January 9th, 2026
Этот протокол описывает создание модели постинсультной депрессии (PSD) у крыс путём сочетания окклюзии средней церебральной артерии (MCAO) с хроническим лёгким стрессом, сдержанностью поведения и изоляционным содержанием, а также оценку терапевтических эффектов назначения Йи-нао-цзе-ю (YNJYP) с помощью поведенческих тестов.
Мы разработали модель RED постинсультной депрессии и оценили, облегчает ли китайская медицина поведение, похожее на депрессию. Существующие модели недостаточно сочетали инсульт и хронический стресс. Этот протокол интегрирует закупорку артерий, длительное удержание и изоляцию для лучшего воспроизведения депрессии после инсульта.
Для начала выполните поведенческое сдерживание и изоляционный блок на седьмой день после окклюзии средней мозговой артерии, чтобы избежать фазы острого инсульта. Подготовьте индивидуальную T-образную платформу для фиксации. Убедитесь, что в зоне фиксации есть прорези для крепления головы и конечностей крысы, а также три регулируемых ремня для разных размеров крысы.
В любое случайное двухчасовое окно в день закрепляйте каждую крысу на платформе с помощью слотов и ремня. Затем отрегулируйте сжатость, чтобы избежать затруднения, не вызывая подавления дыхания. В начале действия поведенческих ограничений крыс в группах после инсульта, традиционной медицины и традиционной китайской медицины переведут крыс из группового содержания с пятью животными в клетке в индивидуальное содержание с одним животным в клетке.
Сохраняйте индивидуальное содержание до завершения поведенческого ограничения на 14-й день после окклюзии средней мозговой артерии. Для теста на потребление сахарозы случайным образом выберите шесть крыс из групп через две, четыре и восемь недель после операции по окклюзии средней церебральной артерии. Постите и лишьте крыс воды в течение 24 часов до теста на потребление сахарозы.
Убедитесь, что температура в тестовой комнате поддерживается на уровне 23 плюс-минус два градуса Цельсия, а освещение соответствует условиям помещения. Затем поставьте в каждую клетку две бутылки по 150 миллилитров: одна с водопроводной водой, другая — с раствором сахарозы 1%. Поменяйте места между двумя бутылками в середине периода питья, чтобы устранить смещение позиции.
После часа свободного употребления зафиксируйте объёмы сахарозного раствора и употребленной воды. Для расчёта предпочтения сахарозы используйте заданную формулу. Для теста на открытом поле установите чёрный квадратный ящик.
Держите тестовую комнату тихой и слабо освещенной. Поставьте каждую крысу в центр открытого поля и запустите пятиминутный таймер. Запишите горизонтальное движение крысы внутри коробки и вертикальную активность — как подъём на дыбы, когда четыре лапы оторвались от пола или лазались по стене.
По желанию, фиксируйте груминг и другие типичные поведения для дополнительного наблюдения. Для проведения теста принудительного плавания сначала наполните стеклянный цилиндр водой до уровня, чтобы крыса не могла коснуться дна лапами. Отрегулируйте температуру воды на 25 плюс-минус один градус Цельсия.
Поместите каждую крысу в цилиндр и дайте ей поплавать пять минут. Запишите общее время неподвижности за эти пять минут. Определите неподвижность как пассивное плавание с минимальными движениями, чтобы удерживать нос над водой, и активность вроде гребли конечностями или царапания стены.
После завершения теста достаньте крысу из цилиндра, вытрите её полотенцем и поместите под нагревательную лампу с температурой 30 плюс-минус два градуса Цельсия на 30 минут, чтобы избежать переохлаждения. Через четыре недели время неподвижности у крыс с депрессией после инсульта в тесте принудительного плавания было значительно выше, чем у крыс группы инсульта. Через четыре и восемь недель предпочтение сахарозы у крыс с PSD в тесте на сахарозу было значительно ниже, чем у крыс группы инсульта.
Лечение YNJYP значительно сократило время неподвижности крыс с ПСД как на четырёх, так и на восьмой неделе. Лечение YNJYP также значительно увеличило их предпочтение сахарозы в обоих временных точках. Через восемь недель частота выращивания крыс с PSD была значительно ниже, чем у группы, управляемой имитацией в тесте на открытом поле.
Через две недели локомоторная активность крыс с PSD была значительно ниже, чем у группы инсульта в тесте на открытом поле. На восьмой неделе частота выращивания как в группах традиционной китайской, так и в традиционной медицине была значительно выше, чем в группе с PSD. Кроме того, локомоторная активность обеих групп лечения была значительно выше, чем у группы с ПСД на двух- и восьмой неделе.
Этот протокол позволяет измерять поведение, связанное с депрессией. Мы фиксируем время, проведённое в плавании, потребление сахарной воды и активность на открытом поле. Ключевая задача — обеспечить точное и гуманное выполнение, требующее точного размещения швов и надёжного удержания без ущерба дыханию или благополучию животных.
Будущее может изучать, как это китайское лекарство действует в мозге. Мы также можем проверить, эффективнее ли сочетание вспомогательных средств с другими методами, такими как реабилитация или западные методы.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
This study presents a refined rat model of post-stroke depression (PSD) by combining middle cerebral artery occlusion (MCAO) with behavioral restraint and isolation housing. The protocol enables the evaluation of depressive-like behaviors and tests the therapeutic effect of Yi-nao-jie-yu Prescription (YNJYP), a traditional Chinese medicine, compared to fluoxetine. Behavioral assessments confirm the model's validity and demonstrate YNJYP's efficacy in alleviating PSD symptoms.