هذا البروتوكول يوضح كيفية تنفيذ المناعية على يرقة ذبابة الفاكهة تشريح.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
البروتوكول
قبل أن تبدأ
- إعداد الحلول التالية : PBT (0.1 ٪ X100 تريتون في برنامج تلفزيوني 1X) ، PBTB (0.2 ٪ في جيش صرب البوسنة PBT) ، وPBTN (خ ع 2 ٪ في PBTB).
- تشريح ذبابة الفاكهة اليرقات. يرجى الاطلاع على ذبابة الفاكهة تشريح NMJ اليرقات.
المناعية
- نقل اليرقات إلى أنبوب 1.5 مل تحتوي على PBT. غسل اليرقات مرتين لمدة 1....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
المناعية (IHC) أمر حيوي لدراسة البيولوجيا NMJ لأنه يمكن تصور من NMJ. ويتم إنجاز هذا باستخدام الأجسام المضادة التي تعترف غشاء الخلايا العصبية (على سبيل المثال ، HRP) ، وpresynapse (على سبيل المثال ، CSP ، SYT) ، و / أو postsynapse (على سبيل المثال ، DLG). ويمكن أيضا الإشارة الجزيئات والبروتينات الهيكلية ، أو البروتينات الرواية تكون المصلحة الملون. ثم ، يمكن أن تحور الجينات أو missexpressed ، ويمكن الكشف عن اضطراب IHC هيكل متشابك و / أو الإشارات العصبية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| المجهر المجسم “Stemi” 2000 | Carl Zeiss, Inc. | 495101-9804-000 | |
| مصدر الضوء KL 1500 LCD | Carl Zeiss, Inc. | 000000-1063-181 | |
| ملقط Dumont SS | Fine Science Tools | 11200-33 | |
| ملقط Dumont #5 | Fine Science Tools | 11252-20 | |
| خلاط Nutator Adams™ | BD Biosciences | 421105 | |
| سكين دقيق رقم 1 | X-Acto | 3201 | |
| شفرات رقم 16 | X-Acto | 216 | |
| كاشف ProLong Gold Antifade لمنع البهتان | Invitrogen | 36930 |
المراجع
- Jan, L. Y., Jan, Y. N. Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster. J. Physiol. 262, 189-214 (1976).
- Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on ident....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
