moffat^1,2,3

¹Donnelly Centre,University of Toronto, ²Department of Molecular Genetics,University of Toronto, ³Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Технология CRISPR-Cas9 обеспечивает эффективный метод точного редактирования генома млекопитающих в любом типе клеток и представляет собой новое средство для выполнения генетических экранов генома. Здесь представлен подробный протокол, в котором обсуждаются шаги, необходимые для успешного выполнения объединенных экранов CRISPR-Cas9, в масштабах всего генома.

Экранированные экраны ДЛЯ отсева CRISPR предоставляют исследователям простой, эффективный и недорогой метод допроса цепной функции на уровне генома. Преимуществом CRISPR является его ответственность редактировать любой ген, просто изменив последовательность руководства. Библиотеки руководств CRISPR позволяют исследователям объективно, систематически допрашивать весь геном любого организма в ходе одного эксперимента.

В настоящее время экраны CRISPR используются для выявления основных генов в сотнях случаев рака человека и для карты генетических взаимодействий. Экраны могут также всесторонне профиль наркотиков выявить лекарственные механизмы действия. Библиотеки CRISPR, описанные здесь, нацелены на человеческие клетки.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos