Vi visar i videon en metod för att producera en mellersta cerebral artär ocklusion i vuxna möss med hjälp av en intraluminal monofilament. Vi visar också hur man ska värdera omfattningen av hjärninfarkt av 2,3,5-triphenyltetrazolium klorid (TTC) färgning.
Stroke är den vanligaste dödliga neurologisk sjukdom i USA 1. Majoriteten av stroke (88%) beror på blockering av blodkärl i hjärnan (ischemisk stroke) 2. Eftersom de flesta ischemisk stroke (~ 80%) inträffar inom mellersta cerebral artär (MCA) 3, har många djur stroke-modeller som har utvecklats fokuserat på denna artär. Den intraluminal monofilamentgarn modellen av mellersta cerebral artär ocklusion (kortex) innebär införandet av en kirurgisk glödtråden i den yttre halspulsådern och dra den framåt i den inre halspulsådern (ICA) tills spetsen occludes ursprung MCA, vilket resulterar i ett upphörande av blodflödet och efterföljande hjärninfarkt i MCA område 4. Tekniken kan användas för att modellera permanent eller tillfällig ocklusion 5. Om sutur tas bort efter ett visst intervall (30 min, 1 h eller 2 h), är reperfusion uppnås (övergående kortex), om glödtråden är kvar på plats (24 h) Bestämmelserna är lämplig som en modell av permanent kortex . Denna teknik kräver inte craniectomy, ett neurokirurgiskt ingrepp för att avlägsna en del av skallen, som kan påverka intrakraniella tryck och temperatur 6. Det har blivit den mest använda metoden för att efterlikna permanent och tillfällig fokal cerebral ischemi hos råttor och möss 7,8. För att utvärdera omfattningen av hjärninfarkt, bets vi hjärnan skivor med 2,3,5-triphenyltetrazolium klorid (TTC) för att identifiera ischemisk hjärnvävnad 9. I denna video visar vi de kortex metoden och bestämning av infarkt storlek med TTC färgning.
Kortex hos möss används ofta för att modellera fokal ischemi i hjärnan hos människor. Användning av möss för stroke studier har blivit vanligare på grund av tillgången av transgena och knockout stammar. Det finns några viktiga detaljer att notera i protokollet:
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöddes av NIH bidrag NS057195, UCSF REAC utmärkelse, och Kent State University startfond till WH Chou.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Isoflurane | Chemical | Aerrane, Baxter | 95045-588 | |
V-10 Anesthesia system | Equipment | VetEquip | 901807 | |
TR-200 Temp Controller | Equipment | Fine Science Tools | 21060 | |
Electric clipper | Equipment | Braintree | CLP-9931 | |
Dissecting microscope | Equipment | Nikon | SMZ745T | |
Retractor system | Equipment | Braintree | ACD-014 | |
Bipolar coagulator | Equipment | Howard Instrument | 64000 | |
Silk suture | Material | Harvard Apparatus | 510479 | |
Monofilament suture | Material | Harvard Apparatus | 723351 | |
Vascular clamp | Equipment | Fine Science Tools | 00396-01 | |
Vannas scissor | Equipment | Fine Science Tools | 15000-08 | |
Brain matrix | Equipment | Braintree | BS-2000C | |
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Chemical | Sigma-Aldrich | T8877 | |
10% neutral buffer formalin | Chemical | Sigma-Aldrich | HT5011 |