מדידת לחץ דם בעכברים באמצעות לחץ נפח הקלטה, שיטת זנב השרוול

Summary

ערוץ 8-CODA תפוקה גבוהה לא פולשני לחץ דם מערכת מודד את לחץ הדם עד 8 עכברים או חולדות בו זמנית. מערכת זו זנב השרוול משתמשת בלחץ נפח הקלטה (הציבורי של ורמונט) כדי למדוד את לחץ הדם על ידי קביעת נפח הדם הזנב.

Abstract

ערוץ 8-CODA תפוקה גבוהה לא פולשני לחץ דם מערכת מודד את לחץ הדם עד 8 עכברים או חולדות בו זמנית. מערכת זנב השרוול CODA משתמשת בלחץ נפח הקלטה (הציבורי של ורמונט) כדי למדוד את לחץ הדם על ידי קביעת נפח הדם הזנב. לחץ שתוכנן במיוחד ההפרש מתמר ואת אמצעי זנב השרוול חסימה נפח הדם הכולל בזנב ללא צורך לקבל את האות הדופק הפרט. תשומת לב מיוחדת הניתנת אורך השרוול חסימה על מנת להפיק הלחץ קריאה מדויקת ביותר דם. הרדיו הציבורי של ורמונט יכול בקלות לקבל קריאות על כהי עור מכרסמים, כגון C57BL6 עכברים הוא תואם ה-MRI. מערכת CODA מספק לך מדידות של שישה (6) שונות הפרמטרים לחץ דם, לחץ דם סיסטולי ודיאסטולי, קצב הלב, כלומר לחץ הדם, זרימת הדם הזנב, ודם נפח הזנב. מדידות יכול להתבצע גם על עכברים או חולדות ער או מורדם. המערכת כוללת בקר CODA, מחשב נייד, תוכנה, חפתים, בעלי חיים, כריות חימום אינפרא אדום, מד חום אינפרא אדום. ישנם שבעה גדלים שונים עבור בעל עכברים קטנים כמו 8 גרם לחולדות גדולים כמו 900 גרם.

