Mantenimiento e inducción de la anestesia

Lab Animal Research

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Overview

Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en

la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio (" la guía de ") señala que evaluación y la mitigación del dolor son componentes integrales de la veterinaria, cuidado de animales de laboratorio. 1 la definición de anestesia es la pérdida de sensación o sensación. Es un acontecimiento dinámico que implica cambios en la profundidad anestésica con respecto a un animal ' metabolismo de s, la estimulación quirúrgica o variaciones en el ambiente externo.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Fundamentos de la investigación de animales de laboratorio. Mantenimiento e inducción de la anestesia. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

precisa y constante monitoreo de anestesia es necesaria para mantener con seguridad la profundidad necesaria para un procedimiento. Parámetros a ser monitoreados incluyen la frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria, temperatura corporal y niveles de oxígeno de la sangre. Para ratones y ratas, ninguno de estos parámetros se controlan fácilmente debido a estos animales ' tamaños de cuerpo pequeño. Debido a la frecuencia cardíaca en roedores es tan rápida, el estetoscopio que se utiliza normalmente para la auscultación es inadecuado para captar un pulso preciso. El estetoscopio puede utilizarse para detectar la presencia o ausencia de un latido del corazón. El ritmo cardíaco normal para un ratón es 328-780 pulsaciones por minuto, mientras que la tasa regular para una rata es de 250-600 latidos por minuto. Tasas respiratorias en roedores también se elevan por encima de lo que puede contar con precisión utilizando métodos visuales o durante la auscultación. La frecuencia respiratoria normal para un ratón es 220 90 respiraciones por minuto, y para la rata este valor es 66 144 respira por minuto. Para determinar con precisión un ritmo cardíaco y ritmo respiratorio, se requiere equipo de monitoreo electrónico especializado. Los sensores son quirúrgicamente implantados en los animales, o colocado externamente e interactuar con la plataforma de monitoreo sobre el cual se coloca el animal. 3,4

la causa más común de muertes relacionadas con la anestesia en roedores es debido a la hipotermia. Roedores tienen un elevada área superficial a la relación entre la masa corporal. Además, un animal anestesiado pierde la capacidad de temblar para mantener la temperatura corporal. Así, el control de la temperatura del cuerpo y calor suplido, como un cojín de calefacción, son esenciales durante los procedimientos quirúrgicos de la supervivencia. La temperatura normal del cuerpo de un ratón es de 96,6-99,7 ° F (35.8-37,4 ° C) 5 y para una rata es 96,6-99.5 ° F (35.9-37,5 ° C). 5 más termómetros fueron diseñados los animales más grandes y modelados después de los utilizados para los seres humanos. Termómetros de mercurio se han sustituido en gran parte por versiones digitales y electrónicas. Aunque los termómetros digitales y electrónicos se han documentado tan preciso cuando se usa por vía rectal, oral y en el oído, su tamaño es inadecuado para pequeños roedores. Sondas rectales diseñado específicamente para los ratones y ratas están comercialmente disponibles, y se recomienda su uso.

niveles de oxigenación de la sangre se utilizan para evaluar la absorción adecuada de oxígeno desde los pulmones dando por resultado la concentración adecuada de oxígeno en un roedor ' sangre arterial s. Monitoreo consumo de oxígeno también indirectamente controla la respiración y la ventilación, como revela si hay inspiración adecuada de oxígeno y de la expiración de gases residuales. La frecuencia cardíaca está también implicada en la oxigenación de la sangre, como una disminución en la frecuencia cardiaca resultará en una reducción en los niveles de oxígeno, que podrían causar la perfusión inadecuada de sangre. 6

del anestesista pretende inmovilizar adecuadamente y aliviar todas las sensaciones de dolor de un animal con la dosis más baja o la concentración de anestesia. Evaluar correctamente la profundidad de la anestesia es necesaria para lograr este objetivo. Hay cuatro etapas de la anestesia y cuatro planos dentro de la etapa de anestesia quirúrgica. Durante la primera etapa, el animal se vuelve desorientado. En la segunda etapa, hay una fase excitatoria con una tasa de respiración irregular, incluyendo espasmos en algunas cepas de ratón y rata. El reflejo de adrizamiento-es la capacidad de rodar hacia atrás cuando se coloca en una posición dorsal-también se pierde.

tercera etapa es la etapa quirúrgica de la anestesia. En avión los reflejos palpebrales y deglución están ausentes. Reflejos laríngeos y córneos se pierden en el plano II. Con los planos I y II, no hay amnesia ni efectos analgésicos; así, el animal debe llegar a plano III antes del inicio de un procedimiento quirúrgico. Plano III crea parálisis de los músculos intercostales que provoca en la respiración diafragmática. Aunque inicialmente en el plano III sólo existe analgesia parcial, avanza para completar la amnesia y analgesia como el nivel de anestesia se profundiza. Es en este nivel que el animal está completamente anestesiado para un procedimiento quirúrgico. En el plano IV, el animal ha sido una sobredosis y puede rápidamente segue en etapa IV.

medida que se agrava aún más el nivel de anestesia, hay complicaciones que pueden resultar en la muerte del animal. En la etapa IV hay parálisis completa de los músculos intercostales y el diafragma, que causa severo apnea. Esto produce paro respiratorio, parálisis medular, colapso vasomotor y finalmente la muerte. Las pupilas se dilatan, mantiene fijo en dilatación, mientras que los músculos se relajan.

Procedure

la opción apropiada de anestesia para la cirugía y otros procedimientos potencialmente dolorosos debe ser determinada por un médico veterinario. Esto se basa en numerosos aspectos, incluyendo la extensión y duración del procedimiento, la especie y cepa, la edad y el estado fisiológico del animal.

anestésicos están disponibles como inhalantes o inyectables. Anestesia quirúrgica puede lograrse usando una combinación de anestésicos inyectables e inhalantes. 2

1. Inducción de la anestesia inhalantes

inhalante anestesia incluye isoflurano, sevoflurano y desflurano, isoflurano se utiliza más comúnmente. Estos anestésicos se utilizan más a menudo porque, con ellos, es más fácil controlar la profundidad de la anestesia. Inducción de la anestesia con anestésicos de inhalación puede lograrse con una campana o una cámara de inducción que se incorpora a un vaporizador de precisión.

