Summary
Bu raporda, ışıkla sertleşen diş reçine elektrotlar veya kronik deneylerde mikrodiyaliz probları montaj tabanı için yeni bir uygulama öneriyorum. Bu malzeme, kafatası doğrudan yapıştırma sağlar.
Abstract
Kronik kayıt deneylerde, kendi kendine sertleşen diş akrilik reçineler elektrotlar veya mikrodiyaliz-probları bir montaj üssü olarak kullanılmıştır. Bu akrilik kemik bağı olmadığından, vida çapa olarak kullanılmıştır. Ancak, ispinozlar veya fare gibi küçük deney hayvanlarında, kafatasları çok kırılgan ve başarılı bir çapa tutamaz. Bu raporda, ışıkla sertleşen diş reçine elektrotlar veya kronik deneylerde mikrodiyaliz probları montaj tabanı için yeni bir uygulama öneriyorum. Bu malzeme, kafatası doğrudan yapıştırma sağlar. Bu nedenle, demir vida gerekmez ve cerrahi alanında önemli ölçüde azaltılabilir. Geçmiş deneyimler, yapıştırma etkisi en fazla 2 ay koruduğunu göstermektedir. Konvansiyonel reçine pencere malzemeleri, esnek ve uygulanabilir bir kaç dakika. Ancak, bu diş yapıştırıcılar için çalışma süresi pencere, önemli ölçüde daha geniş ve ayarlanabilir.
Protocol
1. Adım. Prob implantasyon hazırlanması
- Anestezi (video gösterilmez)
Interperitoneal ketamin enjeksiyonu (12.5 mg / kg vücut ağırlığı) ve xylazine (25 mg / kg) karışımı cerrahi anestezi istikrarlı bir seviyede üretmek için her kuş anestezisi.
- Stereotaksik bir çerçeveye Fix bir kafa
Xylocaine (TM) jöle, kulak bar basınç yerel ağrılarını azaltmak için kullanın . Kuş baş, kulak bar ve 45 ° açıyla kafa tutan bir gaga sahibinin oluşan bir stereotaksik aparat sabittir . Implantasyonu için stereotaksik cerrahi sırasında, termal kontrol ile cerrahi ped kuş vücut ılık (sıcaklık = 34 ~ 36 ° C).
- Cerrahi alan dezenfekte edin
Ameliyat öncesinde isodine (TM) ile cerrahi alanında dezenfekte edin.
2. Adım. Stereotaksik konumlandırma
- Referans noktası hizalaması
Lambda (Y-noktası) ve işareti Y-nokta boya dolu bir pipet ile kukla prob (cam mikropipet) hizalayın . Kalan son tracer çalışma Dextran-TMR video kullanıldı.
- Cilt insizyonu
Cilt çıkarın ve kafatası yüzeyinde ortaya çıkarmak. Sonra, pamuklu çubukla kafatası yüzeyi temiz.
- Kukla kanül yerleştirilmesi (yatay yönde)
Hedef site (AP ekseni ve Yanal koordinasyon) kukla kanül taşıyın
- Küçük kraniotomi ve dura mater kesi.
Kraniotomi için iyi bir forseps ve duramater kesiler için ince bir enjeksiyon iğnesi (30 G) kullanın. Sonra, kafatası yüzeyi temizleyin.
- Kukla kanül Final konumlandırma (implantasyon)
Mikrodiyaliz prob amaçlanan hedef bölge üzerinde 0.30 mm kılavuz kanül ucu bulun. Son olarak, temiz ve kuru bir yüzey sert yapıştırılması için gerekli olduğundan, tekrar kafatası yüzeyi temiz.
Adım 3. Kraniyal yüzey ön hazırlık
(Diş ürün "doğrudan dolgu restorasyonu" için benzer bir prosedür istihdam edilecektir.)
- Primer tedavi
- Bir çanak B Mix Primar sıvı.
- Kafatasına küçük bir fırça ile yüzey karışımı uygulayın.
- 30 saniye bekletin.
- Hafif hava akımı ile kurulayın. (Yıkamayın.)
- Bonding ajanı uygulaması
- Bonding ajanı kafatasına küçük bir fırça ile yüzey üzerinde uygulayın.
- Hafif bir hava akımı uygulayın. (Yıkamayın.)
- Hafif-20 saniye boyunca tedavi.
Adım 4. Montaj kompozit
- Mount düz plugger reçine
Düz plugger mevcut değilse, bir mikro-spatül yerine kullanılabilir.
- Işık kür
- Artımlı montaj
Artımlı montaj reçine tam reaksiyon sağlamak için tavsiye edilir.
Artımlı montaj için, her montaj önce bonding ajanı geçerlidir.
- Son sertleşme ve ışıkla sertleşen kompozit kalıp.
- Ameliyat sonu
Cerrahi alanı temizleyin (Gentamisin merhem) antibiyotik uygulamak ve stereotaksik alev hayvan kaldırmak. Sonra, bir termo-kontrollü odası (sıcaklık = 33-35 ° C) anestezi sonrası kurtarma için hayvan tutun.
