19 ноября 2020 г.
Этот протокол описывает имплантацию коронарных стентов человека в брюшную аорту крыс с апоЭ-/- фоном с использованием трансфеморального доступа. По сравнению с другими моделями животных, модели мурина имеют преимущества высокой пропускной способности, воспроизводимости, простоты обработки и жилья, а также широкой доступности молекулярных маркеров.
В этом протоколе используется животная модель для создания доступного метода характеристики воздействия коронарных стентов человека на сосудистую патологию. Основные преимущества нашей модели заключаются в том, что она малоинвазивна, обладает высокой воспроизводимостью и легко выполняется даже исследователями с небольшим операционным опытом. Демонстрировать процедуру будет Роберта Флореску, врач нашей лаборатории.
После этой процедуры могут быть использованы другие клинические и патологоанатомические диагностические инструменты, такие как оптическая когерентная томография или гистологический анализ. После подтверждения отсутствия реакции на педальный рефлекс у взрослой крысы, находящейся под наркозом, положите крысу на грелку в положении лежа на спине с полностью вытянутой правой задней конечностью и на одной линии с позвоночником, а верхние и нижние конечности зафиксируйте медицинской лентой. Нанесите мазь на глаза животного и сбрейте шерсть с паха и нижней части живота.
Затем простерилизовать открытые участки кожи раствором повидон-йода. Для имплантации стента сделайте медиальный разрез от 0,5 до одного сантиметра в правом паху, чтобы открыть кожу и подлежащую фасцию, и тупо рассекайте и зондируйте ткань до тех пор, пока не будет расположена пульсирующая левая бедренная артерия. С помощью очень тонких щипцов аккуратно удалите соединительную ткань, окружающую артерию, и осторожно введите верхнюю часть щипцов под сосуд.
Продеть кусочки шелкового шва 4-0 под дистальный и проксимальный отделы артерии сформировать стропы и зажать концы каждой из двух ниток строп между ветвями хирургического зажима. Используйте хирургические зажимы для контроля артерии и мягко растягивайте и поднимайте артерию, чтобы временно прервать кровоток. С помощью острых микроножниц быстро выполнить артериотомию в середине бедренной артерии и ввести в артериотомию направляющую проволоку.
Когда проксимальный слой нити будет достигнут, переместите хирургический зажим, чтобы ослабить натяжение нити и продвинуть направляющую проволоку к брюшной аорте. Введите в бедренную артерию обжатый и установленный на баллоне коронарный стент размером 2,25 на восемь миллиметров через направляющую проволоку. Продвигайте стент к брюшной аорте до тех пор, пока он не окажется чуть выше бифуркации аорты, но ниже почечных артерий.
Когда стент будет на месте, используйте систему надувательных шприцев, чтобы надуть баллонный катетер до номинального давления. Через 15 секунд сдуйте баллонный катетер и поддерживайте отрицательное давление в соответствии с рекомендациями производителя для используемого стента. Затем медленно извлеките спущенный катетер, оставляя стент на месте.
Непосредственно перед снятием направляющей проволоки используйте хирургический зажим, чтобы создать натяжение резьбовой петли над разрезом, чтобы прервать кровоток и удалить направляющую проволоку. Непосредственно перевязать сосуд проксимально и перевязать проксимальные и дистальные нитевые петли для перевязки бедренной артерии. Затем подтвердите адекватный гемостаз артериотомии и используйте нерезорбируемые швы 6-O для закрытия мышцы, лежащей над артерией, и разрез кожи.
В этом репрезентативном анализе коронарные стенты размером с человека были успешно развернуты без признаков деформации или повреждения сосуда. У крыс с нокаутом гомозиготного аполипопротеина Е развилась заметно повышенная гиперплазия неоинтимы и рестеноз стента по сравнению с крысами дикого типа. Несмотря на то, что нокаутный фон аполипопротеина Е делает животных более восприимчивыми к атеросклерозу, атеросклеротических бляшек у этих крыс в анамнезе не наблюдалось.
Выбор подходящего размера стента для каждого животного и использование крыс весом более 500 граммов для имплантации коронарного стента у человека имеют решающее значение для успеха процедуры.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Этот протокол описывает имплантацию человеческих коронарных стент в брюшную аорту крыс с использованием трансфеморального доступа. Модель является минимально инвазивной и высоко воспроизводимой, что делает ее подходящей для исследователей с ограниченным опытом проведения операций.
This protocol enables preclinical evaluation of human-sized coronary stents in a rat model, addressing a key translational gap in stent development. By using apoE-/- rats, researchers can assess neointimal hyperplasia and in-stent restenosis without stent miniaturization artifacts. The model supports mechanistic de-risking and predictive confidence in early-stage cardiovascular device evaluation.
The method fits within the discovery continuum from target validation to lead identification, enabling early assessment of vascular device performance.