  1. Campana
    1. equipo: una campana de cristal o tarro de desecación con una plataforma perforada de cerámica o de plástico, una bola de algodón, un líquido anestésico (isoflurano, sevoflurano o desflurano) y una campana con ventilación hacia el exterior.
    2. Preparación de
      1. Utilice la campana bajo una campana y no en el Banco, para evitar la exposición del personal a gases anestésicos.
      2. Montar la campana con la plataforma en la parte inferior, creando un espacio entre la parte inferior de la jarra y la plataforma. Esto es necesario para evitar que el animal entre en contacto con el líquido anestésico.
      3. Guantes de nitrilo de usa u otros guantes impermeables, saturar la bola de algodón con anestésico.
      4. Colocar la bola de algodón debajo de la plataforma en la campana de cristal.
      5. La tapa de la campana de cristal para evitar fuga de vapor anestésico.
    3. Inducción
      1. Coloque el animal en la campana deslizando la tapa hacia un lado.
      2. Una vez el animal está en la jarra, será necesario observar su actividad y la respiración para determinar la profundidad de la anestesia.
      3. El animal es expuesto a la anestesia, a efecto de.
      4. Una vez que el animal está completamente anestesiado, deslice la tapa hacia un lado, dejando un espacio suficiente para permitir la introducción de una mano. Sujete la cola pescuezo y cuerpo del animal anestesiado y suavemente Retire la campana de cristal.
  2. Vaporizadores de precisión
    vaporizadores de precisión pueden utilizarse con una cámara de inducción o una máscara. La máquina anestésica debe ser inspeccionada antes de cada procedimiento. La anestesia apropiada debe ser añadido si los niveles son bajos. El sistema de barrido debe controlarse para asegurar que los gases residuales se eliminan completamente. Para los sistemas de anestesia de gas residual pasivo, debe ser ponderado el cilindro barrido para determinar si es aún eficaz. Por lo general, un aumento de peso de 50 gramos sobre el peso inicial es el punto en que se gasta el cartucho.
    1. Equipos
      1. una cámara de inducción, un vaporizador de precisión, un gas inútil rebuscar unidad (ya sea pasivo o activo) y un anestésico líquido (isoflurano, sevoflurano o desflurano, según lo determinado por el tipo de vaporizador en uso).
    2. Preparación
      1. montar la cámara de inducción que la entrada es desde la torre de evaporación y la salida es el gas inútil rebuscar sistema.
    3. Inducción
      1. Coloque el animal en la cámara de inducción. Algunas cámaras tienen una tapa deslizante, y una tapa con bisagras cerrojos otros.
      2. Una vez el animal está en la cámara, se inicia el flujo de oxígeno y el vaporizador de precisión se enciende en un nivel de inducción de 3-4 para isoflurano. Niveles inferiores de anestésico entrega dará lugar a un tiempo de inducción.
      3. El animal es expuesto a la anestesia, a efecto de.
      4. Una vez que el animal está anestesiado completamente, lavar la cámara con oxígeno antes de retirar el animal para evitar la exposición personal a gases anestésicos. Si la cámara de inducción se coloca en una campana de humos, lavado con oxígeno no es necesario purgar la anestesia de la cámara antes de la inauguración.
      5. Agarre la cola pescuezo y cuerpo del animal anestesiado y suavemente Retire la cámara de.
  3. Mascarilla
    1. equipo incluye un roedor cono de nariz o mascarilla, un vaporizador de precisión, un gas inútil rebuscar unidad (ya sea pasivo o activo) y un líquido anestésico (isoflurano, sevoflurano o desflurano, según lo determinado por el tipo de de vaporizador en uso).
    2. Preparación de
      1. armar el cono de nariz o mascarilla tal que la entrada es desde la torre de evaporación, y la salida es el gas inútil sistema de barrido.
      2. Máquinas anestésicas
      3. roedor tienen a menudo un palanca para cambiar la entrega de vapor anestésico de la cámara de inducción a los roedor cono de nariz o mascarilla. Asegúrese de que esto es correctamente cono anestésica entrega.
    3. Inducción
      1. como los gases anestésicos tienen un olor desagradable, muchos animales se oponen a ser enmascarado para la inducción. El método preferido es utilizar el cuadro de inducción seguido de mantenimiento con el cono de nariz. Una vez el animal ' s nariz o cara esté firmemente colocada en la máscara, se inicia el flujo de oxígeno y el vaporizador de precisión se enciende en un nivel de inducción de 5 para isoflurano. Niveles inferiores de anestésico entrega tendrá como resultado un tiempo de inducción y un aumento en la lucha por los animales.
      2. Es esencial que el animal es controlado por la respiración, ya que un asimiento muy firme durante la inducción puede resultar en asfixia.
      3. Tan pronto como el animal comienza a relajarse, la nariz o la cara puede ser ajustada en el cono de nariz o mascarilla, y la entrega de anestésica se reduce a un nivel de mantenimiento de 1.5-0.5 para el isoflurano una vez que se logra una relajación completa.

2. Inducción de la anestesia con anestésicos inyectables

Anestésicos inyectables son principalmente una mezcla de ketamina y sedantes o músculo relajantes.

las combinaciones comunes son: 1) Cóctel de roedor, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml), acepromazina (10 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl); 2) ketamina/xilacina 2:1, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl); y 3) ketamina/xilacina ratón Mix, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl). cuando se utiliza ketamina/xilacina combinada, impulsando sólo debe realizarse con ketamina, no xilacina, debido a la semivida de estas drogas.

la combinación de ketamina con sedantes o relajantes musculares debe prepararse una solución stock de que se pueden establecer dosis individuales. Los agentes deben ser medidos precisamente y diluidos con solución salina estéril para asegurar que la dosis adecuadas se administran a los animales. Porque la ketamina es una sustancia controlada, la cantidad utilizada de los frascos debe ser observada en un " controlado registro de drogas, " y las mezclas deben tener individuales " sustancia controlada registros. " durante la preparación de mezclas, añadir poco a poco a la ketamina la botella, ya que tiende a hacer espuma si se inyecta con fuerza. Una botella estéril tapado 20 ml se utiliza para la mezcla. Las botellas deben ser debidamente etiquetadas con el nombre de los compuestos, la fecha de mezclado, la fecha de caducidad, el número de lote de ketamina (como es una sustancia controlada) y la dosis recomendada. La fecha de caducidad puede estar determinada por la fecha del ingrediente lo más pronto posible a punto de caducar (depende de las reglas/pautas de la instalación/Estado). Para el mantenimiento de registros exacto de la ketamina, la botella vacía y la botella llenada deben ser pesados. Entonces, los pesos deben ser registrados en la etiqueta de la mezcla y en la hoja de registro de la sustancia controlada individual que está preparada para cada botella. Guardar mezclas de ketamina en un oscuro y temperatura controlada para mantener la potencia.

  1. Preparación de roedor Cocktail
    1. equipo para la preparación de la solución anestésica incluye 3 cc jeringas, 12 cc jeringa, 22 g x 1 " agujas, 1.8 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 1.8 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 0.6 cc de acepromazina 10 mg/ml inyectable, 15,8 cc de solución salina estéril para la inyección y una etiqueta anestésica.
    2. Sorteo hasta 15,8 cc de solución salina estéril e inyecte en la botella. Utilizar la jeringa de 12 cc y una jeringa 3 de cc y eliminar las burbujas de aire para las medidas exactas.
    3. Añadir la acepromazina, la ketamina y xilacina a la botella de.
  2. Inducción de roedor Cocktail
    1. en general, Cóctel de roedor se utiliza para la anestesia de ratón. Debido a la variación en la respuesta a Cóctel de roedor en ratas adultas, mejor utilizarlo en ratas menos de 5 semanas de edad. Cóctel de roedor puede usarse junto con anestesia de inhalación, especialmente en ratas.
    2. Cóctel de roedor se da generalmente a los ratones según peso, usando el siguiente cálculo: (BW x 10) - 50 = microlitros Cóctel de roedor que se dará. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Esta solución se administra solamente por vía intraperitoneal. Si se inyecta por vía intramuscular, puede haber una reacción severa en el tejido.
  3. Preparación de ketamina/xilacina 2:1
    1. equipo para la preparación de la solución anestésica incluye jeringas de 3 cc, 22 g x 1 " agujas, 10 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 5 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 20 taponados estériles botella de ml y una etiqueta anestésica.
    2. Añadir la ketamina y xilacina a la botella de.
  4. Inducción
    1. ketamina/xilacina 2:1 se utiliza para anestesia para las ratas y puede utilizarse en combinación con anestesia inhalatoria.
    2. Ketamina/xilacina 2:1 es dada generalmente a partir de una dosis de 0.3 cc y aumentó 0.02 cc con los consiguientes actos anestésicos. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Ketamina/xilacina 2:1 sólo se administra por vía intramuscular.
  5. Preparación de ketamina/xilacina ratón Mix
    1. equipo de mezcla de ketamina/xilacina ratón requerido para la preparación de la solución anestésica incluye jeringas de 3 cc, 22 g x 1 " agujas, 3.6 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 0,4 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 16 cc de salina (0.9% NaCl), una botella estéril tapado 20 ml y una etiqueta anestésica.
    2. Añadir la ketamina y xilacina a la botella, poner una solución 9:1. ketamina xilacina.
    3. Agregar la solución salina a la botella, dando por resultado una mezcla 1:4 de ketamina/xilacina 9:1 con solución salina.
  6. Inducción de ketamina/xilacina ratón Mix
    1. mezcla de ketamina/xilacina ratón puede usarse en conjunto con anestesia inhalatoria.
    2. Mezcla de ketamina/xilacina ratón se da generalmente a los ratones según peso, usando el siguiente cálculo: (BW x 10) - 50 = microlitros ketamina/xilacina mezcla de ratón que se dará. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Mezcla de Mouse de ketamina/xilacina puede administrarse por vía intraperitoneal.

