Операционная поперечная сужение аорты с абсорбируемой шов для получения переходной гипертрофии миокарда

Данный протокол представляет собой усовершенствованный метод получения транзиторной гипертрофии миокарда с использованием рассасывающихся швов, который стимулирует снижение гипертрофии левого желудочка после снятия давящейся перегрузки. Используя этот протокол, исследователи могут легко освоить модель с более низкой операционной смертностью. Демонстрировать процедуру будет Сяося Хуан, техник из моей лаборатории.

Начните с того, что отщипните кончик иглы 25 калибра иглодержателем и затупите его. Затем пропустите рассасывающийся шов 5/0 через эту иглу и согните тупую иглу под углом 90 градусов с помощью держателя. Отщипните кончик другой иглы 25 калибра, затем согните его под углом 120 градусов и разгладьте кончик держателем, который будет использоваться в качестве прокладки на этапе лигирования.

Подготовьте стерилизованные хирургические инструменты, в том числе одни офтальмологические ножницы, одни микроножницы, два микрохирургических пинцета для локтей, один иглодержатель и один микроиглодержатель. Чтобы начать операцию, подтвердите полную анестезию мыши с помощью рефлекса отмены педали. Удерживайте мышь в лежачем положении, зафиксировав резцы швом и зафиксировав конечности скотчем.

Удалите волосы с шеи и продезинфицируйте область йодом и 75%-ным спиртом. Начните операцию с разреза на расстоянии более 10 миллиметров по средней линии между надгрудинной выемкой и грудной клеткой. Затем отделите кожу и поверхностную фасцию.

Сделайте надрез в первом межреберье как можно ближе к грудине и тупо проникните, чтобы открыть это пространство локтевым пинцетом. Аккуратно отделите паренхиму и вилочковую железу, пока не станет видна поперечная дуга аорты. Проведите рассасывающийся шов 5/0 под дугой аорты между брахиоцефальной артерией и левой общей сонной артерией с помощью иглы-фиксатора.

Поместите подготовленную ранее спейсер на поперечную аорту и сделайте двойной узел на спейсере со швом. Аккуратно, но быстро снимите спейсер и обрежьте концы шва. Закройте первое межреберье и кожу с помощью нейлоновых швов 5/0.

Еще раз продезинфицируйте кожу 75%-ным спиртом. Через семь дней после операции поместите мышь в положение лежа на спине, поддерживая ее на уровне 37 градусов по Цельсию, и прикрепите ее конечности к электроду. Удалите волосы на груди и нанесите ультразвуковое средство на грудь мыши.

Затем получите доступ к TAC с помощью зонда с частотой 30 мегагерц. Наклоните платформу влево. Держите щуп в вертикальном положении и опустите его на грудь по правой парастернальной линии.

Отрегулируйте оси X и Y в B-режиме до тех пор, пока дуга аорты и сужение не станут четко видны. Используя режим Допплера, измерьте пиковую скорость, размеры и сократительную способность левого желудочка. Выберите мышей со скоростью более 3000 миллиметров в секунду в качестве группы TAC.

С помощью зонда с частотой 30 мегагерц оцените размеры левого желудочка и сократимость. Установите платформу в горизонтальное положение, удерживая щуп под углом 30 градусов против часовой стрелки к левой опорной линии. Получите изображение сердца по короткой оси, манипулируя осями X и Y в B-режиме.

Затем нажмите M-режим, чтобы отобразить линию индикатора и получить изображения с помощью Cine Store и Frame Store для последующего измерения размера камеры LV, дробного укорочения и толщины стенки LV. Импульсно-волновая допплерография, выполненная после 14 дней TAC, показала, что скорость кровотока в месте сужения была более 3000 миллиметров в секунду, даже несмотря на то, что для сужения дуги аорты был использован рассасывающийся шов. Градиент давления кровотока после 14 дней TAC поддерживался на уровне выше 40 миллиметров ртутного столба.

Интересно, что на четвертой неделе после операции не было сужения, что указывает на то, что рассасывающийся шов был полностью рассас. Здесь показаны параметры левого желудочка в группе шелкового шовного материала и в группе рассасывающегося шовного материала на нулевой, 14-й и 28-й дни после TAC на визуализации в М-режиме. На 14-е сутки после ТАКА толщина задней стенки левого желудочка в конце диастолы увеличилась, в то время как внутренний диаметр левого желудочка в конце диастолы незначительно уменьшился.

Фракция выброса левого желудочка не изменялась при использовании рассасывающихся швов. Здесь показано сравнение соотношения массы сердца к массе тела в группе шелковых шовных материалов, группе рассасывающихся шовных материалов и фиктивной группе. Гистологические срезы сердца показали, что кардиомиоциты значительно увеличились с 14-го по 28-й день в группе шелковых швов, но в основном регрессировали на 28-й день в группе рассасывающихся швов.

При использовании этого протокола наиболее важно не повредить родительскую плевру, чтобы избежать пневмоторакса. Обязательно максимально затупите кончик иглы и выполняйте процедуру аккуратно. Существует множество потенциальных применений этого метода, таких как создание модели прекондиционирования гипертрофии миокарда, изучение механизма регрессии гипертрофии и исследование времени обратимого ремоделирования левого желудочка.