5/6 Нефрэктомия с использованием острой биполэктомии через срединную лапаротомию у крыс
4 апреля 2025 г.
В данной рукописи представлен стандартизированный протокол для нефрэктомии 5/6 путем острой биполэктомии через срединную лапаротомию на модели крысы, направленный на индуцирование состояния почечной недостаточности путем редукции почечной паренхимы с высокой степенью методической точности и низким риском технической ошибки.
Сферой деятельности этой специфической области наших исследований является предоставление высокостандартизированных и контролируемых моделей животных для конкретных состояний и заболеваний. Используя этот протокол для субтотальной нефрэктомии, мы предоставляем стандартизированную модель почечной недостаточности у крыс. Наш протокол предлагает преимущество интраабдоминальной оси по отношению к другим висцеральным органам.
Это особенно ценно, если для желаемой животной модели требуются одновременные процедуры на других органах. Наиболее актуальной в настоящее время экспериментальной проблемой является тот факт, что хирургическое уменьшение общей почечной паренхимы на стандартизированное количество не обязательно приводит к той же степени почечной недостаточности. Таким образом, может потребоваться дальнейшая послеоперационная сертификация с помощью лабораторных испытаний.
Для начала разложите на операционном столе полифиламентные лигатуры, петли для силиконовых сосудов, тупые зажимы для капитального ремонта, ножницы для тонкой подготовки, щипцы, гемостатические пластыри, аппараты для воздействия, грелку и крючки для подготовки к операции. Крысе, находящейся под наркозом, внесите 100% кислород через неонатальную маску для лица. Выбрейте желаемую область доступа и продезинфицируйте место операции, применяя стерилизованные ватные тампоны круговыми движениями, чередуя скрабы из 70% этанола и повидон-йода.
Чтобы выполнить срединную мини-лапаротомию, сделайте первоначальный примерно трехсантиметровый срединный разрез кожи над животом, за которым следует разрез на фасции по белой линии. Добейтесь хирургического обнажения почки с помощью хирургических компрессов и подготовительных крючков. Затем только прикасайтесь к почечной паренхиме увлажненными ватными тампонами.
Обнажите почку, захватив околопочечный жир, прикрепленный к фасции Героты. Натяните фасцию, чтобы локально приподнять фасцию от почечной паренхимы. Надрежьте и подорвите фасцию острым концом одного лезвия ножниц и продолжайте продольным рассечением фасции Героты.
Далее выполните тупое снятие перчаток с фасции героты с помощью закрытых ножниц. Постепенно подрывайте фасцию вокруг паренхимы и сворачивайте фасциальную капсулу медиально. Перевяжите ворота почки силиконовой петлей для сосудов для лучшего контроля сосудов.
Поместите кончик щипцов в забрюшинное пространство, чтобы стабилизировать почку и избежать дорсального побега почки во время процесса разрезания. Затем с помощью ножниц выполнить краниальную острую колэктомию на одну треть почечной за один точный прицельный взмах. Добиться гемостаза можно с помощью наложения гемостатического пластыря или с помощью ручного компрессии тупыми инструментами.
В качестве альтернативы можно наложить прикорневой зажим YASARGIL для уменьшения кровотока. Выполняйте каудальную острую почечную колэктомию на одну треть так же, как и краниальную колэктомию. Используйте плоскость диссекции под углом, чтобы сохранить больше почечной паренхимы на прикорневой стороне и меньше на боковой стороне, чтобы избежать травмы прикорневой мышцы и уменьшить утечку мочи из тазовой системы.
После мобилизации почки туннелируйте почечные ворота с помощью тупых зажимов для капитального ремонта, переведите почечные ворота полифиламентной лигатурой. Наложите надежный скользящий узел на ворота почки рядом с сосудами брюшной полости, чтобы перекрыть почечный кровоток и мочеточник. Резко рассеките ворота с помощью ножниц и удалите почку.
Затем контролируйте гемостаз и отрежьте концы лигатуры. Наложите угловой шов на брюшную фасцию с помощью полифиламентного шва. Продолжайте накладывать шов на брюшную фасцию с помощью бегущего шва, захватывая примерно два миллиметра ткани за каждый укус и располагая каждый укус на расстоянии четырех миллиметров друг от друга.
Сшивайте кожный слой одиночными стежками, захватывая три миллиметра ткани за один укус и оставляя шесть миллиметров между каждым стежком. Физиологические показатели остаточной паренхимы почки показали уровень оксигенации примерно 60%, что указывает на жизнеспособность после резекции. Мальперфузированная почечная ткань показала значительно более низкий уровень оксигенации на 20,9%, что соответствует нежизнеспособной ткани.
Показатели перфузии указывали на физиологическую перфузию в остаточной почке, укрепляя жизнеспособность тканей.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данной рукописи представлен стандартизированный протокол выполнения 5/6 нефрэктомии путем острой биполэктомии на модели крысы. Целью является индукция почечной недостаточности с высокой точностью и минимальной технической погрешностью.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Нефрология
- Животные модели
- Хирургические методы
Теоретическая часть
- Стандартизированные модели животных имеют решающее значение для изучения конкретных патологий.
