Montering Voksen Drosophila Brains: En metode til at forberede slides til Confocal Imaging
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Kelly, S.M., et al. Dissektion og Immunofluorescent Farvning af Mushroom Body og Photoreceptor Neurons i Adult Drosophila melanogaster Brains. J. Vis. Exp. (2017).
Denne video beskriver en metode til montering intakt hjerner fra voksne fluer under en bro dias og viser protokollen udføres på immunostained hjerner for fluorescerende mikroskopi.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Kelly et al.,Dissektion og immunfluorescerende farvning af svampekrop og fotoreceptor neuroner i voksendrosophila melanogaster hjerner, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montering Voksen D. melanogaster Brains på mikroskop Slides og Imaging Byg en “bro” dias. Placer to “base” coverslips ca. 1 cm fra hinanden på et positivt ladet dias. Sørg for, at den positivt ladede side af diaset vender op. Hold coverlips til diaset med n…
Representative Results
Figur 1: Montering af hjerner som forberedelse til immunfluorescensbilleddannelse. (A) Hjerner er monteret på SuperFrost Plus-rutsjebaner med et brodæksel for at forhindre udfladning af hjernen. To “base” dække glider er overholdt en Superfrost Plus positivt ladede dias med klar fingernegl polish og dissekeret hjerner er derefter placeret på diaset mellem dem. En klar “bro” dække slip er placeret ove…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Cite This Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).