Videoda görüldüğü gibi, herhangi bir anormal davranış, ertesi gün ameliyat sonrası herhangi bir hayvan gözlendi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Geleneksel kendi kendini iyileştirme akrilik reçine uygulama ile karşılaştırıldığında, piyasaya teknik birkaç önemli avantajı vardır:
1. Doğrudan bağlama:
Bir süre için kendi kendini iyileştirme akrilik kemik bağlı olabilir ama bu kemiğe bağlı değildir. Bu nedenle, ankraj vidaları (Bkz. Şekil 2A) bir montaj üssü düzeltmek için gereklidir. Buna karşılık, ışıkla sertleşen reçine kemik doğrudan vida gerekli değildir (Şekil 2B) bağ. Bu nedenle, montaj tabanı boyutu önemli ölçüde azaltılabilir. Ile "metal astar" Buna ek olarak, ışıkla sertleşen reçineler de, bazı metallerin yapışır. Değişken malzemelerin yapıştırılmasında Bu özellik bize, geniş bir uygulama yelpazesi sağlar.
Şekil 2, konvansiyonel kendi kendini iyileştirme akrilik (2A) ve ışıkla sertleşen bir yapıştırıcı reçineler (2B) kullanan bir implantasyon kullanarak bir implantasyon gösterir. 2A, çapa vidalı montaj tabanı düzeltmek için kullanılır. 2B, ışıkla sertleşen reçine kafatası ve cıvata uymasını gerçeği nedeniyle montaj tabanının boyutunu önemli ölçüde azaltılmış olabilir gerekli değildir. 
Şekil 2
2. Kullanımı kolay:
Konvansiyonel reçine işleme zaman penceresi birkaç dakika içinde, nispeten kısa. Bu yüksek bir akışkanlığa sahip ve ilk bakışta ele almak kolay değil. Ancak, kimyasal reaksiyon bir kez başladı, tepkime ekzotermik ısı ile hızlandırılmış ve reçineleri kısa bir süre içinde daha zor hale gelir. Işıkla sertleşen reçine için işlem süresi pencereler, önemli ölçüde daha geniş ve ayarlanabilir. Temel olarak, ışıkla sertleşen reçineler başından itibaren anı sürekli elastikiyetini tutmak.
3. Reaksiyon ısı üretmek değildir:
Kendi kendine sertleşen reçine tepki Kür Ekzoterm. Montaj tabanı kalın olduğunda, bu ısı birikir ve doku hasarı olabilir. Reaksiyon ışıkla sertleşen reçine ısı oluşturmaz ve malzemenin biyouyumlu.
4. El LED ışık:
Işık ünitesi gibi malzeme ve özel ekipman maliyeti, bir sorun olabilir. Şekil 3'te, çok maliyetli olmayan bir el LED ışık ünitesi tanıtmak. Bu el yapımı hafif kavurma ünitesi pahalı ticari birim için ikame olarak kullanılıyor olabilir.
Şekil 3A, ışık ünitesi devre şeması gösterir. Şekil 3B, birbirine paralel yapıştırılmış ve beyaz tahta marker sahibi takılı üç LED gösterir. 
Şekil 3 - Devre diyagramı el yapımı bir ışık ünitesi ve fotoğraf (B) (A)
Bu teknik, balık, fare, tavşan, kedi ve maymun gibi diğer deney hayvanlarında elektrotlar ya da mikrodiyaliz prob kronik implantasyonu uygulanabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Deneyler hayvanın beyin deney bilim enstitüsü, RIKEN (RIKEN-BSI) ve enstitünün hayvan etik kurul onaylı yönergelere uygun olarak yapılmıştır.
Acknowledgments
Biz bu çalışmaları sırasında nazik destekler ve verimli tavsiyeleri RIKEN-BSI meslektaşlarımıza teşekkür ederiz. Profesör Shigemi Mori, Profesör G bor Juh sz, Dr benim samimi takdirlerimi ifade etmek istiyorum. İleri Araştırmalar Yüksek Lisans Üniversitesi, Japonya lisansüstü ders sırasında bana mikrodiyaliz yöntemin tavsiye Kiyoji Matsuyama, Katalin AK kesi ve rp d Dobolyi. Son olarak, Sayın Chris Sarnecky ve Dr. Akitsugu Takasu video kaydı destekler için teşekkür ederim.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Bengalese finches | Animal | Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g | ||
| Microdialysis probe | Tool | EICOM | total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g. | |
| Light-cured dental adhesive resin system | Kuraray Medical Inc | +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ). | ||
| Surgical instruments | Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy. | |||
| Light-unit | Rolence Enterprise Inc | Ultra-Lite 500E | ||
| Microscope | Konan Medical | KOM300 | with C-mount adaptor | |
| 3- CCD camera | Tool | Hitachi | HV-D30 |
References
- Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
- Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
- Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
- Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
- Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
- Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).