3. Evaluación de anestesia

profundidad anestésica puede evaluarse examinando la respuesta a varios estímulos. Movimiento voluntario será el resultado de los estímulos físicos del cuerpo. Vea la tabla 1 para una lista de los métodos físicos utilizados para la evaluación de la profundidad anestésica.

Reacción positiva de A
método procedimiento respuesta
dedo pizca extender la pierna y aislante entre el dedos de los pies. Esta área se pellizca firmemente usando uñas o pinzas atraumáticas. Reflejo positivo de A indica la retracción de la pierna o retirar del pie. El animal no está en un plano quirúrgico de anestesia si hay movimiento de la pierna o cuerpo, vocalización o aumento marcado en respiraciones.
Pizca de cola la punta de la cola que se pellizque con los dedos o pinzas atraumáticas. A reacción positiva se indica por contracción o movimiento de la cola. El animal no está en un plano quirúrgico de anestesia si hay movimiento de la cola, vocalización o aumento marcado en respiraciones.
Ear pinch usando los dedos o pinzas atraumáticas, pellizcar la punta de la oreja.sacude la cabeza o el movimiento de los bigotes hacia adelante. Si hay movimiento de la cabeza, bigotes, vocalización, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano quirúrgico de anestesia.
Reflejo palpebral usando una punta de los dedos, tocar el canthus medial (esquina interior) del ojo. A reflejo positivo es indicado por un parpadeo en respuesta a tocar los párpados. Si hay movimiento de los párpados, bigotes, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano quirúrgico de anestesia.
Reflejo corneal utilizando un aplicador con punta de algodón, toque suavemente la córnea (globo ocular). A respuesta positiva se indica con un parpadeo. Si hay movimiento de los párpados, bigotes, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano lo suficientemente profundo de anestesia quirúrgica.

Tabla 1. Métodos de estímulos físicos para evaluar la profundidad anestésica. 2

deben utilizarse indicadores fisiológicos como frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria, presión arterial, color de mucosas y tiempo de relleno capilar. Aunque observaciones generales pueden ser útiles para detectar cambios en la tasa respiratoria de los animales, para utilizar la frecuencia cardíaca o la presión arterial para la evaluación de la profundidad, equipo especializado se requiere. Si se dispone de un electrocardiógrafo, pueden medirse la velocidad y la fuerza de los latidos del corazón. Para la medición de la presión arterial, hay una gran variedad de dispositivos que cuentan sobre la cola o incluso por todo el cuerpo. Estímulos físicos como se describe en la tabla 1 causará un aumento en los tres de estos parámetros.

el color de las membranas mucosas, ojos, oídos, boca, nariz, ano, y -en menor medida la patas y la cola se observan cambios. Las áreas deben ser color de rosa, lo que indica la adecuada respiración y función cardiaca. Cuando el animal se mueve a la anestesia de la etapa IV, dejan de las respiraciones, que resulta en cianosis-indicado por un azul o gris color a las membranas mucosas y la piel circundante.

tiempo de llenado capilar se define como la cantidad de tiempo tomada para que color volver a un lecho capilar externo después de que ha sido blanqueado mediante la aplicación de presión sobre el área. Un bastoncillo o un dedo se presiona en las encías, pabellón de la oreja o lechos ungueales de los animales anestesiados. El número de segundos que tarda la zona blanqueada volver a un color rosado no debe ser más thun 1-2 segundos. Un tiempo de recarga prolongado sugiere una reducción en la frecuencia cardíaca o la fuerza de las contracciones cardiacas, indicando que el animal puede ser también profundamente anestesiado y cerca de la muerte.

es importante utilizar varios parámetros diferentes para evaluar la profundidad anestésica. Utilizando el mismo oído para pinches repetidas o del dedo del pie se insensibilizan la zona, y la respuesta será reprimida y no dar una evaluación precisa de la profundidad anestésica. Utilizar sitios alternos para evaluaciones el sujetador de dedo del pie y oído. Profundidad anestésica debe ser reevaluada cada 10-30 minutos a lo largo de la cirugía. 2

estudios han demostrado que hay cambios cardio-respiratorio en un animal anestesiado. Mientras que los anestesiados con medicamentos inyectables, los animales experimentan una tasa respiratoria estable; sin embargo, demuestran la variabilidad en el gasto cardíaco. La respuesta a los anestésicos inyectables se ha reportado que varían mucho entre diferentes cepas, por lo tanto es difícil estandarizar la dosificación. 7 agentes inhalantes tienden a disminuir la frecuencia respiratoria, pero tienen un menor impacto sobre el sistema cardiovascular. Como la dosis de anestesia inhalante se ajusta fácilmente a lo largo de la duración del procedimiento, es a menudo el método preferido para.

anestesia inducción y mantenimiento forma parte integral de la veterinaria, cuidado de animales de laboratorio sometidos a cualquier forma de procedimiento quirúrgico. El objetivo de la anestesia es inmovilizar el animal y aliviar todas las sensaciones de dolor adecuadamente. Además de la inducción, seguimiento exacto y constante es necesaria para mantener con seguridad la profundidad anestésica adecuada durante todo el procedimiento.

En este video, primero discutiremos brevemente los niveles de anestesia de roedor y qué etapa uno debe proponerse alcanzar. A continuación, vamos a revisar los diferentes métodos de inducción y mantenimiento, varias formas para que el animal está siempre en el escenario anestésico deseado, y finalmente algunos experimentos reales que implican usan de anestésicos diferentes para diversos fines.

let ' s inicio con un análisis de los niveles. Hay cuatro etapas de la anestesia y cuatro planos dentro de la fase tres o fase quirúrgica.

Durante la primera etapa, el animal se vuelve desorientado. Fase dos se caracteriza por un ritmo respiratorio irregular y pérdida del reflejo del adrizamiento. En el plano de fase tres, la palpebral y reflejos de deglución están ausentes. Durante el avión dos, desaparecen los reflejos laríngeos y córneos. Hasta este punto, la anestesia no ha inducido amnesia o analgesia.

