5 мая 2026 г.
В этой рукописи описывается структурированный режим упражнений, разработанный для изучения влияния упражнений на патофизиологию легочной гипертензии — сердечной недостаточности правого желудочка в модели овец.
Мы изучаем влияние упражнений на патофизиологию легочной гипертензии — правой желудочковай недостаточности в модели овец. Влияние упражнений при легочной гипертензии при правой желудочковой недостаточности плохо характеризуется из-за ограниченной толерантности и риска сердечно-легочной декомпенсации. Однако этот протокол позволяет проводить контролируемую оценку.
Для начала соберите необходимые реагенты и подготовьте рабочее пространство для эксперимента. Прими три обычных промывки физиологического раствора. Удалите по миллилитру из каждого.
И добавьте по миллилитру раствора гепарина с 1000 единицами в каждый шприц. Подготовьте два шприца по 10 миллилитров: один для отходов, другой для сбора крови, и пять шприцев по 1 миллилитру для сбора газов крови. Используя пятимиллилитровый шприц, заберите пять миллилитров раствора гепарина с 5 000 единицами гепарина для блокировки правой желудочковой или RV линии.
Восстанавливайте два миллиграмма альтеплазы с 2,2 миллилитрами стерильной воды для использования при необходимости. Возьмите один миллилитровый шприц и пятимиллилитровый шприц и заполните их гипертоническим физиологическим раствором с помощью иглы калибра 20–22. Получите датчик давления и соедините женский конец трубки с мужским приманочным концом преобразователя.
Убедитесь, что нижний конец приманки трансдьюсера закрыт. Подключите трубку к трёхполосному стопорному крану и прикрепите стрелку Хубера 22 калибра. Промывайте катетер гипертоническим физиологическим раствором, пока жидкость не выйдет из иглой.
Затем отрегулируйте запорный кран, чтобы он зафиксировался в сторону иглы и отвлекался от синей крышки, чтобы закрыть доступ к манжете. Удалите два миллилитра обычного физиологического раствора из однолитрового пакета и замените его двумя миллилитрами раствора гепарина с 2000 единицами гепарина. Поместите солевый мешок внутрь давления, затем введите его в доступный мешок с помощью внутривенного спайка.
Подвесьте мешок давления примерно на два метра над землёй. И повернуть трёхпозиционный запорный кран на мешке давления так, чтобы ручка была перпендикулярна трубке. Надувайте мешок ручным насосом, пока индикатор давления не станет зелёным при примерно 250 миллиметрах ртути.
Поверните трёхпозиционный стоп-кран в сторону мешка, чтобы поддерживать давление. Соедините мужской конец внутривенной линии с женским концом трансдюсера. Далее соедините женский конец приманки давления с мужским концом преобразователя.
Затем прикрепить мужской конец трубки к женскому концу крана. После прикрепления иголки Хубера 22 калибра к мужскому концу трёхпозиционного запорного крана откройте гепариновый мешок и промывайте внутривенную трубку, пока гепаринизированный физиологический раствор не выйдет из иглы хупера. Поверните трёхпозиционный стоп-кран к стрелке Хубера, чтобы зафиксировать его.
Используйте модель с овцами неудачи лёгочной гипертензии RV, с инструментами с манжетой PA и портом давления RV. После недели послеоперационного восстановления перевезите акклиматизированных овец на беговой дорожке в зал для тестирования. Наденьте на овцу недоуздок и используйте его, чтобы вести животное на беговую дорожку, расположив его ближе к передней части с четырьмя ногами на маленькой клетке.
Прощупайте порты и почистите кожу спиртовыми салфетками. Используйте иглу Хубера, чтобы получить доступ к порту громкоговорителя. После открытия главной страницы лабораторной карты выберите «Новое», нажмите «Настройка», выберите устройства и каналы.
Установите количество каналов на четыре и переименуйте канал с первого на четыре в давление манжеты PA, давление RV, систолическое давление RV и частоту сердечных сокращений. Выберите циклические измерения. Перейдите к источнику и выберите давление в RV второго канала, измерение на максимум и нажмите OK. Повторите процесс для частоты пульса в четвёртом канале, но измените измерение на частоту.
