Мы стремимся получить молекулярное представление о контроле нормального и злокачественного кроветворения, а затем использовать эти знания для разработки новых методов лечения рака крови. Опухолевые ксенотрансплантаты являются незаменимым инструментом для оценки влияния генетического изменения или лечения на поведение опухоли. Тем не менее, ксенотрансплантаты мышей являются дорогими, трудоемкими и ограниченными по объему.
Использование данио-рерио для ксенотрансплантации опухолей преодолевает все эти недостатки. В этом протоколе мы демонстрируем простой и быстрый процесс монтажа ксенотрансплантации, который увеличивает пропускную способность. Кроме того, мы используем окрашивание клеток, чтобы узнать качество инокулюма, а затем проточную цитометрию для оценки прогрессирования опухоли путем оценки или количественной оценки бремени заболевания.
Мы намерены использовать этот подход для выявления новых способов блокирования функции каскада киназ Ras/MAP, который вызывает подавляющее большинство раковых заболеваний человека. И мы сделаем это, не пытаясь блокировать каталитическую активность каскада киназ Ras/MAP, а скорее предотвращая его способность фосфорилировать те вызывающие рак субстраты, которые он модифицирует.
Verma, M., Rhodes, M., Shinton, S., Wiest, D. L. A Simple, Rapid, and Effective Method for Tumor Xenotransplantation Analysis in Transparent Zebrafish Embryos. J. Vis. Exp. (209), e66164, doi:10.3791/66164 (2024).