Fabricación de soluciones en laboratorio

General Laboratory Techniques

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Summary

La capacidad para realizar con éxito soluciones es una habilidad básica de laboratorio realizada en prácticamente todos los experimentos biológicos y químicos. Una solución es una mezcla homogénea de soluto disuelto en líquido a granel conocida como el disolvente. Soluciones pueden ser descritas por su concentración de solutos, una medida de cuánto soluto está presente por unidad de solución. En este video, se presenta un procedimiento paso a paso de cómo hacer una solución con base de agua o acuosa, para aplicaciones biológicas. El video explica cómo calcular y medir la cantidad de soluto necesario para un volumen dado de solución. Se muestran métodos para disolver el soluto en agua purificada y ajustar el pH de la solución. Adecuada además de la cantidad suficiente (QS) para alcanzar el volumen deseado se demostraron en relación con el menisco antes de discutir los métodos para esterilizar la solución. Aplicaciones de hacer soluciones se presentan a través de la discusión de varias soluciones biológicas comúnmente usadas, tales como fosfato tampón salino (PBS) y sus usos en la investigación biológica. Estas soluciones son buffers que imitan a pH fisiológico y la osmolaridad de los líquidos celulares.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Técnicas generales de laboratorio. Fabricación de soluciones en laboratorio. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Soluciones es un procedimiento esencial en prácticamente todos biológicos y químicos experimentos llevados a cabo en todo el mundo.

Una solución se compone de una sustancia disuelta en líquido. La sustancia disuelta se conoce como soluto y el líquido a granel como el solvente. La mezcla homogénea resultante se conoce como la solución.

Soluciones pueden ser descritas por su concentración de solutos, una medida de cuánto soluto está presente por unidad de solución.

Fabricación de soluciones puede ser una habilidad básica de laboratorio, pero mala técnica puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.

La primera consideración al hacer las soluciones es la seguridad. Es importante tomar las precauciones apropiadas, tales como usar guantes y una bata de laboratorio, dependiendo del tipo de productos químicos que está trabajando.

Hay muchas maneras diferentes de hacer lo que una solución. Este video demostrará la manera más común para hacer una solución de base de agua o acuosa.

En primer lugar determinar los moles de soluto que se necesita para lograr la concentración deseada en un volumen dado de solución. Entonces encubierto este valor a gramos utilizando el peso molecular o el número de gramos por mol, de la química.

Los productos químicos pueden ser pesados utilizando una balanza digital y un barco de pesaje.

Un cilindro graduado puede utilizarse entonces para medir un volumen de agua purificada que es aproximadamente tres cuartas partes del volumen final de solución.

Es imperativo que las soluciones acuosas estar preparados con agua purificada en lugar de agua del grifo. No hacerlo puede comprometer la calidad de la solución, no sólo el potencialmente múltiples experimentos abajo de la línea.

En este punto, el agua purificada debe ser transferido en un vaso de precipitados que contiene una barra de agitación en una placa de agitación magnética.

Los solutos medidos pueden añadirse al mezclar agua purificada. Revolviendo la mezcla, ayuda al soluto a disolver. Aplicación de calor también puede utilizarse para este propósito.

Una vez que todos los solutos se disuelve en solvente, el pH de la solución puede ajustarse mediante un medidor de pH. Para subir el pH, añadir hidróxido de sodio diluido a la agitación de la solución. Para bajar el pH, agregar ácido clorhídrico diluido. Asegúrese de añadir lentamente el ácido o la base, ya que el pH puede cambiar rápidamente.

papel pH puede utilizarse también para medir el pH de una solución, sin embargo el uso de resultados de un medidor de pH calibrado en una medición más precisa.

Luego se vierte la solución en un matraz aforado usando un embudo para que puede ser traído para arriba para su volumen final. Agregar la cantidad suficiente para alcanzar este volumen es conocido como Q.S.'ing la solución.

Asegúrese de que el menisco se alinee con la marca en el matraz aforado. En una solución acuosa, el menisco es cóncavo y debe leerse en el punto más bajo de la curva.

Al realizar la investigación biológica, específicamente aquellos que involucran las células vivas, soluciones deba ser esterilizados antes del uso. Esto puede hacerse en autoclave, que somete la solución a alta temperatura de vapor a alta presión.

Alternativamente, se puede esterilizar la solución mediante la ejecución sobre un filtro de 0,22 micras, que excluirá cualquier células bacterianas.

Ahora que tienes un conocimiento fundamental de cómo hacer soluciones, es hora de echar un vistazo a algunas soluciones utilizadas en el laboratorio y sus aplicaciones.

En la investigación biológica, numerosas soluciones están diseñadas para imitar los fluidos fisiológicos. Estas soluciones se conservan, que significa que resisten el cambio en el pH en un rango específico; generalmente, se mantiene pH alrededor de 7.4 para simular fluidos intracelulares y extracelulares.

Tamponada fosfato salino, o PBS, es un búfer utilizado en la investigación biológica que imita la osmolaridad y pH fisiológico. Osmolaridad se refiere a las total moles de soluto en una solución. Por ejemplo, una solución que contiene 1 mol de NaCl tiene 2 osmoles de soluto, ya que disocian los iones sodio y cloruro en la solución. PBS tiene concentraciones de iones que coinciden estrechamente con los de las células, lo que es una solución isotónica, lo que significa que la cantidad de soluto fuera de la célula es equivalente a lo que se encuentra dentro de la célula. PBS se compone de varias diversas sales en agua, como sales con grupos fosfato que mantienen un pH constante en el rango de 7.2 a 7.6.

Usos comunes de PBS en el laboratorio incluyen células de lavado y dilución de biomoléculas como proteínas.

Líquido cefalorraquídeo artificial o ACSF imita las concentraciones de electrolitos del líquido cerebroespinal. Esta solución debe estar recién preparada, y el pH, la osmolaridad y composición iónica deben ser supervisados cuidadosamente para que coincida con las condiciones in vivo.

ACSF se utiliza generalmente en los estudios electrofisiológicos para preparar rebanadas de cerebro y a inundar durante los experimentos. También puede servir como la solución extracelular durante la medición de patch clamp.

Solución de Ringer es una solución salina isotónica con un pH balanceado que se utiliza en la investigación biológica. Comúnmente se utiliza en experimentos in vitro con órganos y tejidos.

Sólo ha visto introducción de Zeus a hacer soluciones. En este video repasamos cómo hacer una solución de principio a fin... incluyendo cómo determinar la cantidad necesaria de soluto (A), cómo bien QS una solución (B) y los métodos de esterilización (C). También se revisaron algunas soluciones comunes, así como sus aplicaciones en la investigación biológica (D).

Gracias por ver y recuerda siempre utilizar la técnica adecuada al hacer soluciones.

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