-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Псевдоостровковая система человека для синхронной оценки динамики флуоресцентных биосенсоров и се...
Псевдоостровковая система человека для синхронной оценки динамики флуоресцентных биосенсоров и се...
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Human Pseudoislet System for Synchronous Assessment of Fluorescent Biosensor Dynamics and Hormone Secretory Profiles

Псевдоостровковая система человека для синхронной оценки динамики флуоресцентных биосенсоров и секреторных профилей гормонов

Full Text
2,551 Views
08:04 min
November 3, 2023

DOI: 10.3791/65259-v

Tiffany M. Richardson*1, Yasminye D. Pettway*1, John T. Walker1, Heather A. Nelson2, Matthew Ishahak3, Gregory Poffenberger2, Radhika Aramandla2, Conrad Reihsmann2, Ashutosh Agarwal3, Alvin C. Powers1,2,4, Marcela Brissova2

1Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University School of Medicine, 2Division of Diabetes, Endocrinology and Metabolism, Department of Medicine,Vanderbilt University Medical Center, 3Department of Biomedical Engineering,University of Miami, 4VA Tennessee Valley Healthcare System

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study addresses beta cell dysfunction and islet abnormalities in diabetes, utilizing a pseudoislet model system for synchronous acquisition of cellular signaling and hormone secretion. The method employs adenoviral delivery of a cAMP biosensor and a microperifusion system to enable dynamic analysis of insulin and glucagon responses.

Key Study Components

Research Area

  • Type 1 and Type 2 diabetes
  • Human islet biology
  • Cell signaling dynamics

Background

  • Human islets are spherical structures presenting experimental challenges.
  • The pseudoislet protocol resolves these challenges for effective biosensor introduction.
  • Understanding islet signaling is critical for diabetes research.

Methods Used

  • Adenoviral delivery for biosensor expression
  • Primary human pseudoislet model
  • Microperifusion system for hormone secretion measurement

Main Results

  • Successful co-registration of intracellular signaling and hormone release.
  • Enabled analysis of gene silencing effects on islet function.
  • Dynamic monitoring of secretion responses in real-time.

Conclusions

  • This study provides a robust protocol for examining islet hormone signaling.
  • It has significant implications for understanding islet biology in diabetes.

Frequently Asked Questions

What are human pseudoislets?
Human pseudoislets are 3D aggregates of human islet cells used to study insulin and glucagon secretion dynamics.
How does the cAMP biosensor work?
The cAMP biosensor detects cyclic adenosine monophosphate levels, providing insight into intracellular signaling events in real-time.
What is the significance of using a microperifusion system?
The microperifusion system allows for precise control and measurement of hormone secretion in response to various stimuli.
How can this protocol be applied in future research?
It can be used to investigate gene silencing effects and other cellular perturbations on islet function.
Why is understanding islet function important?
Understanding islet function is crucial for developing effective therapies for diabetes management and prevention.
What challenges does the pseudoislet protocol overcome?
It allows for genetic manipulations at the single-cell level and better access to the interior of islets for comprehensive analysis.
What types of imaging are utilized in this study?
Bright field and dark field imaging are employed for monitoring cultured pseudoislets during experiments.

В этом протоколе описан метод синхронного сбора и совместной регистрации внутриклеточных сигнальных событий и секреции инсулина и глюкагона первичными псевдоостровками человека с использованием аденовирусной доставки циклического биосенсора аденозинмонофосфата (цАМФ), детектора разности цАМФ in situ (cADDis) и микроперифузионной системы.

Наша лаборатория работает над изучением, предотвращением и обращением вспять дисфункции бета-клеток и других аномалий век при диабете первого и второго типа. Наши исследования сосредоточены на патогенезе диабета человека, объединяя исследования биологии поджелудочной железы и век человека, а также здоровья и болезней. Человеческие глазки представляют собой сферические трехмерные структуры, и доступ к клеткам по всей длине глаза представляет собой некоторые экспериментальные проблемы.

Например, при попытке внедрить биосенсоры для понимания передачи сигналов клетками глазков, наш протокол псевдовек преодолевает эту проблему, выполняя генетические манипуляции в состоянии одной клетки и агрегируя эти трансдуцированные клетки глаз человека в псевдовеки для последующих исследований. Наша псевдосистема век позволяет нам экспрессировать биосенсоры по всему глазу, а не только по поверхности века. В сочетании с нашей системой визуализации живых клеток и системой микроперфузии мы можем измерять и регистрировать динамические внутриклеточные процессы с последующей секрецией гормонов.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

В этом месяце в JoVE выпуск 201

Related Videos

Параллельное измерение циркадных часов экспрессии генов и гормональную секрецией человека первичных клеточных культур

06:53

Параллельное измерение циркадных часов экспрессии генов и гормональную секрецией человека первичных клеточных культур

Related Videos

8.9K Views

Конфокальный изображений нейропептида Y-pHluorin: техника для визуализации экзоцитоз гранул инсулина в нетронутыми мышиных и человеческих островках

09:41

Конфокальный изображений нейропептида Y-pHluorin: техника для визуализации экзоцитоз гранул инсулина в нетронутыми мышиных и человеческих островках

Related Videos

9.7K Views

Однородное время решены Фёрстер резонанс энергии на основе передачи Assay для обнаружения секреции инсулина

07:30

Однородное время решены Фёрстер резонанс энергии на основе передачи Assay для обнаружения секреции инсулина

Related Videos

9.8K Views

Измерение относительной секреции инсулина с помощью совместно секретной суррогатной Люциферазы

05:58

Измерение относительной секреции инсулина с помощью совместно секретной суррогатной Люциферазы

Related Videos

8K Views

Создание срезов ткани поджелудочной железы человека для изучения эндокринной и экзокринной физиологии поджелудочной железы

08:16

Создание срезов ткани поджелудочной железы человека для изучения эндокринной и экзокринной физиологии поджелудочной железы

Related Videos

2.2K Views

Живая изображений Сотовые Ф-актина Динамика через Флуоресцентный Спекл микроскопия (FSM)

19:16

Живая изображений Сотовые Ф-актина Динамика через Флуоресцентный Спекл микроскопия (FSM)

Related Videos

16.5K Views

Отслеживание динамики мышц приживления у мелких животных по В Vivo Флуоресцентные изображения

08:15

Отслеживание динамики мышц приживления у мелких животных по В Vivo Флуоресцентные изображения

Related Videos

10.2K Views

Селективный захват 5-hydroxymethylcytosine из геномной ДНК

06:26

Селективный захват 5-hydroxymethylcytosine из геномной ДНК

Related Videos

12.4K Views

Биохимические и высокая пропускная способность Микроскопическая оценка жировой массы в Caenorhabditis Элеганс

16:07

Биохимические и высокая пропускная способность Микроскопическая оценка жировой массы в Caenorhabditis Элеганс

Related Videos

21.3K Views

Профили микроРНК выражение человеческой плюрипотентных клеток, пигментного эпителия сетчатки, полученных из IPS, и плода пигментного эпителия сетчатки

10:19

Профили микроРНК выражение человеческой плюрипотентных клеток, пигментного эпителия сетчатки, полученных из IPS, и плода пигментного эпителия сетчатки

Related Videos

11.9K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code