Es en plano tres que amnesia y analgesia progresa de parcial a completa y el animal está completamente anestesiado para un procedimiento quirúrgico. Plano tres está representado también por la parálisis de los músculos intercostales, que se traduce en la respiración diafragmática que es la respiración superficial. En plano de cuatro, el animal ha sido una sobredosis y puede proceder rápidamente en la etapa cuatro, donde hay parálisis completa de músculos intercostales y diafragma, que puede causar detención respiratoria y en última instancia conducir a la muerte.

anestésicos están disponibles como un inhalante o inyectables, y un veterinario debe decidir qué usar para el procedimiento a realizar. Esta elección se basa en numerosos aspectos como: la extensión y duración del procedimiento, la especie y cepa, la edad y el estado fisiológico del animal.

La clase de anestésicos inhalantes comúnmente utilizados incluye compuestos como el isoflurano, sevoflurano y desflurano. Estos compuestos permiten el fácil control de la profundidad de la anestesia. Hay algunas opciones en el equipo que uno puede elegir administrar anestésicos inhalantes.

Una de las opciones es una campana de cristal, que se debe utilizar bajo el capó y no en el Banco, para evitar la exposición personal a los gases anestésicos. Monten la jarra con una plataforma perforada de cerámica o plástico, creando un espacio entre la parte inferior de la jarra y la plataforma. Luego, usando guantes impermeables, saturar una bola de algodón con anestésico y colóquelo debajo de la plataforma que descansa en el fondo de la jarra. Luego fijar inmediatamente la tapa para evitar el escape del vapor anestésico. Para colocar el animal, deslice la tapa hacia un lado, introducir al animal y garantizar inmediatamente. A continuación, observar la actividad y respiración para determinar la profundidad de la anestesia y exponer al animal a inhalantes a efecto. Tenga en cuenta que la plataforma sirve como barrera y evita que el animal entre en contacto directo con el líquido anestésico.

Una alternativa a la campana de cristal es una cámara de inducción utilizada en combinación con una máquina de vaporizador de precisión conectada a un tanque de oxígeno. El primer paso es asegurar que el vaporizador está lleno con una cantidad adecuada del líquido anestésico. A continuación, compruebe el gas inútil sistema de barrido. Si es el sistema comúnmente utilizado pasivo, luego pesar el frasco para determinar si es aún eficaz. Generalmente un aumento de cincuenta gramos sobre el peso inicial es el punto en que se gasta el cartucho. El siguiente paso es montar la cámara de inducción. Asegurar que la entrada es desde la torre de evaporación y salida es el gas inútil rebuscar sistema.

Para empezar, coloque el animal en la cámara de inducción y la tapa. Una vez que el animal está en la cámara, primero empieza el flujo de oxígeno a razón de 1 litro por minuto y luego ajustar la precisión vaporizador a un nivel de inducción de 3-4% de isoflurano. Como campana, exponer al animal a la anestesia efecto. Una vez que el animal está completamente anestesiado, lavar la cámara con oxígeno apagando el isoflurano antes de retirar con cuidado el animal. Esto es para evitar la exposición a gases anestésicos personal.

Otro método para la inducción de la anestesia es mediante cono de nariz o mascarilla conectado con el vaporizador de precisión. Sin embargo, debido a gases anestésicos tienen un olor desagradable, los animales pueden oponerse a ser enmascarado para la inducción. Además, también hay un riesgo de provocar asfixia por agarrar demasiado firmemente. Por lo tanto, el método preferido es utilizar el cuadro de la inducción o la campana de cristal para inducir anestesia seguida de mantenimiento con el cono de nariz. Más a menudo que no, el montaje es tal que el cono y la cámara de inducción están conectados al misma vaporizador con un palanca en el medio para cambiar la entrega de vapor anestésico de la cámara de inducción en el cono de la nariz y viceversa. Después de anestesiar el animal en la cámara, asegure su cara en el cono y la palanca del interruptor en el tubo para redirigir el flujo de gas en el cono de nariz. Controlar la respiración y después de confirmar que el animal está relajado, reducir el anestésico a un nivel de mantenimiento de 0.5 - 1.5%. También, aplicar pomada oftálmica en los ojos para prevenir la resequedad corneal.

De anestésicos inyectables, una mezcla de ketamina y otros sedantes o relajantes musculares como xilacina o acepromacina. Diferentes combinaciones pueden ser preparados usando estos compuestos. Vea el texto abajo para los cocientes utilizados. Tenga en cuenta que la ketamina es una sustancia controlada y por lo tanto debe señalarse la cantidad utilizada en el registro de medicamentos controlados y las mezclas deben tener sus registros individuales de la sustancia controlada. Dependiendo de la especie, estado de salud y edad del animal, la mezcla y la dosis del anestésico son seleccionados y la solución se puede inyectar por vía intraperitoneal o intramuscular. Normalmente la inyección e inhalación de anestésicos se utilizan en combinación para lograr anestesia quirúrgica.

ahora que sabes cómo inducir EPISIA, dejó ' s aprender sobre la evaluación de la profundidad anestésica, que es importante vigilar cada 10-30 minutos para asegurarse de que el animal no es dañado durante el procedimiento. Existen varios métodos para hacerlo en roedores.

Método de uso general

es el pellizco del dedo del pie. Extender el animal ' pierna s y aislamiento entre los dedos del pie. Luego apriete firmemente la zona usando uñas o pinzas atraumáticas. Un reflejo positivo es indicado por la retracción de la pierna o retirarse de los pies. Otro método es la pizca de cola en la punta de la cola. Movimiento que crispa o cola demuestra una reacción positiva. También puede pellizcar la punta de la oreja, y si hay temblores de la cabeza o el movimiento de los bigotes hacia adelante, entonces el animal no está en el plano quirúrgico de anestesia.

Para comprobar la profundidad de la anestesia, se puede también toca el ángulo del ojo intermedio o el ángulo interno del ojo para obtener el reflejo palpebral: indicado por un parpadeo en respuesta a tocar de los párpados. Incluso si hay movimiento de los párpados, bigotes o aumento marcado en respiraciones el animal no está en el plano quirúrgico de anestesia.

Por último, uno puede chequear el reflejo corneal al tocar la córnea con un dedo enguantado o un aplicador con punta de algodón. Una respuesta positiva se indica con un parpadeo.

Es importante alternar entre sitios para evaluar la profundidad anestésica. Usando el mismo dedo o la oreja para pinches repetidas insensibilizan la zona y la respuesta será reprimida y no dar una evaluación precisa de la profundidad anestésica.

Además de estos métodos de estímulos físicos de evaluación, uno también debe supervisar los indicadores fisiológicos como la frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, presión arterial, color de mucosas y capilar del repuesio tiempo. Mientras que observaciones generales pueden ser útiles para detectar cambios en la frecuencia respiratoria utilizar la frecuencia cardíaca para la evaluación de la profundidad, equipos especializados como electrocardiógrafo puede usarse. Para la medición de la presión arterial, hay una gran variedad de dispositivos que pueden montarse sobre la cola o incluso por todo el cuerpo. El color de las membranas mucosas, ojos, oídos, boca, nariz, ano, patas y cola también puede indicar la profundidad anestésica. Estas áreas deben ser color de rosa, sugiriendo la adecuada respiración y frecuencia cardíaca.

