DNA-Agarose-Gelelektrophorese

Die Agarose-Gelelektrophorese ist eine Technik, die häufig verwendet wird, um DNA-Moleküle nach ihrer Größe zu trennen.

Agarose – ein aus Rotalgen gewonnenes Polysaccharid – wird zu einem Puffer wie Tris-Acetat-EDTA (TAE) oder Tris-Borat-EDTA (FSME) hinzugefügt und durch Erhitzen gelöst.

In der Regel wird 1 Gramm Agarose in 100 Millilitern Puffer aufgelöst, um eine 1%ige Agaroselösung zu bilden, obwohl je nach Anwendung unterschiedliche Mengen an Agarose zugesetzt werden können.

Um das Gel zu färben, wird der Agaroselösung oft ein fluoreszierender Farbstoff wie Ethidiumbromid zugesetzt. Der Farbstoff interkaliert zwischen den DNA-Basen und fluoresziert unter UV-Licht.

Die Lösung kann dann in horizontale Formen gegossen werden. In den Gelguss wird ein Kamm eingeführt, um Vertiefungen zu schaffen, in die DNA-Proben geladen werden können.

Die Agaroselösung wird ungestört gelassen, um sich zu einem Gel zu verfestigen.

Das Gel besteht aus wasserstoffgebundenen Agarosemolekülen, die eine poröse Matrix bilden, durch die sich die DNA-Moleküle bewegen.

DNA-Proben werden mit einem Ladepuffer vermischt und auf das Gel geladen. Der Ladepuffer enthält Glycerin, das die Dichte der DNA-Proben erh