Простая и эффективная процедура лечения гемостаза в артериях мышей

В этом исследовании разработан метод герметизации проколов артерий при сохранении кровотока. Она исследует, предотвращает ли жировая упаковка ишемии после пукции артерии. Ключевой экспериментальной задачей в этой процедуре является достижение эффективного гемостаза после артериальной пункции без её окклюзии.

Для начала разместите обезболочённую мышь на операционном столе. После подтверждения анестезии удалите волосы из шейной и черепной областей с помощью депилятора. Дезинфицируйте открытую кожу повидонов йодом, затем 75% этанолом, чтобы удалить остатки.

Положите мышь на грелку, установленную на 37 градусов Цельсия, и держите её там на протяжении всей экспериментальной процедуры. Переместите мышь в положение на спине на грелке. После среднего разреза шейки матки вырезают подкожный жировой трансплантат размером три на три на один миллиметр для дальнейшего использования.

Проведите тупую диссекция поднижнечелюстной железы, грудной подъязычной мышцы и грудино-ключно-сомноговидной мышцы, чтобы обнажить обе общие сонные артерии. Затем аккуратно освободить общую сонную артерию, чтобы открыть внутреннюю и внешнюю сонные артерии. Поставьте сосудистый зажим один на дистальный конец общей сонной артерии, а затем сосудистый зажим второй на проксимальный конец артерии.

Далее проколите общую сонную артерию между двумя зажимами иглой 23-го калибра. После удаления иглы обмотайте общую сонную артерию в месте прокола, используя разрезанную поверхность или не-серозу сторону ранее собранной жировой подушечки. Наложите шов размером 4-0 под артерию, обёрнутую жиром.

Аккуратно завяжите один плед на жировую поверхность, чтобы приложить давление для надёжного контакта между жировой подушечкой и стенкой сосуда. Затем постепенно корректируйте лигатуру, чтобы сбалансировать давление и достичь гемостаза. Поднять дистальную общую сонную артерию с помощью увлажнённой ватной палочки.

Освободите сосудистый зажим один и медленно уберите мазок, чтобы обеспечить постепенное возвращение кровотока к месту прокола. Теперь проверьте кровоток в месте прокола. Если наблюдается активное кровотечение, повторно установите сосудистый зажим на дистальную общую сонную артерию.

Через минуту медленно отпускайте сосудистый зажим один. Если кровотечение продолжается, переместите жировую подушечку или немного затяните лигатуру, чтобы увеличить давление до полного гемостаза. Поднимите проксимальную общую сонную артерию с помощью увлажнённой ватной палочки.

Далее отпустите сосудистый зажим два и медленно уберите мазок, чтобы обеспечить контролируемый кровоток к месту прокола. Если возникает кровотечение, повторно наложите сосудистый зажим два на дистальную общую сонную артерию. Теперь немного затяните один бросок шва, чтобы увеличить давление, и подождите одну минуту.

Затем поднимите проксимальную общую сонную артерию и отпустите сосудистый зажим два, медленно прокатывая влажный мазок к месту прокола. Добавьте ещё один бросок с тем же швом, чтобы получить двойной узел поверх первого броска — улучшить фиксацию жировых подушек и способствовать сбалансированному гемостазу. Убедитесь, что общие сонные артерии с обеих сторон жировой подушки заполнены и поддерживают стабильный диаметр сосудов, что указывает на успешное восстановление кровотока.

В конце зашивайте шейный разрез и наносите антисептик на место раны. До- и послеоперационные лазерные спектральные изображения и измерения перфузионной единицы как у фиктивных, так и у оперированных мышей не выявили значимых изменений, что подтверждает, что процесс артериального гемостаза не нарушил кровоток в мозге. Гистологическое исследование мозговой ткани с помощью окрашивания гематоксилином и эозином через семь, 14 и 28 дней после операции у оперированных мышей и у фиктивных мышей показало целостность структуры тканей коры, гиппокампа и таламуса без патологических изменений.

Окрашивание Nissl показало организованное выравнивание нейронов, нормальную клеточную структуру и сохранение тел nissl во всех группах и временных точках, что указывает на отсутствие структурных повреждений из-за закрытия артерий. Данный метод направлен на герметизацию места прокола после процедуры, при сохранении нормального кровотока и предотвращения послеоперационной ишемии.