Оценка активности репарации двухцепочечного разрыва ДНК с использованием высокопроизводительных и количественных репортерных анализов на основе люминесценции

Компания Artios разрабатывает новые противораковые препараты, нацеленные на реакцию на повреждение ДНК. Чтобы сделать это возможным, мы разработали ряд новых анализов для измерения активности репарации клеточной ДНК. Эти анализы оказали значительное влияние на наши программы, что привело к тому, что клинические активы были протестированы на пациентах с высокими неудовлетворенными медицинскими потребностями.

Точное измерение целевой клеточной активности имеет важное значение для разработки новых таргетных методов лечения. Создание анализов на факторы репарации ДНК с необходимыми свойствами для стимулирования эффективной кампании по разработке лекарств было сложной задачей, будь то потребность в высокой пропускной способности, надежном соотношении сигнал/шум, быстром обороте и, в идеале, переносимости в различные биологические системы. Мы разработали набор надежных, количественных и титруемых репортерных анализов на основе люминесценции для измерения эффективности четырех основных путей восстановления двухцепочечных разрывов: гомологичной рекомбинации, негомологичного соединения концов, микрогомологически опосредованного соединения концов и одноцепочечного отжига.

Эти репортерные анализы подтверждены как считывающие репарацию, зависящую от пути, чувствительны к фармакологической модуляции и имеют быстрое время выполнения. Разработанные нами ремонтные подложки являются внехромосомными, поэтому их можно временно трансфицировать в интересующие модели и легко масштабировать в формат с высокой пропускной способностью. Мы считаем, что наши системы анализа играют важную роль в открытии лекарств для РДР, а также в углублении нашего понимания биологии РДР в более широком смысле.

В связи с этим мы надеемся, что эти методы помогут ускорить выявление и преследование новых мишеней для лекарств, что приведет к созданию лекарств для лечения таких заболеваний, как рак, где существует высокая неудовлетворенная медицинская потребность.