マウスの横大動脈狭窄（TAC）は、心肥大や心不全の開発の基礎となるメカニズムを研究するために一般的に使用される実験的なモデルです。ここで、我々は、マウスの心肥大の再現性の学位を作成するために大動脈を収縮する手順を説明します。
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この記事について
サマリー
要約
マウスの横大動脈狭窄（TAC）は、圧負荷誘発性心肥大および心不全のための一般的に使用される実験的なモデルです。
プロトコル
パート1：術野の準備
- 動作フィールドは、75％イソプロピルアルコールで消毒されています。
- 加熱パッドは上と右の温度でであることを確認してください。推奨されるシステムは、37℃で維持されている治療のパッドに接続されている水の循環ポンプGaymar℃± 1℃です。心拍数の急激な低下を避けるために手術中に正常な体温を維持することが重要です。
- 手術器具は、手術前にホットビーズ滅菌器で滅菌されています。鈍はさみ、もちろん曲がったピンセットX 2、罰金45 °傾斜鉗子X 2、角度の春のはさみ、胸リトラクタ、およびニードルホルダー：この手順では、以下の手術器具が必要になります。
- コットンアプリケーターは、出血の場合には手にしてください。
パート2：マウスの調製と挿管
- マウスは0.5 -1.0 L /分100％O 2と混合イソフルラン2％の誘導室内で麻酔する。
- バリカンは、ネックラインからミッド胸の高さに毛を剃るために使用されます。
- マウスは、体温を維持するために加熱パッドの上仰臥位に配置されます。
- ゴムバンドを首を拡張するために動物の前歯の上に置かれる。片手で湾曲した鉗子を使用して、舌を優しく側に操作されます。一方で、気管内挿管はPE 90チューブを使用して実行されます。気管内チューブは、125〜150回/分お....
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ディスカッション
人間の大動脈弁狭窄症を模倣TACは、マウスでは心肥大や心不全を誘発することが一般的な方法です。大動脈狭窄のための代替サイトは、昇順および腹部大動脈が含まれています。大動脈狭窄を昇順とは、左心室（LV）上に極端な、より迅速な過負荷を提供します。対照的に、腹部大動脈狭窄は、可能な補償の手段として、循環の無傷の大部分を残します。従って8には、調査へのより従順時間依存の方法で十分なLVの過負荷を提供するとして、TACは、しばしば好ましいモデルです。この手順は練習で、技術的に困難なことができますが、我々は、野生型マウスで80〜90％の生存率を達成しています。
横大動脈狭窄の気密性は、肥大の開発の度合いと心不全と拡張が発達する時間枠を決定する。また、マウスの年齢は、心不全の開発の回収率と反応速度に影響を与えます。それ以上の年齢のマウス（年齢の> 12ヶ月）は、TACに頸動脈の適応応答を開発するために時間がかかり、そしてより速くより若いマウス（生後3〜4ヵ月）より拡張型心筋症を発症する可能性があります。5
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謝辞
XHTWは、医学研究でWMケック財団特別若い学者であり、そしてまた、NIH / NHLBIの助成金R01 - HL089598とR01 - R01HL091947、および筋ジストロフィー協会の助成金＃69238でサポートされています。 RJvOは生理ゲノミクスにおける2008年から2010年、アメリカ生理学会ポストドクトラルフェローシップの受賞者です。この作品は、CaMKIIはハートでシグナリングのための財団Leducqアライアンスによって部分的にサポートされています。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| Gaymar T/pump | Harvard Apparatus | Model TP-500 | 循環水ポンプ |
| 温度治療パッド | Harvard Apparatus | 60-3414 | |
| ホットビーズ滅菌器 | Fine Science Tools | 18000-45 | |
| 鈍端剪刀 | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5980 | |
| 角度付きスプリング剪刀 | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5668 | |
| 胸部開創器 | Fine Science Tools | 17002-02 | |
| 粗い曲線ピンセット | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5138 | |
| Dumont 精密 45° 角度付きピンセット | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| 持針器 | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 電気シェーバー | GE Healthcare | マウスの被毛切除用 | |
| PE 90 チュービング | BD Biosciences | 427420 | 挿管用 |
| MiniVent（人工呼吸器） | Harvard Apparatus | Type 845 | |
| ベタジン | Fisher Scientific | 19-027132 | 医療用品店で購入可能 |
| 滅菌手袋 | Mckesson | 20-1565 | |
| 実体顕微鏡 | Unico | ZM186 | |
| 6-0 シルク縫合糸 | Fine Science Tools | 18020-60 | |
| 27 ½ ゲージ針 | BD Biosciences | 305109 | |
| 6-0 プロレン縫合糸 | Mckesson | 3286 | |
| ブプレノルフィン | Institutional Animal Facility |
参考文献
- Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).
- Heineke, J., Molkentin, J. D.
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