ج. ايليجانس تتبع الحركة: طريقة لتقييم الحركة في الديدان

Abstract

المصدر: Davies ، A. G. et al. اختبار لقياس تأثيرات الإيثانول على سرعة حركة Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

يصف هذا الفيديو استخدام الفيديو وبرامج التتبع لتسجيل حركة الدودة في الساحة. يقيس بروتوكول المثال تأثير التعرض للإيثانول على حركة الدودة.

Protocol

البروتوكول التالي هو مقتطف من Davies et al ، اختبار لقياس تأثيرات الإيثانول على سرعة حركة Caenorhabditis elegans، J. Vis. Exp. (2015).

1. خطوات لتنفيذها في اليوم السابق للفحص

   1. اختر ديدان المرحلة L4 إلى أطباق وسط نمو الديدان الخيطية الطازجة (NGM) المصنفة بحديقة من OP50 E. coli ، وزرعها عند 20 درجة مئوية O / N. تتطلب كل حالة فحص 10 ديدان. اختر فائضا من الديدان للسماح بفقدان O / N للديدان.
      1. فقط فحص التي هي بالغة في اليوم الأول ؛ تنمو العديد من....

Materials

<حدود الجدول = "0" cellpadding = "0" cellpacing = "0" نمط = "العرض: 711 بكسل ؛" العرض = "711" > List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments C. سلالات ايليجانس مركز علم الوراثة Caenorhabditis < td style="العرض:213px;"> < ارتفاع TD = "19" النمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛" > 60 × 15 مم ألواح بتري ، ثلاثية التهوية غرينر بيو ون 628161 تكفي العلامات التجارية الأخرى للأطباق. NGM أجار مختلف كلوريد الصوديوم (3 جم / لتر) ، أجار (17 جم / لتر) ، الببتون (2.5 جم / لتر) ، 1 مل كوليسترول (5 مجم / مل في الإيثانول) ، 1 مل (1 م) MgSO4 ، 1 مل (1 م) CaCl2 ، 25 مل (1 م) KPO4 ، الرقم الهيدروجيني = 6 ، 975 مل H2O الملقط مختلف على سبيل المثال ، فيشر ساينتفيك # 10300 <ارتفاع td = "19" نمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛ "> 37 درجة مئوية حاضنة مختلف لتجفيف أجار حلقات نحاسية Plumbmaster STK # 35583 (حشية خيط 48 غطاء) 1.6 سم القطر الداخلي ، حلقات نحاسية بقطر خارجي 1.8 سم < ارتفاع TD = "19" نمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛ "> 100٪ إيثانول مختلف بارافيلم م بيميس PM996 < td height = "19" النمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛" >كاميرا CCD تشي ماجينغ RET-4000R-F-M-12 تتمتع هذه الكاميرا بمجال رؤية كبير. < td height = "19" style = "height: 19px ؛ "> مجهر مجسم مع C-mount و 0.5X لايكا ميز6 النموذج الذي توقف ، M60 هو المكافئ الحالي. مصدر الضوء شوت أ08923 إضاءة خلفية مقاس 3 × 3 بوصة لإضاءة متساوية عبر مجال الرؤية < td height = "19" النمط = "الارتفاع: 19 بكسل ؛" > برنامج التصوير والتتبع علم التحكم الآلي في وسائل الإعلام ImagePro-Plus v6.0-6.3 تحتوي الإصدارات الأحدث من البرنامج على وظائف التتبع.