Comprobar el capilar rellenar tiempo, pulse en el pabellón de la oreja de los animales anestesiados y contar el número de segundos que tarda la zona blanqueada volver a un color rosado. Esto no debe ser más de 1 a 2 segundos. Un tiempo de recarga prolongado sugiere una reducción en la frecuencia cardíaca o la fuerza de contracción cardiaca, indicando que el animal puede ser también profundamente anestesiado y cerca de la muerte. Después de quitar el animal de la anestesia, no deben ser devueltos a la planta de la vivienda hasta que se recuperó de la anestesia, si no son observados en el área de vivienda.

ahora que ' he aprendido los principios y procedimientos de inducción de la anestesia de roedores y el mantenimiento, Veamos algunas de las aplicaciones frecuentes de anestésicos en la investigación biomédica hoy.

Probablemente el uso más común de anestesia de roedor es antes y durante la cirugía. Por ejemplo, aquí los investigadores querían desarrollar un modelo de movimiento causado por la formación de coágulos en el cerebro. Para ello, se indujo anestesia en ratones y luego perforar el cráneo para crear una ventana delgada. Y mientras que el animal fue sedado todavía, estos científicos inyectan un tinte fotosensible en la circulación. A continuación, inducido por fotoactivación con la ayuda de un láser a través del cráneo perforado para causar la formación de un coágulo en la vasculatura craneal.

Otro ejemplo en que anestesia de roedor se requiere es para la realización de análisis fisiológico. Por ejemplo, los científicos suelen utilizan electrodos de electrocardiograma en animales anestesiados para supervisar la actividad del corazón. O utilizar sondas de ultrasonido para determinar la tasa de movimiento del diafragma para cuantificar con mayor precisión la frecuencia respiratoria.

Por último, uso de la anestesia es obligatoria preformado experimentos de supervivencia en el útero. Por ejemplo, en el útero electroporación--un método en el que una mujer embarazada está anestesiada, se hace una incisión para exponer los embriones en desarrollo, y los electrodos se utilizan para inducir la absorción celular embrionaria del material genético inyectado.

acabo de ver JoVE ' s video en mantenimiento y administración de la anestesia. Anestesia de roedor facilita la ejecución de una amplia gama de experimentos biológicos, es imperativo que todo científico posee la habilidad de inducir y mantener la correcta profundidad anestésica durante un experimento. Como siempre, gracias por ver!

Summary

el uso apropiado de anestésicos para cirugía y otros procedimientos potencialmente dolorosos, es crucial no sólo para el animal ' bienestar de s, sino también por la integridad de los datos científicos recogidos durante el procedimiento. Hay muchas variables que el factor en elegir el regimiento anestésico apropiado. La profundidad de la anestesia debe ser estrechamente vigilada, como cada animal individual puede responder diferentemente a la droga. Con el uso de la anestesia y cuidado de seguimiento adecuado, procedimientos dolorosos se pueden lograr sin dolor y mínimos cambios fisiológicos en el animal.

References

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la opción apropiada de anestesia para la cirugía y otros procedimientos potencialmente dolorosos debe ser determinada por un médico veterinario. Esto se basa en numerosos aspectos, incluyendo la extensión y duración del procedimiento, la especie y cepa, la edad y el estado fisiológico del animal.

anestésicos están disponibles como inhalantes o inyectables. Anestesia quirúrgica puede lograrse usando una combinación de anestésicos inyectables e inhalantes. 2

1. Inducción de la anestesia inhalantes

inhalante anestesia incluye isoflurano, sevoflurano y desflurano, isoflurano se utiliza más comúnmente. Estos anestésicos se utilizan más a menudo porque, con ellos, es más fácil controlar la profundidad de la anestesia. Inducción de la anestesia con anestésicos de inhalación puede lograrse con una campana o una cámara de inducción que se incorpora a un vaporizador de precisión.

  1. Campana
    1. equipo: una campana de cristal o tarro de desecación con una plataforma perforada de cerámica o de plástico, una bola de algodón, un líquido anestésico (isoflurano, sevoflurano o desflurano) y una campana con ventilación hacia el exterior.
    2. Preparación de
      1. Utilice la campana bajo una campana y no en el Banco, para evitar la exposición del personal a gases anestésicos.
      2. Montar la campana con la plataforma en la parte inferior, creando un espacio entre la parte inferior de la jarra y la plataforma. Esto es necesario para evitar que el animal entre en contacto con el líquido anestésico.
      3. Guantes de nitrilo de usa u otros guantes impermeables, saturar la bola de algodón con anestésico.
      4. Colocar la bola de algodón debajo de la plataforma en la campana de cristal.
      5. La tapa de la campana de cristal para evitar fuga de vapor anestésico.
    3. Inducción
      1. Coloque el animal en la campana deslizando la tapa hacia un lado.
      2. Una vez el animal está en la jarra, será necesario observar su actividad y la respiración para determinar la profundidad de la anestesia.
      3. El animal es expuesto a la anestesia, a efecto de.
      4. Una vez que el animal está completamente anestesiado, deslice la tapa hacia un lado, dejando un espacio suficiente para permitir la introducción de una mano. Sujete la cola pescuezo y cuerpo del animal anestesiado y suavemente Retire la campana de cristal.
  2. Vaporizadores de precisión
    vaporizadores de precisión pueden utilizarse con una cámara de inducción o una máscara. La máquina anestésica debe ser inspeccionada antes de cada procedimiento. La anestesia apropiada debe ser añadido si los niveles son bajos. El sistema de barrido debe controlarse para asegurar que los gases residuales se eliminan completamente. Para los sistemas de anestesia de gas residual pasivo, debe ser ponderado el cilindro barrido para determinar si es aún eficaz. Por lo general, un aumento de peso de 50 gramos sobre el peso inicial es el punto en que se gasta el cartucho.
    1. Equipos
      1. una cámara de inducción, un vaporizador de precisión, un gas inútil rebuscar unidad (ya sea pasivo o activo) y un anestésico líquido (isoflurano, sevoflurano o desflurano, según lo determinado por el tipo de vaporizador en uso).
    2. Preparación
      1. montar la cámara de inducción que la entrada es desde la torre de evaporación y la salida es el gas inútil rebuscar sistema.
    3. Inducción
      1. Coloque el animal en la cámara de inducción. Algunas cámaras tienen una tapa deslizante, y una tapa con bisagras cerrojos otros.
      2. Una vez el animal está en la cámara, se inicia el flujo de oxígeno y el vaporizador de precisión se enciende en un nivel de inducción de 3-4 para isoflurano. Niveles inferiores de anestésico entrega dará lugar a un tiempo de inducción.
      3. El animal es expuesto a la anestesia, a efecto de.
      4. Una vez que el animal está anestesiado completamente, lavar la cámara con oxígeno antes de retirar el animal para evitar la exposición personal a gases anestésicos. Si la cámara de inducción se coloca en una campana de humos, lavado con oxígeno no es necesario purgar la anestesia de la cámara antes de la inauguración.
      5. Agarre la cola pescuezo y cuerpo del animal anestesiado y suavemente Retire la cámara de.
  3. Mascarilla
    1. equipo incluye un roedor cono de nariz o mascarilla, un vaporizador de precisión, un gas inútil rebuscar unidad (ya sea pasivo o activo) y un líquido anestésico (isoflurano, sevoflurano o desflurano, según lo determinado por el tipo de de vaporizador en uso).
    2. Preparación de
      1. armar el cono de nariz o mascarilla tal que la entrada es desde la torre de evaporación, y la salida es el gas inútil sistema de barrido.
      2. Máquinas anestésicas
      3. roedor tienen a menudo un palanca para cambiar la entrega de vapor anestésico de la cámara de inducción a los roedor cono de nariz o mascarilla. Asegúrese de que esto es correctamente cono anestésica entrega.
    3. Inducción
      1. como los gases anestésicos tienen un olor desagradable, muchos animales se oponen a ser enmascarado para la inducción. El método preferido es utilizar el cuadro de inducción seguido de mantenimiento con el cono de nariz. Una vez el animal ' s nariz o cara esté firmemente colocada en la máscara, se inicia el flujo de oxígeno y el vaporizador de precisión se enciende en un nivel de inducción de 5 para isoflurano. Niveles inferiores de anestésico entrega tendrá como resultado un tiempo de inducción y un aumento en la lucha por los animales.
      2. Es esencial que el animal es controlado por la respiración, ya que un asimiento muy firme durante la inducción puede resultar en asfixia.
      3. Tan pronto como el animal comienza a relajarse, la nariz o la cara puede ser ajustada en el cono de nariz o mascarilla, y la entrega de anestésica se reduce a un nivel de mantenimiento de 1.5-0.5 para el isoflurano una vez que se logra una relajación completa.

