Генерация и характеристика инфаркта миокарда правого желудочка, вызванного перманентным перевязкой правой коронарной артерии у мышей

Правый желудочек более устойчив к ишемии, чем левый. Мы ввели методику генерации модели инфекции правого желудочка, которая может уточнить патофизиологический механизм при развитии инфаркта правого желудочка. Мы обнаружили правую коронарную артерию с помощью сосудистой кости и определили область перевязки, которая имеет решающее значение для успешного создания модели инфаркта правого желудочка мыши.

Продемонстрировать процедуру будет Линьхай Руо, врач-плакат из моей лаборатории. Поместите мышь лежа на подушечку и обеспечьте глубину анестезии отсутствием реакции на снятие пальца ноги. Закрепите его резцы швом и обездвижите конечности скотчем.

Удалите волосы с шеи до клифоса с помощью крема для депиляции. Слегка вытяните язык пинцетом, поднимите нижнюю челюсть депрессором языка, чтобы обнажить голосовую щель. И выполните интубацию внутри трахеи, вставив канюлю 22 калибра в голосовую щель.

Правильно подключите электрокардиографические электроды к конечностям мыши и запишите ЭКГ. Чтобы открыть грудную клетку, сделайте разрез длиной в один сантиметр в коже, параллельно третьему правому ребру с помощью офтальмологических ножниц. Еще раз определите третье межреберное пространство и обеспечьте достаточное пространство в соответствии с углом грудины.

Отделите и разрезайте большую грудную и грудную мышцы ножницами и микрощипцами над третьим межреберным пространством. После этого тупо отделяют межреберную мышцу локтевыми щипцами, чтобы обнажить операционное поле, затем разрезают перикард. Поднимите правое предсердие стерильным хлопком и обложите правую коронарную артерию стерильным 8-0 нейлоновая нить, с диапазоном перевязки от трех до пяти миллиметров.

После перевязки правой коронарной артерии обратите внимание на мониторинг ЭКГ-провода 3, показывающего подъем сегмента ST. Удалите ватные и шовные мышцы и кожу стерильной нейлоновой нитью 5-0. Затем поместите мышь на грелку, чтобы способствовать восстановлению.

Поместите мышь в положение лежа на спине на ультразвуковой платформе для фиксации животных и ультразвуковой работы. Прикрепите его когти к электроду, чтобы получить запись ЭКГ, через систему, прикрепленную к ультразвуковому аппарату. Удалите волосы с груди мыши кремом для депиляции и нанесите ультразвуковой гель на кожу грудной клетки.

Установите платформу в горизонтальное положение. Ориентируйте преобразователь параллельно левой ноге и получайте изображение длинной оси левого желудочка. Поверните зонд на 90 градусов по часовой стрелке, чтобы получить вид левого желудочка с коротким доступом.

Нажмите кнопку киномагазина, чтобы сохранить изображения. Наклоните верхнюю левую часть платформы в самой низкой точке. Двигайтесь вниз по датчику вертикально, сохраняя его положение над верхней частью живота и ниже диафрагмы мыши в режиме B.

Слегка отрегулируйте положение платформы, повернув ее оси X и Y, пока на экране не будут видны правый желудочек, правое предсердие, левое предсердие и левый желудочек. И сохраните изображение, нажав кнопку киномагазина или рамки. Нажмите M-режим.

После появления двух индикаторов X найдите индикаторную линию на отверстии трехстворчатого клапана, чтобы получить движение трехстворчатой годовой плоскости. Нажмите M-Mode еще раз. Нажмите кнопку кинохранилища или хранилища кадров, чтобы сохранить данные и изображения.

Наклоните левую сторону платформы в самой низкой точке. Поместите зонд под углом 30 градусов к горизонтальной оси вдоль правой передней подмышечной линии. Поверните оси X и Y платформы, чтобы отобразить правый желудочек.

Нажмите кнопку M-Mode и найдите линию индикатора в гиперэховой точке перегородки, чтобы получить изображение M-Mode интерфейса правого желудочка. Нажмите кнопку M-Mode еще раз. Нажмите кнопку киномагазина, чтобы сохранить изображение.

Выполните интубацию трахеи и задайте параметр вентилятора животного. Сделайте односантиметровый двусторонний разрез на коже над мечевидным отростком и пересекните диафрагму и ребро офтальмологическими ножницами, чтобы обнажить сердце. Прокол правого желудочка свободной стенкой иглой 32 калибра.

Удалите иглу и прижмите рану хлопком, чтобы остановить кровотечение. Вставьте кончик катетера в правый желудочек через место пункции и медленно толкайте катетер вперед. Отрегулируйте положение наконечника, чтобы получить типичную форму волны давления RV, отображаемую на мониторе и системе записи.

После 10 минут стабилизации запишите данные RV систолического артериального давления, RV и диастолического давления, а также RV максимального повышения давления правого желудочка, снижающегося скорости. Нажмите на кнопку выбора, чтобы выбрать сердечные циклы для расчета. А затем нажмите на анализируемую кнопку, чтобы рассчитать средние значения выбранных циклов.

Поместите животное лежа на спине на подушечку и интубируйте для искусственной вентиляции легких. Откройте грудную клетку хирургическими ножницами и обнажите сердце. Сделайте трехмиллиметровую выемку с помощью офтальмологических ножниц на правом предсердии и перфьминируйте сердце 5 мл нормального физиологического раствора через сердечную вершину с помощью инъектора.

Блокировать кровь из аорты с помощью аортального зажима. И перфузировать 0,1 мл 1 мг / мл нитроглицерина через сердечную вершину с помощью инъектора для расширения коронарной артерии. Перфузируйте сердце реагентом 1 мл через сердечную вершину и подождите два-три часа.

Размывают сердце 50% гидроксидом натрия в течение двух-трех дней. И удалить мышечную ткань или соединительную ткань путем полоскания обычным физиологическим раствором. После лигирования RCA повышение сегмента ST наблюдалось в свинце 3 ЭКГ.

Окрашивание хлоридом 2, 3, 5-трифенилтетразолия показало, что на область инфаркта приходится 45% свободной стенки RV через 24 часа после операции. Эхокардиография показала, что внутренний размер RV в конце диастолы, увеличивается в RV1. И это было более двух раз в группе Sham.

Укорочение фракции RV, фракция выброса RV и систолическая экскурсия трикуспидальной кольцевой плоскости были значительно меньше в RVI. Соотношение площади RV к площади ЛЖ увеличилось примерно на 50% RV гемодинамическое измерение показало, что в группе RVI систолическое артериальное давление правого желудочка максимальная и минимальная скорость повышения давления RV, сократимость RV, были значительно меньше. Правожелудочковое и диастолическое давление и экспоненциальная постоянная времени индекса релаксации RV были значительно более значительными, чем в группе Sham.

Аневризма RV была видна в инфарктной области. Отношение веса сердца к массе тела и отношение веса сердца к длине большеберцовой кости в группе RVI были немного больше. Окрашивание Массона указывало на значительный фиброз в свободной стенке RV.

И редко фиброз возникал в перегородке группы RVI. Напротив, несколько выживших кардиомиоцитов находились в области инфаркта. Крайне важно обнажить область перевязки и захватить глубину и диапазон вставленной иглы, чтобы увеличить успех и выживаемость.