Мышиная модель дисфункции рук, связанной с гемодиализом

Это единственная животная модель, доступная для изучения механизмов, ответственных за ишемию кисти, связанную с диализным доступом. Модель обеспечивает надежную платформу для изучения сложного взаимодействия между уремией и нервно-мышечными возмущениями, возникающими в результате гемодинамических изменений в результате хирургии артериальных венозных свищей. Дисфункция рук, связанная с доступом, затрагивает до 60% пациентов, находящихся на гемодиализе, и может серьезно повлиять на качество жизни пациентов.

Эта модель помогает нам понять инвалидность и протестировать новые методы лечения. Продемонстрирует процедуру доктор Раймонд Ким, научный сотрудник нашей лаборатории. Для начала поместите анестезированную мышь в положение лежа на спине на операционный стол, покрытый стерильной драпировкой, и нанесите глазную смазку, чтобы защитить глаза от высыхания во время операции.

Используя триммер для ручки, сбрейте волосы на животе для операции и волосы на ногах для послеоперационных измерений перфузии, а затем удалите волосы с операционного поля. Далее зафиксируйте верхние и нижние конечности резинками и прихватками. Проверьте глубину анестезии, контролируя рефлекс защемления пальцев ног, и при необходимости титруйте анестезию.

Выполняйте оценку характера дыхания каждые три-пять минут на протяжении всей хирургической процедуры, чтобы откалибровать уровень анестезии. Сделайте срединную лапаротомию от нижнего края грудины до лобкового симфиза и рассеките жировую подушечку лобка, чтобы получить более широкое операционное поле. Откройте целиотомию, чтобы получить доступ к содержимому брюшины, и накройте кишечник пропитанной физиологическим раствором нетканой губкой.

Далее тщательно рассекают периваскулярную фасцию и жировую ткань примерно на один сантиметр проксимальнее до бифуркации аорты, доходя до уровня левой бифуркации подвздошной кости с помощью прямых щипцов Дюмона и небольших двусторонних твердых ватных тампонов с острыми острыми точками. Затем проведите кончиком угловых щипцов под левым общим пучком подвздошных сосудов и аккуратно распределите несколько раз, чтобы мобилизовать сосуды от нижележащей забрюшинной мускулатуры. Наложите два шелковых шва 4-0 вокруг изолированного левого общего венозного пучка подвздошной артерии и используйте их в качестве лигатур к сосудистому пучку.

Затем создайте один узел с каждым шелковым галстуком 4-0 и наложите их последовательно, проксимально, а затем дистально. Затем, используя шелковые шовные струны 4-0 в качестве ручек, поверните пучок венозных сосудов левой подвздошной артерии по часовой стрелке и точно отрегулируйте положение, чтобы временно расположить вену спереди от артерии. Сделайте продольную венотомию размером примерно один миллиметр прямыми пружинными ножницами Vannas и аккуратно смойте остатки крови из венозного просвета 0,9%-ным физиологическим раствором.

Затем наложите нейлоновый шов 10-0 через заднюю стенку вены. После этого возьмите пораженные концы швов и поместите их под легкое натяжение, чтобы сместить переднюю стенку от задней стенки подвздошной артерии. Затем сделайте эллиптический разрез размером примерно 1,0 на 0,3 миллиметра с помощью изогнутых пружинных ножниц Ваннаса, удалив прилипшие стенки как подвздошной артерии, так и вены.

Осторожно промойте остаточную кровь из обнаженного просвета артерии 0,9%-ным физиологическим раствором и гепаринизированным физиологическим раствором. После создания артериального венозного свища восстановите первоначальную венотомию передней стенки, используя два-три нейлоновых шва 10-0 в прерывистом режиме. После этого восстановите сосудистый пучок в его первоначальной анатомической ориентации и поместите небольшой кусочек пропитанной физиологическим раствором рассасывающейся желатиновой губки рядом с восстановленным венотомом, чтобы облегчить гемостаз.

Затем ослабьте лигатуры поперечного зажима с одним узлом 4-0 последовательно от дистального к проксимальному, внимательно следя за местом венотомии на предмет чрезмерного кровотечения. Аккуратно протрите сосудистый пучок небольшими двусторонними твердыми ватными тампонами с острыми острыми точками, которые еще больше облегчают восстановление кровотока. Затем подтвердите технический успех операции с помощью визуализации пульсирующей ярко-красной насыщенной кислородом крови, поступающей в подвздошную вену и смешивающейся с темной венозной кровью, возвращающейся из задней конечности.

Введите гепаринизированный физиологический раствор в нижнюю полую вену для системной антикоагуляции, чтобы улучшить результаты проходимости артериального венозного свища, и повторно осмотрите место операции на предмет гемостаза после инъекции гепаринизированного физиологического раствора. Если нет проблем с кровотечением, закройте срединную фасцию, а затем разрез кожи рассасывающимися швами 5-0 PGA в беговой манере. Ультразвуковая допплерография использовалась для проверки проходимости артериального венозного свища.

Цветной допплер выявил турбулентное течение в месте свища, а пульсирующее спектральное расширение было визуализировано при допплеровской оценке импульсной волны. Если свищ открыт, аорта имеет повышенную пиковую систолическую и конечную диастолическую скорость, тогда как нижняя полая вена развивает пульсацию с повышенной пиковой скоростью. Расширение сосудов как в аорте, так и в нижней полой вене проявляется при последовательных предоперационных и послеоперационных измерениях.

Ультразвуковые измерения В-режима и пульсовой волновой допплерографии после операции выявили расширение сосудов притока и оттока и увеличение пиковой систолической скорости по сравнению с фиктивными животными. Лазерная допплеровская оценка задних конечностей показала, что дефицит перфузии левого POD составляет примерно 20% от контралатеральной конечности после операции с постепенным восстановлением с течением времени. Дефицит перфузии передней большеберцовой мышцы составил примерно 60% после операции с аналогичным восстановлением.

Нейромоторная функция задних конечностей была количественно определена с помощью тестирования силы захвата и анализа паттерна походки на беговой дорожке, которые выполнялись последовательно в течение всего периода восстановления. Ожидаемая односторонняя сила захвата составляет примерно 50% контралатеральной конечности на четвертый послеоперационный день с постепенным восстановлением. Каждый этап микрохирургии должен выполняться с особой осторожностью, чтобы избежать потенциальной травмы нерва или сосудов, которая может вызвать существенные изменения как в гемодинамике, так и в патологии конечностей.

После характеристики модели удалось изучить множество исследований, изучающих биологические факторы нервно-мышечной дисфункции, возникающей в результате размещения артериовенозной фистулы.