2. Inducción de la anestesia con anestésicos inyectables

Anestésicos inyectables son principalmente una mezcla de ketamina y sedantes o músculo relajantes.

las combinaciones comunes son: 1) Cóctel de roedor, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml), acepromazina (10 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl); 2) ketamina/xilacina 2:1, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl); y 3) ketamina/xilacina ratón Mix, que consta de ketamina (100 mg/ml), xilacina (20 mg/ml) y solución salina estéril (0.9% NaCl). cuando se utiliza ketamina/xilacina combinada, impulsando sólo debe realizarse con ketamina, no xilacina, debido a la semivida de estas drogas.

la combinación de ketamina con sedantes o relajantes musculares debe prepararse una solución stock de que se pueden establecer dosis individuales. Los agentes deben ser medidos precisamente y diluidos con solución salina estéril para asegurar que la dosis adecuadas se administran a los animales. Porque la ketamina es una sustancia controlada, la cantidad utilizada de los frascos debe ser observada en un " controlado registro de drogas, " y las mezclas deben tener individuales " sustancia controlada registros. " durante la preparación de mezclas, añadir poco a poco a la ketamina la botella, ya que tiende a hacer espuma si se inyecta con fuerza. Una botella estéril tapado 20 ml se utiliza para la mezcla. Las botellas deben ser debidamente etiquetadas con el nombre de los compuestos, la fecha de mezclado, la fecha de caducidad, el número de lote de ketamina (como es una sustancia controlada) y la dosis recomendada. La fecha de caducidad puede estar determinada por la fecha del ingrediente lo más pronto posible a punto de caducar (depende de las reglas/pautas de la instalación/Estado). Para el mantenimiento de registros exacto de la ketamina, la botella vacía y la botella llenada deben ser pesados. Entonces, los pesos deben ser registrados en la etiqueta de la mezcla y en la hoja de registro de la sustancia controlada individual que está preparada para cada botella. Guardar mezclas de ketamina en un oscuro y temperatura controlada para mantener la potencia.

  1. Preparación de roedor Cocktail
    1. equipo para la preparación de la solución anestésica incluye 3 cc jeringas, 12 cc jeringa, 22 g x 1 " agujas, 1.8 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 1.8 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 0.6 cc de acepromazina 10 mg/ml inyectable, 15,8 cc de solución salina estéril para la inyección y una etiqueta anestésica.
    2. Sorteo hasta 15,8 cc de solución salina estéril e inyecte en la botella. Utilizar la jeringa de 12 cc y una jeringa 3 de cc y eliminar las burbujas de aire para las medidas exactas.
    3. Añadir la acepromazina, la ketamina y xilacina a la botella de.
  2. Inducción de roedor Cocktail
    1. en general, Cóctel de roedor se utiliza para la anestesia de ratón. Debido a la variación en la respuesta a Cóctel de roedor en ratas adultas, mejor utilizarlo en ratas menos de 5 semanas de edad. Cóctel de roedor puede usarse junto con anestesia de inhalación, especialmente en ratas.
    2. Cóctel de roedor se da generalmente a los ratones según peso, usando el siguiente cálculo: (BW x 10) - 50 = microlitros Cóctel de roedor que se dará. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Esta solución se administra solamente por vía intraperitoneal. Si se inyecta por vía intramuscular, puede haber una reacción severa en el tejido.
  3. Preparación de ketamina/xilacina 2:1
    1. equipo para la preparación de la solución anestésica incluye jeringas de 3 cc, 22 g x 1 " agujas, 10 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 5 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 20 taponados estériles botella de ml y una etiqueta anestésica.
    2. Añadir la ketamina y xilacina a la botella de.
  4. Inducción
    1. ketamina/xilacina 2:1 se utiliza para anestesia para las ratas y puede utilizarse en combinación con anestesia inhalatoria.
    2. Ketamina/xilacina 2:1 es dada generalmente a partir de una dosis de 0.3 cc y aumentó 0.02 cc con los consiguientes actos anestésicos. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Ketamina/xilacina 2:1 sólo se administra por vía intramuscular.
  5. Preparación de ketamina/xilacina ratón Mix
    1. equipo de mezcla de ketamina/xilacina ratón requerido para la preparación de la solución anestésica incluye jeringas de 3 cc, 22 g x 1 " agujas, 3.6 cc de ketamina inyectable 100 mg/ml, 0,4 cc de xilacina inyectable 20 mg/ml, 16 cc de salina (0.9% NaCl), una botella estéril tapado 20 ml y una etiqueta anestésica.
    2. Añadir la ketamina y xilacina a la botella, poner una solución 9:1. ketamina xilacina.
    3. Agregar la solución salina a la botella, dando por resultado una mezcla 1:4 de ketamina/xilacina 9:1 con solución salina.
  6. Inducción de ketamina/xilacina ratón Mix
    1. mezcla de ketamina/xilacina ratón puede usarse en conjunto con anestesia inhalatoria.
    2. Mezcla de ketamina/xilacina ratón se da generalmente a los ratones según peso, usando el siguiente cálculo: (BW x 10) - 50 = microlitros ketamina/xilacina mezcla de ratón que se dará. Esto variará según la cepa, edad y salud del estado.
    3. Mezcla de Mouse de ketamina/xilacina puede administrarse por vía intraperitoneal.

3. Evaluación de anestesia

profundidad anestésica puede evaluarse examinando la respuesta a varios estímulos. Movimiento voluntario será el resultado de los estímulos físicos del cuerpo. Vea la tabla 1 para una lista de los métodos físicos utilizados para la evaluación de la profundidad anestésica.

