Эффективный протокол для оценки модуляции активности ERK на ранних моделях синдрома данио-рерио Нунан с помощью живой FRET-микроскопии и иммунофлуоресценции

1.1K просмотров

09:58 мин.

2 мая 2025 г.

10.3791/67831-v

2 мая 2025 г.

1.1K просмотров
 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

RASopathies — это мультисистемные генетические синдромы, вызванные гиперактивацией пути RAS-MAPK. Потенциально патогенные варианты, ожидающие валидации, появляются постоянно, в то время как слабые доклинические данные ограничивают терапию. В этой статье мы описываем наш протокол in vivo для тестирования и перекрестной проверки уровней активации ERK, ассоциированных с RASopathy, и ее фармакологической модуляции во время эмбриогенеза с помощью визуализации FRET в реальном времени

Больше видео

Модели на данио-рерио

Chapters in this video

0:00

Введение

0:30

Микроинъекции и обработка эмбрионов zebrafish для FRET-визуализации и анализа ингибирования MEK

2:13

Мультиспектральная FRET-визуализация живых моделей RASопатий на zebrafish

4:57

Постпроцессинг и разделение красителей для ратиометрической FRET-визуализации

7:03

Количественный анализ FRET-сигналов и рендеринг изображений

8:14

Оценка морфологических фенотипов и анализ изображений эмбрионов zebrafish

9:41

Заключение

Related Videos