Protocol

1. ציוד הקמה
   1. בחר אזור במעבדה שבה בטמפרטורת החדר הוא בבית או מעל 20 ° C.
   2. הימנע מקומות ליד פתחי אוורור ומיזוג ו / או רעש חזק.
   3. הימנע לחשוף את בעל החיים ריחות שעלולים לגרום לגירוי / או לחץ, כמו בושם, בושם, כימיקלים, וניקיון.
   4. הפעל את הבקר CODA.
   5. הפעל את פלטפורמת מחמם להגדיר רמה 3. אם טמפרטורת החדר היא מעל 25 מעלות צלזיוס, להתחיל רמות 1 או 2.
   6. בקר אבחון מבחן
      1. פתח את התוכנה CODA.
      2. בחר את ההתקנים CODA ידי לחיצה עליו.
      3. לחץ על "התקן מבחן נבחרים".
      4. בחר את האזיקים ערוצי לבדוק ולחץ על "מבחן".
      5. לאחר השלמת הבדיקה, לסגור את החלון מבחן ההתקנים.
2. תוכנה הקמה
   1. ניהול כוח אדם ובעלי חיים
      1. ניהול כוח אדם
         1. בחר כלים> ניהול כוח אדם.
         2. לחץ על "חוקר 1" כדי לשנות את השם.
         3. לחץ על השורות הבאות כדי להוסיף חוקרים נוספים.
         4. לחץ על "Tab טכנאים" לשנות או להוסיף טכנאים.
         5. לחץ על "Tab דוגמאות" על שם בעלי חיים לצורך זיהוי קל לבחור את סוג החיה, חולדה או עכבר.
         6. לחץ על "Tab בעלי חיים" כדי לשנות את סוג החיה ורגישות.
   2. ניסוי חדש
      1. בחר קובץ> ניסוי חדש>
      2. בגין ניסוי חדש
         1. הזן שם ניסוי.
         2. בחר את חוקר מפתח.
         3. בחר תאריך בגין ולחץ על "הבא".
      3. מושב בסיסי מידע
         1. הזן את שם מושב
         2. הגדרת "מחזורי הסתגלות" עד 5. אם אתה מעדיף שלא לכלול מחזורים הסתגלות, לאפס. כדי לסייע עם הסתגלות החיה לבעל וחפתים, להוסיף מחזורים נוספים הניסוי שלך ולהפעיל את הניסוי במשך 5 ימים רצופים.
         3. הגדרת "מספר סטים" 1.
         4. הגדרת "זמן בין הסטים" עד 30 שניות עבור קבוצות מרובות
         5. הגדרת "מחזורים לכל הגדר" עד 20 מחזורים.
         6. הגדרת "זמן בין מחזורי" עד 5 שניות ולחץ על "הבא".
   3. הדגימה לבחירה
      1. 1. בחר את הדגימה ממאגר הדגימה להקצות אותו הערוץ הזמין הראשון ולחץ על "הבא".
      2. מושב פרמטרים
         1. הגדרת "לחץ ספיגה מירבית" כדי 250mmHg.
         2. הגדרת "זמן דפלציה" עד 20 שניות עבור עכברים, חולדות במשך 15 שניות.
         3. הגדרת "כרך מינימום" כדי 15ul.
         4. הגדרת "סגנון תצוגה" לערוץ אחת לכל גרף.
         5. הוסף חוקרים נוספים טכנאים ולחץ על "הבא".
      3. מושב סקריפט
         1. סקור את סקריפט מושב ולחץ על "הבא".
         2. אל תבחר סיום עד שתשלים את סעיף הכנת בעלי חיים.
3. הכנת בעלי חיים
   1. בעלי חיים הקמה
      1. בעלי חיים המחזיק
         1. כדי לאמן ולשפר הסתגלות בעלי חיים, להוסיף מחזורים נוספים הניסוי שלך ולהפעיל את הניסוי במשך חמישה ימים רצופים. אתה גם יכול לסייע הסתגלות ידי הצבת בעלי חיים בעל במשך 15 דקות במשך 3 ימים ברציפות לפני המחקר בפועל.
         2. המקום כל חיה בעל ידי להרים את החיה בזנב בעדינות הצבת חיה לתוך האחורי של המחזיק הפונה את הקצה הפתוח של חרוט האף. הערה: גודל של חיה ביחס לגודל של בעל שנבחר. בעלי חיים צריכים להיות מסוגלים להיכנס בחופשיות בעל.
         3. בזהירות לאבטח את הפתח האחורי לבעל על ידי סיבוב הבורג כובע אדום על הפתח האחורי. יש להקפיד להימנע צובט את הזנב או חלקי גוף אחרים תוך הבטחת הפתח האחורי.
         4. החלק את חרטומו כלפי הפתח האחורי, הגבלת תנועה של החיה. חרטומו צריך להיות בעמדה כדי להגביל את בעלי החיים מן להסתובב בתוך זמן מחזיק.
         5. המקום בעל לבמה התחממות במצב הייעודי. אם בודקים את אותה קבוצה של בעלי חיים על פני תקופה של זמן, כדי להיות בטוח לסובב את עמדת המחזיק בפלטפורמת ההתחממות לשפר עקביות ודיוק של מדידות לחץ הדם שלך. אפשר את החיה לפחות 5 דקות להסתגל לבעל.
         6. אין לגעת או לטפל בבעלי חיים תוך בתוך לבעל. הקשר גדל יכול להרגיז את בעלי החיים.
         7. אין להשאיר את בעל החיים של מחזיקי ללא השגחה.
      2. קאף מיקום
         tyle = "padding: 5px;">
         1. נושא הזנב באמצעות "קאף ספיגה." המקום הזה השרוול קרוב לבסיס של הזנב ככל האפשר בלי כוח.
         2. אבטח את "קאף Tubing ספיגה" ב החריץ על החלק האחורי העליון של המחזיק.
         3. נושא הזנב דרך "קאף הציבורי של ורמונט", הצבתו בתוך 2mm של "קאף ספיגה".
         4. אבטח את "Tubing הציבורי של ורמונט קאף" בתוך החריץ על החלק האחורי העליון של המחזיק.
         5. צרף את האזיקים לבקר CODA.
      3. בעלי חיים טמפרטורה
         1. אפשר את החיה לפחות 5 דקות thermoregulate.
         2. רשום את הטמפרטורה של החיה לעתים קרובות עם מדחום אינפרא אדום. הטמפרטורה צריכה להיות חיה 32-35 ° C.
4. ניסוי
   1. בגין הניסוי
      1. לחץ על "סיום" ו הניסוי יחל באופן מיידי.
   2. סיום הניסוי
      1. בעל חיים
         1. מיד להסיר את החיה מן האזיקים מחזיק.
         2. מחזירים את החיה לכלוב שלהם לאחר "מושב פשוט דוח סיכום" מוצג.
      2. איסוף נתונים
         1. לאחר השלמת המחזור האחרון מחזורי קיבל יוצג באופן אוטומטי בפורמט אלקטרוני בתוך היישום CODA, ללחוץ על כפתור "ייצוא ל-Excel".
         2. בחר את התיקייה כדי למקם את הקובץ, שם הקובץ ולאחר מכן לחץ על "שמור".
         3. פתח את היישום Excel ולחץ על "פתח".
         4. הצג את כל סוגי הקבצים כדי להציג את ". Csv הקובץ שנשמר", לחץ על הקובץ.
      3. עיבוד נתונים
         1. ישנן כמה דרכים לעבד את הנתונים בתוך הקובץ Excel. מנהג נפוץ הוא לקבל את סטיית תקן ממוצעת.
         2. מחיקת מדידות אם סטיית התקן גדולה יותר 30.
         3. בנוסף, מחזורי דחה ניתן לראות את כל הנתונים ניתן לייצא בקלות ל-Excel. היוועץ במדריך למשתמש לקבלת מידע נוסף.