Генетическая модификация первичных пигментных эпителиальных клеток человека на основе электропорации с использованием транспозонной системы «Спящая красавица»

2.3K просмотров

Цитируется: 3

07:04 мин.

4 февраля 2021 г.

10.3791/61987-v

4 февраля 2021 г.

2.3K просмотров

Sandra Johnen¹ , Nina Harmening²^,³ , Corinne Marie⁴^,⁵ , Daniel Scherman⁴ , Zsuzsanna Izsvák⁶ , Zoltán Ivics⁷ , Peter Walter¹ , Gabriele Thumann²^,³

¹Department of Ophthalmology, University Hospital RWTH Aachen, ²Experimental Ophthalmology, University of Geneva, ³Department of Ophthalmology, University Hospitals of Geneva, ⁴Université de Paris, CNRS, INSERM, UTCBS, Unité des technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, ⁵Chimie ParisTech, PSL Research University, ⁶Max Delbrück Center for Molecular Medicine in the Helmholtz Association, ⁷Division of Medical Biotechnology, Paul-Ehrlich-Institute

Мы разработали протокол для трансфекции первичных пигментных эпителиальных клеток человека путем электропорации с геном, кодирующим фактор, полученный из пигментного эпителия (PEDF), с использованием транспозонной системы Sleeping Beauty (SB). Успешная трансфекция была продемонстрирована количественной полимеразной цепной реакцией (qPCR), иммуноблоттингом и иммуноферментным анализом (ИФА).