Для каналов один и два убедитесь, что вычисление не выбрано. Убедитесь, что правильная ориентация доступа — порт PA расположен ближе к головке, а RV — ближе к хвосту. Расположите преобразователи между овцой и компьютером на уровне сердца и подключите оба датчика давления к интерфейсному кабелю.
После нуля и калибровки преобразователей нажмите «Старт», чтобы начать запись волн давления RV и PA cuff на 400 герц. Поверните запорный кран вверх, чтобы трансдуцировать форму давления манжеты PA. Затем выключите запорный клапан в сторону овцы, чтобы закрыть форму волны.
Поставьте один гепариновый шланг на трёхпозиционный запорный кран для линии для автодомов и промите всю линию в порт для автодомов. Аккуратно оттяните шприц, пока не вернётся тёмная кровь. Выключите запорный кран, направленный в сторону трансдюсера.
Сначала используйте пустой 10-миллилитровый шприц, чтобы взять 10 миллилитров крови из RV. Затем используйте шприц объемом 1 миллилитра, чтобы взять от 0,2 до 0,4 миллилитра крови из RV в качестве образца. Поверните стоп в вертикальное положение вверх.
Потяните синюю вкладку на датчике давления RV, чтобы открыть клапан, и продолжайте промывку, пока линия не освободится от крови. Начните первую скорость упражнения, установив ручку беговой дорожки на 30, что соответствует 0,46 метра в секунду, и поддерживайте 10 минут. Периодически открывайте трубку манжеты PA в течение 10-минутного интервала, чтобы трансдуцировать давление манжеты PA.
Ближе к концу 10-минутного интервала возьмите газ в крови, как было показано ранее. Повторяйте анализ крови, промывку и упражнения на настройках беговой дорожки 40, 50, 30 и 0. Используйте один миллилитр гипертонического физиологического раствора, чтобы надуть манжету до 150–200 миллиметров ртути.
Трансдуцируйте давление RV в течение нескольких минут после надувания, чтобы обеспечить допуск. Смешанное насыщение венозным кислородом оставалось относительно стабильным на максимальной скорости беговой дорожки с первой по восьмую неделю. Систолическое давление RV увеличилось с первой по восьмую неделю.
Расстояние, пройденное во время упражнений, увеличилось с первой по восьмую неделю, несмотря на то, что давление в манжетах PA к восьмой неделе увеличилось примерно до 777 миллиметров ртутного уровня. На выбранных скоростях беговой дорожки смешанное насыщение венозным кислородом снижалось, а систолическое давление в RV увеличивалось по мере увеличения скорости тренировки. Этот протокол позволяет измерять гемодинамические значения в реальном времени во время упражнений.
Ключевой задачей в этом протоколе является поддержание доступа к порту или физической активности. В частности, поддержание давления в манжетах PA. Один из параметров, который мы надеемся измерить более подробно в будущем, — это потребление кислорода во время упражнений и восстановления.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании изучаются физиологические адаптации к физическим нагрузкам на модели крупного животного с хронической правожелудочковой недостаточностью, вызванной легочной гипертензией (PH-RVF). С использованием модели овец исследователи внедрили структурированный режим физических упражнений для оценки влияния повышенной постнагрузки правого желудочка и возможности адаптивных ответов при прогрессировании заболевания.
Понимание адаптивных реакций на физическую нагрузку при правожелудочковой недостаточности, вызванной легочной гипертензией (PH-RVF), имеет решающее значение для трансляционной валидации мишеней и механического снижения рисков при разработке сердечно-легочных препаратов. Данная овечья модель со структурированными режимами физических упражнений позволяет количественно оценить физиологическую адаптацию в условиях прогрессирующей постнагрузки правого желудочка, что повышает прогностическую точность при выборе доклинических кандидатов. Этот подход помогает принимать решения по портфелю препаратов на ранних стадиях, проясняя значимые для заболевания компенсаторные механизмы в системе крупного животного.
Данный структурированный режим физических упражнений позволяет рассматривать модель PH-RVF на овцах как связующее звено между этапом первичных открытий и доклинической валидацией, обеспечивая возможность проверки гипотез и измерения функциональных конечных точек на всех этапах цикла исследований и разработок.