Мониторинг активации А аврора-киназы в режиме реального времени с использованием конформационных биосенсоров FRET в живых клетках

3.6K просмотров

Цитируется: 5

06:29 мин.

30 июля 2020 г.

10.3791/61611-v

30 июля 2020 г.

3.6K просмотров

Активация многофункциональной Ser/Thr киназы AURKA характеризуется ее автофосфорилированием на Thr288. Флуоресцентные зонды, полагающиеся на FRET, могут различать его неактивные и активированные состояния. Здесь мы иллюстрируем некоторые стратегии для разработки зондов вместе с быстрым протоколом FRET для отслеживания активации киназы на протяжении всего митоза.

Больше видео

Визуализация времени жизни флуоресценции

Chapters in this video

0:04

Introduction

1:13

Cell Synchronization

1:42

FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions

2:50

Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison

3:53

Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images

5:52

Conclusion

0:36

Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection

Related Videos