Анализ электрокардиограмм и поведения мышей от беременности до периода лактации

Наше исследование сосредоточено на физиологических изменениях у матерей от беременности до лактации, а также на том, как они влияют на поведение матери и развитие ее щенков. Мы стремимся определить, как физиология матери адаптируется для поддержания здорового роста и развития ее потомства. Применение территорий у беременных мышей позволяет непрерывно отслеживать ЭКГ от беременности до лактации, что дает представление об автоматической активности во время репродуктивного события. Этот метод приводит к более естественным наблюдениям за поведением, а одновременная запись ЭКГ дает четкое представление об изменении физиологии матери.

Наши исследования улучшили методы хирургии и наблюдения за мышами, что позволило наблюдать за мышами в течение длительного времени.

Наше исследование помогает нам понять, как физическая реакция матери во время беременности и лактации с точки зрения автоматической активности. Наше исследование может привести к улучшению материнской заботы и поддержки развития детенышей, а также может вдохновить на новые подходы к изучению репродукции не только у животных, но и у людей.

В будущем мы планируем исследовать, где матери, совершившие детоубийство или пренебрежение в естественной среде, имеют различия в вегетативной активности и поведении матерей от беременности до лактации по сравнению с нормальными матерями. Мы считаем, что этот протокол также будет полезен для понимания факторов, лежащих в основе пренебрежения и детоубийства.

[Инструктор] Для начала поместите мышь под наркозом в положение лежа на панельном обогревателе. С помощью ножниц сделайте разрез кожи между ушами, затем вставьте щипцы в разрез, чтобы отделить кожу и мышцы вокруг шеи и вентральной стороны, создавая пространство для размещения телеметра. Теперь вставьте телеметр через разрез между ушами и поместите его в созданное пространство с вентральной стороны. С помощью щипцов сверните и свяжите положительные и отрицательные провода телеметра и поместите эти провода в пространство для шеи. Чтобы закрыть разрез, используйте 13-миллиметровую иглу и 20-сантиметровый шовный материал. Далее поместите мышь в положение лежа на спине. С помощью ножниц сделайте небольшой разрез вокруг кожи ключицы и отделите мышцы от кожи шеи. С помощью щипцов извлеките положительные и отрицательные отведения с задней части шеи. Затем аккуратно отделите слюнные железы, чтобы обнажить V-образный вид грудино-ключично-сосцевидной мышцы. После этого отрегулируйте длину отрицательного провода так, чтобы он достиг грудино-ключично-сосцевидной мышцы рядом с ключицей, и осторожно удалите трубку провода из отрицательного провода. Теперь проденьте швейную иглу с 10-сантиметровым швом через V-образный изгиб грудино-ключично-сосцевидной мышцы, чтобы создать петлю. Проденьте электрод из нержавеющей стали из отрицательного провода через эту петлю и расположите его под мышцей возле ключицы. Слегка завяжите петлю, чтобы зафиксировать электрод из нержавеющей стали, не повредив грудино-ключично-сосцевидную мышцу. Далее наложите второй шов на краниальную сторону мышцы и завяжите его вокруг трубки отрицательного провода, чтобы зафиксировать его. После этого разрежьте вокруг мечевидного отростка и осторожно отделите кожу от мышцы между мечевидным отростком и ключицей. Затем удлините положительный отросток, чтобы достичь мечевидного отростка. Снимите свинцовую трубку с положительного провода, убедившись, что спиральный электрод из нержавеющей стали внутри растянут с помощью тонкого пинцета. Затем с помощью иглы 18 калибра создайте туннель под мышцей вокруг мечевидного отростка. Затем поместите электрод из нержавеющей стали в иглу и пропустите его через мышцу вокруг мечевидного отростка. После того, как игла будет удалена, с помощью швейной иглы с 10-сантиметровым швом слегка пришить спиральный электрод из нержавеющей стали к мышце вокруг мечевидного отростка. Чтобы еще больше закрепить положительный отросток, наложите второй шов на краниальную сторону мечевидного отростка и завяжите его вокруг трубки положительного отведения. С помощью швейной иглы с 20-сантиметровым швом закройте все разрезы. После имплантации поместите мышь в чистую клетку. Для начала поместите мышь с телеметром в каркас и расположите каркас на Т-образном основании, которое действует как приемник для телеметрии мыши. Включите записываемый компьютер и используйте установленное программное приложение для анализа данных для сбора данных электрокардиограммы с мыши. Затем, используя приложение для лабораторной карты на записываемом компьютере, запишите электрокардиограмму. Чтобы проанализировать данные электрокардиограммы, запустите LabChart и откройте файл с данными за период записи. Нажмите на кнопку «ВСР» и отрегулируйте настройки определения ритма соответствующим образом, чтобы проанализировать вариабельность сердечного ритма. Затем нажмите кнопку «ВСР» и выберите вид «Классификатор ударов». Выберите все биты в окне Классификатор битов и выберите Вид отчета с помощью кнопки ВСР. Скопируйте данные из представления отчета и вставьте их в Excel для дальнейшего анализа. Анализ электрокардиограммы показал, что частота сердечных сокращений уменьшалась постепенно, в то время как интервал частоты дыхания постепенно увеличивался от GD 17 до PD 21. Анализ ВСР показал, что отношение низкой и высокой частоты резко возросло от PD 0 до PD 21.