Électrophorèse sur gel d’agarose ADN

L’électrophorèse sur gel d’agarose est une technique couramment utilisée pour séparer les molécules d’ADN en fonction de leur taille.

L’agarose – un polysaccharide dérivé des algues rouges – est ajoutée à un tampon tel que le Tris-acétate EDTA (TAE) ou le Tris-borate EDTA (TBE) et dissoute par chauffage.

Généralement, 1 gramme d’agarose est dissous dans 100 millilitres de tampon pour former une solution d’agarose à 1 %, bien que différentes quantités d’agarose puissent être ajoutées en fonction de l’application.

Pour colorer le gel, un colorant fluorescent, tel que le bromure d’éthidium, est souvent ajouté à la solution d’agarose. Le colorant s’intercale entre les bases de l’ADN et devient fluorescent sous la lumière UV.

La solution peut ensuite être versée dans des moules horizontaux. Un peigne est inséré dans le moulage en gel pour créer des puits dans lesquels des échantillons d’ADN peuvent être chargés.

La solution d’agarose est laissée intacte pour se solidifier en un gel.

Le gel est constitué de molécules d’agarose liées à l’hydrogène formant une matrice poreuse à travers laquelle les molécules d’ADN se déplacent.

Les échantillons d’ADN sont mélangés avec un tampon de chargem