3,348 Views
•
13:36 min
•
October 20, 2023
DOI:
Область исследований группы гликоиммунологии направлена на изучение роли гликановой иммунологии в здоровье и болезнях человека. Это исследование направлено на то, чтобы распутать биологические механизмы, модулируемые гликозилированием, и найти новые гликановые методы лечения рака и врожденных нарушений гликозилирования. Наше внимание было сосредоточено на сиалированных гликанах, которые влияют на функцию соответствующих молекул, особенно во время ответа.
Мы разработали технологии изменения содержания сиаловой кислоты и мультимодальную платформу для высокопроизводительного растворения гликансвязывающих белков с потенциальными клиническими применениями. Для продвижения исследований в этой области мы используем несколько технологий, таких как профилирование гликанов, селекция или окрашивание антител, масс-спектрометрия и иммуногистохимия, анализы in vitro с клеточными линиями в качестве моделей заболеваний, манипуляции с содержанием сиаловой кислоты с помощью ферментативной и метаболической инженерии. Текущие экспериментальные задачи связаны с пониманием сложных взаимодействий между сиалированными гликанами и лектинами.
Существуют механизмы и функциональные последствия нескольких иммунных реакций. Сиаловая кислота модулирует активность дендритных клеток и оборот MHC1. Это открытие выявило новые биологические и патологические механизмы и разработало инновационные методы лечения.
Кроме того, были выявлены новые иммунные пути и подходы к их терапевтической модуляции. Одной из проблем в производстве de vivo дендритных клеток, полученных из моноцитов человека, для терапевтического использования, является их неспособность полностью созреть. Этот протокол показывает, что созревание ДК может быть достигнуто путем ферментативной обработки поверхности клетки сиалидазами при сохранении жизнеспособности клеток.
Этот метод экономичен и экономит время. По сравнению с ингибиторами метаболизма сиаловой кислоты, лечение сиалидазой предлагает быстрый, эффективный метод удаления сиаловых кислот с клеточной поверхности при сохранении жизнеспособности клеток. Понимание роли содержания сиаловой кислоты в гликанах порождает некоторую прецедентную осведомленность о важности этого гликана при раке и будет способствовать выявлению новых механизмов заболевания и стратегий нейропатов.
Представлен уникальный комплексный протокол получения десиалированных дендритных клеток человека (mo-DCs) из изолированных мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) с использованием терапии сиалидазой. Кроме того, описаны методы оценки фенотипической и функциональной характеристики мо-ДК и оценки того, как лечение сиалидазой улучшает уровень созревания мо-ДК.
07:34
Генерация и маркировки костного мозга мышей-дендритных клеток с Qdot нанокристаллов для отслеживания исследований
Видео по теме
24845 Views
09:04
Выделение мышиные клетки легких Дендритные
Видео по теме
28960 Views
12:43
Поколение новой дендритно-клеточной вакцины с использованием меланомы и плоскоклеточных раковых стволовых клеток
Видео по теме
11398 Views
09:04
Активация и Измерение NLRP3 Inflammasome деятельности Использование IL-1β в человека моноцитов дендритные клетки
Видео по теме
20755 Views
08:18
Экстракорпоральное поколение мышиный плазмоцитов дендритных клеток из общего предшественники лимфоидных клеток с использованием Feeder System АС-6
Видео по теме
8359 Views
06:09
Поколение незрелые, зрелые и толерогенную дендритных клеток с отличающимися метаболический фенотипов
Видео по теме
22909 Views
06:46
Культура макрофагальный колониестимулирующий фактор Дифференцированный человеческого моноцитов макрофаги
Видео по теме
29068 Views
08:31
Характеристика человека моноцитов дендритные клетки путем обработки изображений проточной цитометрии: Сравнение между двумя моноцитов Isolation протоколов
Видео по теме
13441 Views
07:35
Поколение человеческих моноцитов дендритных клеток из цельной крови
Видео по теме
20126 Views
02:16
Генерация незрелых, зрелых и толерогенных дендритных клеток из моноцитов
Видео по теме
245 Views
Read Article
Цитировать это СТАТЬЯ
Luz, V. C. C., Silva, Z., Sobral, P., Tanwar, A., Paterson, R. L., Videira, P. A. Generation of Monocyte-Derived Dendritic Cells with Differing Sialylated Phenotypes. J. Vis. Exp. (200), e65525, doi:10.3791/65525 (2023).
Copy