Reacción positiva de A
método procedimiento respuesta
dedo pizca extender la pierna y aislante entre el dedos de los pies. Esta área se pellizca firmemente usando uñas o pinzas atraumáticas. Reflejo positivo de A indica la retracción de la pierna o retirar del pie. El animal no está en un plano quirúrgico de anestesia si hay movimiento de la pierna o cuerpo, vocalización o aumento marcado en respiraciones.
Pizca de cola la punta de la cola que se pellizque con los dedos o pinzas atraumáticas. A reacción positiva se indica por contracción o movimiento de la cola. El animal no está en un plano quirúrgico de anestesia si hay movimiento de la cola, vocalización o aumento marcado en respiraciones.
Ear pinch usando los dedos o pinzas atraumáticas, pellizcar la punta de la oreja.sacude la cabeza o el movimiento de los bigotes hacia adelante. Si hay movimiento de la cabeza, bigotes, vocalización, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano quirúrgico de anestesia.
Reflejo palpebral usando una punta de los dedos, tocar el canthus medial (esquina interior) del ojo. A reflejo positivo es indicado por un parpadeo en respuesta a tocar los párpados. Si hay movimiento de los párpados, bigotes, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano quirúrgico de anestesia.
Reflejo corneal utilizando un aplicador con punta de algodón, toque suavemente la córnea (globo ocular). A respuesta positiva se indica con un parpadeo. Si hay movimiento de los párpados, bigotes, o marcado aumento de la respiración, el animal no está en un plano lo suficientemente profundo de anestesia quirúrgica.

Tabla 1. Métodos de estímulos físicos para evaluar la profundidad anestésica. 2

deben utilizarse indicadores fisiológicos como frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria, presión arterial, color de mucosas y tiempo de relleno capilar. Aunque observaciones generales pueden ser útiles para detectar cambios en la tasa respiratoria de los animales, para utilizar la frecuencia cardíaca o la presión arterial para la evaluación de la profundidad, equipo especializado se requiere. Si se dispone de un electrocardiógrafo, pueden medirse la velocidad y la fuerza de los latidos del corazón. Para la medición de la presión arterial, hay una gran variedad de dispositivos que cuentan sobre la cola o incluso por todo el cuerpo. Estímulos físicos como se describe en la tabla 1 causará un aumento en los tres de estos parámetros.

el color de las membranas mucosas, ojos, oídos, boca, nariz, ano, y -en menor medida la patas y la cola se observan cambios. Las áreas deben ser color de rosa, lo que indica la adecuada respiración y función cardiaca. Cuando el animal se mueve a la anestesia de la etapa IV, dejan de las respiraciones, que resulta en cianosis-indicado por un azul o gris color a las membranas mucosas y la piel circundante.

tiempo de llenado capilar se define como la cantidad de tiempo tomada para que color volver a un lecho capilar externo después de que ha sido blanqueado mediante la aplicación de presión sobre el área. Un bastoncillo o un dedo se presiona en las encías, pabellón de la oreja o lechos ungueales de los animales anestesiados. El número de segundos que tarda la zona blanqueada volver a un color rosado no debe ser más thun 1-2 segundos. Un tiempo de recarga prolongado sugiere una reducción en la frecuencia cardíaca o la fuerza de las contracciones cardiacas, indicando que el animal puede ser también profundamente anestesiado y cerca de la muerte.

es importante utilizar varios parámetros diferentes para evaluar la profundidad anestésica. Utilizando el mismo oído para pinches repetidas o del dedo del pie se insensibilizan la zona, y la respuesta será reprimida y no dar una evaluación precisa de la profundidad anestésica. Utilizar sitios alternos para evaluaciones el sujetador de dedo del pie y oído. Profundidad anestésica debe ser reevaluada cada 10-30 minutos a lo largo de la cirugía. 2

estudios han demostrado que hay cambios cardio-respiratorio en un animal anestesiado. Mientras que los anestesiados con medicamentos inyectables, los animales experimentan una tasa respiratoria estable; sin embargo, demuestran la variabilidad en el gasto cardíaco. La respuesta a los anestésicos inyectables se ha reportado que varían mucho entre diferentes cepas, por lo tanto es difícil estandarizar la dosificación. 7 agentes inhalantes tienden a disminuir la frecuencia respiratoria, pero tienen un menor impacto sobre el sistema cardiovascular. Como la dosis de anestesia inhalante se ajusta fácilmente a lo largo de la duración del procedimiento, es a menudo el método preferido para.

anestesia inducción y mantenimiento forma parte integral de la veterinaria, cuidado de animales de laboratorio sometidos a cualquier forma de procedimiento quirúrgico. El objetivo de la anestesia es inmovilizar el animal y aliviar todas las sensaciones de dolor adecuadamente. Además de la inducción, seguimiento exacto y constante es necesaria para mantener con seguridad la profundidad anestésica adecuada durante todo el procedimiento.

En este video, primero discutiremos brevemente los niveles de anestesia de roedor y qué etapa uno debe proponerse alcanzar. A continuación, vamos a revisar los diferentes métodos de inducción y mantenimiento, varias formas para que el animal está siempre en el escenario anestésico deseado, y finalmente algunos experimentos reales que implican usan de anestésicos diferentes para diversos fines.

let ' s inicio con un análisis de los niveles. Hay cuatro etapas de la anestesia y cuatro planos dentro de la fase tres o fase quirúrgica.

Durante la primera etapa, el animal se vuelve desorientado. Fase dos se caracteriza por un ritmo respiratorio irregular y pérdida del reflejo del adrizamiento. En el plano de fase tres, la palpebral y reflejos de deglución están ausentes. Durante el avión dos, desaparecen los reflejos laríngeos y córneos. Hasta este punto, la anestesia no ha inducido amnesia o analgesia.

Es en plano tres que amnesia y analgesia progresa de parcial a completa y el animal está completamente anestesiado para un procedimiento quirúrgico. Plano tres está representado también por la parálisis de los músculos intercostales, que se traduce en la respiración diafragmática que es la respiración superficial. En plano de cuatro, el animal ha sido una sobredosis y puede proceder rápidamente en la etapa cuatro, donde hay parálisis completa de músculos intercostales y diafragma, que puede causar detención respiratoria y en última instancia conducir a la muerte.

anestésicos están disponibles como un inhalante o inyectables, y un veterinario debe decidir qué usar para el procedimiento a realizar. Esta elección se basa en numerosos aspectos como: la extensión y duración del procedimiento, la especie y cepa, la edad y el estado fisiológico del animal.

La clase de anestésicos inhalantes comúnmente utilizados incluye compuestos como el isoflurano, sevoflurano y desflurano. Estos compuestos permiten el fácil control de la profundidad de la anestesia. Hay algunas opciones en el equipo que uno puede elegir administrar anestésicos inhalantes.

Una de las opciones es una campana de cristal, que se debe utilizar bajo el capó y no en el Banco, para evitar la exposición personal a los gases anestésicos. Monten la jarra con una plataforma perforada de cerámica o plástico, creando un espacio entre la parte inferior de la jarra y la plataforma. Luego, usando guantes impermeables, saturar una bola de algodón con anestésico y colóquelo debajo de la plataforma que descansa en el fondo de la jarra. Luego fijar inmediatamente la tapa para evitar el escape del vapor anestésico. Para colocar el animal, deslice la tapa hacia un lado, introducir al animal y garantizar inmediatamente. A continuación, observar la actividad y respiración para determinar la profundidad de la anestesia y exponer al animal a inhalantes a efecto. Tenga en cuenta que la plataforma sirve como barrera y evita que el animal entre en contacto directo con el líquido anestésico.

Una alternativa a la campana de cristal es una cámara de inducción utilizada en combinación con una máquina de vaporizador de precisión conectada a un tanque de oxígeno. El primer paso es asegurar que el vaporizador está lleno con una cantidad adecuada del líquido anestésico. A continuación, compruebe el gas inútil sistema de barrido. Si es el sistema comúnmente utilizado pasivo, luego pesar el frasco para determinar si es aún eficaz. Generalmente un aumento de cincuenta gramos sobre el peso inicial es el punto en que se gasta el cartucho. El siguiente paso es montar la cámara de inducción. Asegurar que la entrada es desde la torre de evaporación y salida es el gas inútil rebuscar sistema.

