Эффективный метод отбора проб молока у лабораторных мышей с участием одного человека
28 марта 2025 г.
В этой статье описано, как собрать устройство, которое можно использовать для сбора молока от лабораторных мышей. Это устройство является недорогим, портативным и позволяет собирать 0,1–0,5 мл молока одним обученным человеком. Также включен подробный протокол доения.
Это исследование направлено на совершенствование методов отбора проб молока в исследованиях лактации, особенно у мышей. Мы представляем метод, который преодолевает такие проблемы, как потеря пробы, ограниченный объем и трудоемкие процессы, предлагая оптимизированное решение для сбора молока грызунов и ценный инструмент для исследователей в этой области. Одной из самых больших проблем при проведении исследований на мышах является их небольшой размер, особенно когда речь идет о отборе проб биожидкостей, таких как молоко.
Трудно получить достаточный объем без объединения образцов или ручного сбора двух человек, что делает этот процесс менее практичным во многих случаях. Наш протокол упрощает сбор молока, позволяя одному человеку собрать достаточное количество молока менее чем за 10 минут с помощью легкодоступных лабораторных инструментов. В отличие от других методов, он сводит к минимуму потери проб благодаря непрерывному всасыванию, втягивая молоко непосредственно в сборные пробирки, экономя время и сохраняя объем для анализа.
Для начала прикрепите один конец трубки из ПВХ внутреннего диаметра 5/32 дюйма к вакуумному насосу и закрепите крепление лентой. С помощью прямого соединителя с зазубринами подсоедините другой конец трубки из ПВХ внутреннего диаметра 5/32 дюйма к трубке из ПВХ внутреннего диаметра 1/8 дюйма. Затем с помощью соединителя прикрепите другой конец трубки из ПВХ внутреннего диаметра 1/8 дюйма к игле для подкожных инъекций 18 калибра.
С помощью ножниц отрежьте конец наконечника пипетки P200 примерно на 0,2 сантиметра, чтобы создать отверстие большего размера. Вставьте модифицированный наконечник пипетки P200 через отверстие ограничителя перегородки так, чтобы наконечник был направлен вверх, и прикрепите ограничитель перегородки к стерильной трубке для сбора. С помощью иглы для подкожных инъекций 18 калибра проколите стопор перегородки.
Теперь включите вакуумный насос, чтобы проверить давление всасывания, поместив палец в перчатке на отверстие кончика пипетки В день дойки отделите мать от ее щенков, чтобы молоко накапливалось в железах. Держите детенышей в тепле в гнезде. После обезболивания плотины сильно сожмите фут плотины, чтобы оценить восприятие животного ощущений и боли.
Затем нанесите ветеринарную офтальмологическую мазь на глаза матери, чтобы предотвратить сухость во время анестезии. Поместите обезболенную дамбу на ее спину на твердую рабочую поверхность. Аккуратно очистите молочную область плотины стерильной спиртовой салфеткой.
Введите одну-две единицы окситоцина внутрибрюшинно между четвертой и пятой парой сосков на стороне брюшинной полости, которая не получала никаких инъекций. Аккуратно загрифуйте область шейки плотины недоминирующей рукой. Затем сожмите ткань молочной железы от основания до кончика соска до тех пор, пока не станет видна капелька молока.
Включите пылесос нажатием кнопки включения. Чтобы начать доение, аккуратно приложите перевернутый наконечник пипетки P200 к соску и легким тянущим движением вытяните молоко. Доите все соски до тех пор, пока не будет собран достаточный объем молока.
После этого верните наркозную корову в клетку и убедитесь, что она находится в тепле в течение периода восстановления после анестезии. От 0,1 до 0,5 миллилитров молока может быть собрано с каждой матери менее чем за 10 минут. Концентрация молочного жира значительно увеличилась со 174,4 грамма на литр во второй день после родов до 224,4 грамма на литр в 10-й день после родов.
