Оценка дряхлости на стареющей мышиной модели

Старение сопровождается постепенной потерей нормальных функций и различается у разных людей. Хрупкость отражает неспособность поддерживать функционирование при стрессовых факторах. Изучение хрупкости может помочь лучше понять изменчивость и прогрессирование старения.

Несмотря на частое клиническое использование клинических оценок хрупкости, многие доклинические проекты по старению не включают хрупкость как фактор интереса, возможно, из-за препятствий при внедрении инструмента оценки хрупкости. Этот индекс хрупкости не требует специального оборудования или стрессового тестирования для мышей. Она настраиваема, позволяя исследователям адаптировать оценки под конкретные аспекты слабости, соответствующие их исследовательской специализации.

Мы надеемся, что представление возможности упрощения и внедрения индекса хрупкости побудит других использовать хрупкость как фактор интереса, что сделает проекты более актуальными для клинической основы. Для начала разделите оценку на открытое поле, ручное осмотр и взвешивание. Для осмотра на открытом поле перенесите интересующую мышь в открытую среду.

Проверьте физические характеристики, включая алопецию, потерю окраски, дерматит, плохое состояние шерсти, кифоз, закокаляние хвоста, нарушения походки, тремор и ненормальное дыхание. Для ручного осмотра аккуратно погладите мышь. Обследуйте на алопецию, потерю окраски шерсти, дерматит, опухоли, раздутие живота, катаракту, выделения глаз, пролапс прямой кишки, пролапс влагалища или пениса и плохое состояние тела.

Оценивайте вес после открытых и ручных осмотров в постоянное время суток в течение двух-четырёх часов после начала периода неактивности. Во время осмотра на открытом поле оценивайте наличие нарушений походки. Волочание конечностей, круг, шатание или широкая стойка — признаки нарушения походки.

Для дальнейшей оценки нарушений походки поместите мышь на крышку большой клетки и наклоните её. Слегка коснитесь мыши, чтобы подтолкнуть к подъёму. Далее дайте мыши адаптироваться и наблюдайте за её состоянием покоя на предмет изменений частоты дыхания и глубины.

Аккуратно поглаживайте хвост пальцем, чтобы оценить его жёсткость. Во время осмотра на открытом поле оценивайте кожные критерии, включая алопецию, потерю окраски шерсти, дерматит и плохое состояние шерсти. Алопеция часто встречается на затылке и видна при свободном движении мыши.

Кифоз лучше всего оценивается, наблюдая за искривлением позвоночника мыши во время осмотра на открытом поле, как в покое, так и в движении. Кифоз оценивается на основе степени аномальной кривизны позвоночника, видимой при движении, и сутулой позы в покое. Осмотрите вручную, сжимая мышь.

Используйте пальцы для оценки степени потери жира и мышц вокруг лобковой кости и нижней части позвоночника, которые используются для оценки оценки состояния тела. Держа мышь в руках, осматривайте глаза на наличие признаков выделений, корки или изменения цвета, а также на катаракту. Наблюдайте за грудной и брюшной областями на предмет дополнительных признаков алопеции, которые часто возникают вокруг суставов, изменения шерсти, цвета и дерматита.

Аккуратно проведите пальцем по брюшной полости, чтобы оценить наличие опухолей или раздутого живота. Аккуратно наклоните голову мыши вниз, чтобы оценить наличие прямой кишки и влагалища или пениса пролапса. Если есть подозрение на пролапс, аккуратно опустите мышь на открытое поле.

Когда хвост вернулся в отдых, аккуратно поднимите хвост, чтобы подтвердить пролапс при отсутствии напряжения, вызванного контактом. После открытых и ручных осмотров взвесьте мышь. Обнулите весы между каждым животным и запишите вес до ближайших 0,1 грамма.

При оценке каждой мыши каждому показателю хрупкости ставьте балл 0, 0,5 или 1,0. Запишите вес и вычислите среднее значение всех 16 показателей, чтобы получить итоговую оценку хрупкости. Отмечайте любые изменения в здоровье или поведении, требующие последующей проверки, а также любые аномальные поступки после обращения.

Показатели индекса хрупкости постепенно увеличивались с возрастом во всех измеренных группах в возрасте 12, 18, 24 и 30 месяцев. В 18 месяцев наиболее часто наблюдаемыми дефицитами были алопеция, кифоз и потеря окраски шерсти, особенно у самцов мышей. В 24 месяца симптомы здоровья тела и проблемы с плохой шерстью стали обычным явлением.

Лонгитюдные данные показали, что хрупкость увеличивается с возрастом у обоих полов, при этом самцы мышей имеют более высокие значения хрупкости в аналогичном возрасте. Очень мало самцов наблюдалось старше 120 недель, что указывает на снижение выживаемости у самцов. Мыши с потерей веса более 10% тела были в пожилом возрасте и имели индекс хрупкости выше 0,15.

У большинства мышей изменения индекса хрупкости минимальные — менее 0,05 за двухнедельный интервал. Более сильное увеличение хрупкости происходило чаще в более взрослом возрасте и сопровождалось заметной потерей веса. Наблюдалось четыре фенотипа изменения веса хрупкости, наиболее распространённым из которых является увеличение хрупкости без изменения веса, присутствующее у 46% гусеничных животных.

30% не проявляли изменений ни в хрупкости, ни в весе. 12% мышей показали либо увеличение хрупкости с набором веса, либо увеличение хрупкости с потерей веса.