Para empezar, coloque el animal en la cámara de inducción y la tapa. Una vez que el animal está en la cámara, primero empieza el flujo de oxígeno a razón de 1 litro por minuto y luego ajustar la precisión vaporizador a un nivel de inducción de 3-4% de isoflurano. Como campana, exponer al animal a la anestesia efecto. Una vez que el animal está completamente anestesiado, lavar la cámara con oxígeno apagando el isoflurano antes de retirar con cuidado el animal. Esto es para evitar la exposición a gases anestésicos personal.

Otro método para la inducción de la anestesia es mediante cono de nariz o mascarilla conectado con el vaporizador de precisión. Sin embargo, debido a gases anestésicos tienen un olor desagradable, los animales pueden oponerse a ser enmascarado para la inducción. Además, también hay un riesgo de provocar asfixia por agarrar demasiado firmemente. Por lo tanto, el método preferido es utilizar el cuadro de la inducción o la campana de cristal para inducir anestesia seguida de mantenimiento con el cono de nariz. Más a menudo que no, el montaje es tal que el cono y la cámara de inducción están conectados al misma vaporizador con un palanca en el medio para cambiar la entrega de vapor anestésico de la cámara de inducción en el cono de la nariz y viceversa. Después de anestesiar el animal en la cámara, asegure su cara en el cono y la palanca del interruptor en el tubo para redirigir el flujo de gas en el cono de nariz. Controlar la respiración y después de confirmar que el animal está relajado, reducir el anestésico a un nivel de mantenimiento de 0.5 - 1.5%. También, aplicar pomada oftálmica en los ojos para prevenir la resequedad corneal.

De anestésicos inyectables, una mezcla de ketamina y otros sedantes o relajantes musculares como xilacina o acepromacina. Diferentes combinaciones pueden ser preparados usando estos compuestos. Vea el texto abajo para los cocientes utilizados. Tenga en cuenta que la ketamina es una sustancia controlada y por lo tanto debe señalarse la cantidad utilizada en el registro de medicamentos controlados y las mezclas deben tener sus registros individuales de la sustancia controlada. Dependiendo de la especie, estado de salud y edad del animal, la mezcla y la dosis del anestésico son seleccionados y la solución se puede inyectar por vía intraperitoneal o intramuscular. Normalmente la inyección e inhalación de anestésicos se utilizan en combinación para lograr anestesia quirúrgica.

ahora que sabes cómo inducir EPISIA, dejó ' s aprender sobre la evaluación de la profundidad anestésica, que es importante vigilar cada 10-30 minutos para asegurarse de que el animal no es dañado durante el procedimiento. Existen varios métodos para hacerlo en roedores.

Método de uso general

es el pellizco del dedo del pie. Extender el animal ' pierna s y aislamiento entre los dedos del pie. Luego apriete firmemente la zona usando uñas o pinzas atraumáticas. Un reflejo positivo es indicado por la retracción de la pierna o retirarse de los pies. Otro método es la pizca de cola en la punta de la cola. Movimiento que crispa o cola demuestra una reacción positiva. También puede pellizcar la punta de la oreja, y si hay temblores de la cabeza o el movimiento de los bigotes hacia adelante, entonces el animal no está en el plano quirúrgico de anestesia.

Para comprobar la profundidad de la anestesia, se puede también toca el ángulo del ojo intermedio o el ángulo interno del ojo para obtener el reflejo palpebral: indicado por un parpadeo en respuesta a tocar de los párpados. Incluso si hay movimiento de los párpados, bigotes o aumento marcado en respiraciones el animal no está en el plano quirúrgico de anestesia.

Por último, uno puede chequear el reflejo corneal al tocar la córnea con un dedo enguantado o un aplicador con punta de algodón. Una respuesta positiva se indica con un parpadeo.

Es importante alternar entre sitios para evaluar la profundidad anestésica. Usando el mismo dedo o la oreja para pinches repetidas insensibilizan la zona y la respuesta será reprimida y no dar una evaluación precisa de la profundidad anestésica.

Además de estos métodos de estímulos físicos de evaluación, uno también debe supervisar los indicadores fisiológicos como la frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, presión arterial, color de mucosas y capilar del repuesio tiempo. Mientras que observaciones generales pueden ser útiles para detectar cambios en la frecuencia respiratoria utilizar la frecuencia cardíaca para la evaluación de la profundidad, equipos especializados como electrocardiógrafo puede usarse. Para la medición de la presión arterial, hay una gran variedad de dispositivos que pueden montarse sobre la cola o incluso por todo el cuerpo. El color de las membranas mucosas, ojos, oídos, boca, nariz, ano, patas y cola también puede indicar la profundidad anestésica. Estas áreas deben ser color de rosa, sugiriendo la adecuada respiración y frecuencia cardíaca.

Comprobar el capilar rellenar tiempo, pulse en el pabellón de la oreja de los animales anestesiados y contar el número de segundos que tarda la zona blanqueada volver a un color rosado. Esto no debe ser más de 1 a 2 segundos. Un tiempo de recarga prolongado sugiere una reducción en la frecuencia cardíaca o la fuerza de contracción cardiaca, indicando que el animal puede ser también profundamente anestesiado y cerca de la muerte. Después de quitar el animal de la anestesia, no deben ser devueltos a la planta de la vivienda hasta que se recuperó de la anestesia, si no son observados en el área de vivienda.

ahora que ' he aprendido los principios y procedimientos de inducción de la anestesia de roedores y el mantenimiento, Veamos algunas de las aplicaciones frecuentes de anestésicos en la investigación biomédica hoy.

Probablemente el uso más común de anestesia de roedor es antes y durante la cirugía. Por ejemplo, aquí los investigadores querían desarrollar un modelo de movimiento causado por la formación de coágulos en el cerebro. Para ello, se indujo anestesia en ratones y luego perforar el cráneo para crear una ventana delgada. Y mientras que el animal fue sedado todavía, estos científicos inyectan un tinte fotosensible en la circulación. A continuación, inducido por fotoactivación con la ayuda de un láser a través del cráneo perforado para causar la formación de un coágulo en la vasculatura craneal.

Otro ejemplo en que anestesia de roedor se requiere es para la realización de análisis fisiológico. Por ejemplo, los científicos suelen utilizan electrodos de electrocardiograma en animales anestesiados para supervisar la actividad del corazón. O utilizar sondas de ultrasonido para determinar la tasa de movimiento del diafragma para cuantificar con mayor precisión la frecuencia respiratoria.

Por último, uso de la anestesia es obligatoria preformado experimentos de supervivencia en el útero. Por ejemplo, en el útero electroporación--un método en el que una mujer embarazada está anestesiada, se hace una incisión para exponer los embriones en desarrollo, y los electrodos se utilizan para inducir la absorción celular embrionaria del material genético inyectado.

acabo de ver JoVE ' s video en mantenimiento y administración de la anestesia. Anestesia de roedor facilita la ejecución de una amplia gama de experimentos biológicos, es imperativo que todo científico posee la habilidad de inducir y mantener la correcta profundidad anestésica durante un experimento. Como siempre, gracias por ver!

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