Концентрации лактозы и общего белка не показали существенных различий между вторым днем после родов и днем 10 после родов. Относительное содержание альфа-S1-казеина и кислого белка сыворотки было выше в молоке после родов на 10-й день по сравнению с молоком на второй день после родов, в то время как бета-казеин был более распространен в послеродовом молоке на второй день, чем в послеродовом молоке на 10-й день. Интенсивность белковых полос на геле для электрофореза визуально подтвердила различия в относительном содержании отдельных молочных белков.
Обзор
Это исследование посвящено вопросам образцов молока для исследований лактации у мышей, предлагая оптимизированный метод, который позволяет одному человеку эффективно собирать достаточный объем. Протокол улучшает существующие методики, минимизируя потери образцов и уменьшая трудоемкость.
Ключевые компоненты исследования
Область исследования
- Исследования лактации
- Сбор молока грызунов
- Методики отбора биожидростей
Предпосылки
- Отбор молока у мышей представляет собой уникальные трудности из-за их малого размера.
- Традиционные методы часто требуют участия нескольких лиц и приводят к потере образцов.
- Эффективные методики важны для точных исследовательских результатов.
Используемые методы
- Использование вакуумного устройства для непрерывной аспирирующей сбора
- Мыши в качестве биологической модели
- Комбинация стандартных лабораторных инструментов для сборки и применения
Основные результаты
- Облегченный сбор 0,1–0,5 мл молока менее чем за 10 минут.
- Значительные изменения в концентрации жира в молоке, наблюдаемые со временем.
- Различия в относительной обилии белков молока в разные дни после родов.
Выводы
- Это исследование демонстрирует практический подход к сбору молока мышей, который помогает в исследованиях лактации.
- Значимость метода заключается в его потенциале для повышения точности данных при отборе биожидростей.
Часто задаваемые вопросы
Executive Industry Relevance
Efficient and reproducible milk sampling from laboratory mice is critical for lactation and neonatal development studies, enabling quantitative analysis of milk composition under experimental conditions. This single-person technique addresses longstanding bottlenecks in biofluid collection, supporting robust data generation and reducing operational complexity in early discovery workflows. The method enhances predictive confidence in nutritional and developmental studies by ensuring sample integrity and standardization.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables precise interrogation of lactation biology and nutritional pathways in rodent models.
- Supports functional validation of experimental manipulations affecting milk composition.
- Facilitates mechanistic de-risking by providing reliable, quantitative milk samples for downstream analysis.
Screening & Assay Development
- Prepares validated milk samples for standardized macronutrient and protein assays.
- Improves assay reproducibility by minimizing sample loss and operator variability.
- Enables scalable, single-operator workflows for high-throughput experimental designs.
Translational & Preclinical Research
- Aligns rodent milk composition studies with translational biomarker discovery in neonatal development.
- Supports continuity from basic research to preclinical validation of nutritional interventions.
- Reduces biological risk by ensuring consistent sample quality across experimental cohorts.
Pipeline & Workflow Integration
This technique integrates into the early discovery and preclinical continuum, bridging hypothesis-driven research and quantitative assay development in rodent models.
- Discovery Biology: Provides robust sample collection for hypothesis testing of lactation and developmental pathways.
- Screening: Delivers reproducible, quantitative milk samples for macronutrient and protein analysis.
- Analytics: Enables direct comparison of milk composition across experimental timepoints and conditions.
- Translational Research: Supports alignment of rodent data with human neonatal nutrition studies when relevant.
- Enterprise Reuse: Offers a standardized, scalable protocol adaptable across research teams and studies.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in lactation research.
- Operational Value: Streamlines workflows with single-operator efficiency and minimizes sample loss.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision-making by enabling reliable, quantitative data generation.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of nutritional and developmental research programs.
Implementation Considerations
- Requires technical proficiency in rodent handling and anesthesia.
- Needs access to basic laboratory equipment such as vacuum pumps, tubing, and collection tubes.
- Demands cross-team standardization for reproducibility in multi-site studies.
- May require adaptation for use in other small animal models.
- Sample volume limitations inherent to mouse physiology must be considered in experimental design.