- Субтотальная нефрэктомия является методом индуцирования почечной недостаточности.
- Доступ к внутрибрюшным органам полезен для проведения одновременных процедур.
- Вариабельность исходов почечной недостаточности требует проведения лабораторных тестов после операции.
Цель исследования
- Создать надежную модель почечной недостаточности у крыс.
- Повысить точность хирургических методов при проведении нефрэктомии.
- Обеспечить возможность проведения исследований заболеваний почек и методов их лечения.
Используемые методы
- Нефрэктомия 5/6 путем острой биполэктомии.
- Доступ через срединную лапаротомию.
- Контролируемые условия проведения операции для минимизации ошибок.
- Послеоперационные лабораторные исследования для оценки функции почек.
Основные результаты
- Протокол позволяет точно уменьшить объем паренхимы почек.
- Низкий риск технических ошибок во время операции.
- Облегчает доступ к другим висцеральным органам при необходимости.
- Послеоперационные результаты могут потребовать дальнейшей оценки.
Выводы
- Стандартизированный протокол эффективен для индукции почечной недостаточности.
- Для подтверждения степени почечной недостаточности необходимо проведение дальнейших исследований.
- Данная модель может помочь в изучении заболеваний почек.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для промышленности
Стандартизированная нефрэктомия 5/6 у крыс представляет собой надежную доклиническую модель хронической болезни почек, позволяющую снизить механистические риски и обеспечить трансляционную преемственность в исследованиях почек. Данная модель поддерживает фармацевтические и биомолекулярные исследования, обеспечивая воспроизводимую биологическую сложность и возможность валидации с помощью интраоперационной визуализации. Ее точность и воспроизводимость имеют решающее значение для принятия решений по разработке препаратов и межфункциональной координации НИОКР в области поиска лекарственных средств для лечения нефрологических заболеваний.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Первичный поиск и валидация мишени
- Позволяет исследовать патофизиологию почек и проверять терапевтические гипотезы в контролируемой системе in vivo.
- Способствует снижению биологических рисков за счет моделирования многофакторной почечной недостаточности, имеющей значение для заболеваний человека.
- Облегчает функциональную валидацию мишеней для потенциальных методов терапии ХБП.
Скрининг и разработка анализа
- Предоставляет валидированную модель на животных для количественной оценки функции почек и жизнеспособности тканей.
- Обеспечивает стандартизацию и воспроизводимость в доклинических исследованиях эффективности и биомаркеров.
- Позволяет объективно оценивать методы визуализации, такие как гиперспектральная визуализация, для анализа почечной перфузии.
Трансляционные и доклинические исследования
- Соответствует релевантным конечным точкам заболевания для разработки трансляционных биомаркеров при ХБП.
- Обеспечивает непрерывность процесса от этапа поиска до доклинической валидации за счет моделирования сложной патологии почек.
- Снижает трансляционный риск путем имитации механизмов почечной недостаточности у человека.
Интеграция в конвейер и рабочий процесс
Данная модель интегрирована в континуум от поиска до доклинических исследований, обеспечивая поддержку идентификации ведущих соединений, изучение механизмов и валидацию трансляционных биомаркеров в исследованиях почек.
- Фундаментальная биология: способствует проверке гипотез и уточнению путей развития механизмов почечных заболеваний.
- Скрининг: обеспечивает воспроизводимые количественные показатели функции почек и перфузии тканей.
- Аналитика: позволяет измерять оксигенацию и перфузию для сравнения эффектов вмешательства.
- Трансляционные исследования: поддерживает согласование биомаркеров и доклиническую валидацию методов терапии ХБП.
- Корпоративное использование: предоставляет стандартизированную, многократно используемую платформу для различных областей исследований почек.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: повышает прогностическую достоверность и снижает механистическую неоднозначность при моделировании ХБП.
- Операционная ценность: обеспечивает стандартизацию, воспроизводимость и масштабируемость исследований почек.
- Стратегическая ценность: улучшает принятие решений о продолжении или прекращении разработки (go/no-go) и повышает эффективность использования капитала за счет снижения биологических рисков на поздних стадиях.
- Влияние на портфель: позволяет осуществлять приоритезацию и продвижение кандидатов в терапию заболеваний почек с учетом скорректированных рисков.
Особенности реализации
- Требуется хирургический опыт проведения нефрэктомии у грызунов и предоперационного и послеоперационного ухода.
- Необходим доступ к специализированному инструментарию для точной резекции тканей и интраоперационного мониторинга.
- Требуется стандартизация между исследовательскими группами для обеспечения воспроизводимости и сопоставимости данных.
- Может потребоваться адаптация протокола для различных линий грызунов или моделей с сопутствующими заболеваниями.
- Послеоперационные лабораторные исследования необходимы для подтверждения степени почечной недостаточнольности в связи с биологической вариабельностью.
