तुलनात्मक प्रजातियों दृष्टिकोण व्यवहार neuroscientists के विभिन्न neurobiological विशिष्ट एक विशिष्ट पशु मॉडल की विशेषता के रूप में देखा व्यवहार के साथ जुड़े कारकों का पता लगाने के लिए अनुमति देता है. स्वाभाविक रूप से निकट से संबंधित प्रजातियों के बीच व्यवहार में अंतर घटनेवाला का लाभ उठाते हुए, इस तकनीक इनवेसिव तकनीक को व्यवहार की अभिव्यक्ति में हेरफेर करने की आवश्यकता नहीं है.
व्यवहार तंत्रिका विज्ञान के एक लक्ष्य के लिए अंतर्निहित neurobiological कारक है कि विशिष्ट व्यवहार को विनियमित करने की पहचान है. पशु मॉडल का उपयोग करने के लिए इस लक्ष्य को पूरा करने के लिए, कई रणनीतियों methodological इनवेसिव तकनीक ब्याज के व्यवहार (उदाहरण के लिए, घाव विधियों, औषधीय जोड़तोड़, microdialysis तकनीक, अनुवांशिक इंजीनियर पशु मॉडल) की तीव्रता में हेरफेर करने के लिए आवश्यकता होती है. एक तुलनात्मक प्रजातियों दृष्टिकोण का उपयोग शोधकर्ताओं को स्वाभाविक रूप से प्रतिक्रिया निकट से संबंधित प्रजातियों में मौजूदा रणनीति में मतभेद उत्पन्न करने का लाभ लेने के लिए अनुमति देता है. हमारी प्रयोगशाला में हम Peromyscus जीनस की दो प्रजातियों कि पैतृक प्रतिक्रिया में अलग का उपयोग करें. पुरुष कैलिफोर्निया हिरण माउस (Peromyscus californicus) अपने चचेरे भाई जबकि महिला के रूप में एक ही माता पिता प्रतिक्रियाओं दर्शाती है, आम हिरण माउस (Peromyscus maniculatus) वस्तुतः पिल्ले की उपस्थिति में कोई पोषण / माता – पिता की प्रतिक्रियाएं दर्शाती है. इस लेख में विशेष रुचि का neurobiological affiliative सामाजिक पैतृक कैलिफोर्निया हिरण माउस द्वारा प्रदर्शित प्रतिक्रियाओं के साथ जुड़े कारकों की एक अन्वेषण है. व्यवहार विश्लेषण के लिए डेटा संग्रह; की तैयारी और दिमाग का सेक्शनिंग, बुनियादी कदम के लिए immunocytochemistry में शामिल शोध के इस प्रकार के लिए उपयुक्त प्रजातियों की पहचान: क्योंकि व्यवहार तंत्रिका विज्ञान दृष्टिकोण बहुमुखी, अध्ययन के निम्नलिखित प्रमुख घटक संक्षेप किया जा संबोधित करेंगे वैसोप्रेसिन immunoreactivity की मात्रा का ठहराव, सॉफ्टवेयर न्यूरोइमेजिंग के लिए मस्तिष्क के ऊतकों यों का उपयोग, एक microsequencing वीडियो विश्लेषण के उपयोग के व्यवहार स्कोर और अंत में, उपयुक्त सांख्यिकीय विश्लेषण प्रदान करने के लिए शोध निष्कर्षों के सबसे सूचित व्याख्याओं.
यह लेख तीन आवश्यक व्यवहार तंत्रिका विज्ञान की जांच के सफल निष्पादन के लिए महत्वपूर्ण होने के बारे में सोचा घटकों पर चर्चा, (2) एक सटीक और संवेदनशील immunocytochemistry प्रोटोकॉल, (1) एक प्रतिनिधि और वैध पशु मॉडल और (3) ज्यादातर विश्लेषण (अवलोकन और सांख्यिकीय ) दोनों व्यवहार और मस्तिष्क डेटा की. एक एकल वर्ग में गलतियाँ सबसे निश्चित रूप से पूरे अध्ययन के परिणामों समझौता नहीं करेंगे. इसलिए, ध्यान से उचित पशु मॉडल का चयन करने के बाद, काफी प्रयास पायलट व्यवहार और histological प्रक्रियाओं को विश्वास दिलाता हूं कि व्यवहार मज़बूती से अध्ययन में मनाया जाएगा, दिमाग के सफल प्रसंस्करण द्वारा बाद परीक्षण की ओर निर्देशित किया जाना चाहिए.
जैसा कि पहले उल्लेख किया है, तुलनात्मक प्रजातियों का उपयोग करने के लिए एक विशेष प्रतिक्रिया के neurobiological तंत्र की पहचान एक मूल्यवान methodological दृष्टिकोण है क्योंकि इस तकनीक जेनेटिक इंजीनियरिंग या दर्दनाक शल्य चिकित्सा जोड़तोड़ की आवश्यकता नहीं है. इस प्रकार, इस methodological दृष्टिकोण में कम की धमकी दी है, बरकरार जानवरों का इस्तेमाल. जानवरों के प्राकृतिक रूपों का उपयोग, तथापि, प्राकृतिक वातावरण की तरह के निगमन द्वारा सुदृढ़ भले ही पशुओं प्रयोगशाला में रखे जाते हैं. इसके अलावा, अगर प्रयोगशाला अध्ययनों को आगे ब्याज के व्यवहार में प्रजातियों मतभेद की प्रामाणिकता को मान्य करने के लिए क्षेत्र बढ़ाया जा सकता है है, यह अगले कदम की सिफारिश की है. हालांकि तुलनात्मक दृष्टिकोण कई लाभ प्रदान करता है, डेटा की एक सीमा correlative प्रकृति है, नतीजतन, औषधीय जोड़तोड़ के रूप में अतिरिक्त तकनीक को आगे हित के व्यवहार में लक्षित neurobiological प्रणालियों की भूमिका को मान्य करने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए.
एक बार experimenters, व्यवहार, histological और सांख्यिकीय प्रक्रियाओं के बारे में आश्वस्त लग रहा है, इतनी देखभाल लिया जाना चाहिए कि पशुओं के रहने की स्थिति में सभी समूहों के लिए छोड़कर, ज़ाहिर है, प्रयोगात्मक हेरफेर के लिए स्थिर रहेगा. प्रकाश कार्यक्रम, शोर स्तर, रखवाले, नमी का स्तर और प्रयोगशाला में odors जैसे चर में परिवर्तन 'जानवरों neurobiological प्रतिक्रियाओं पर महत्वपूर्ण प्रभाव हो सकता है.
इस अनुच्छेद में प्राथमिक एंटीबॉडी वैसोप्रेसिन लेकिन अन्य प्राथमिक एंटीबॉडी ब्याज के विभिन्न neurochemicals के एक बहुतायत के लिए इस्तेमाल किया जा सकता का पता लगाने के के लिए इस्तेमाल किया गया था. यदि experimenter एक नया एंटीबॉडी के साथ काम कर रहा है, यह महत्वपूर्ण है टाइट्रेट करना अध्ययन का संचालन करने के लिए नई एंटीबॉडी के इष्टतम कमजोर पड़ने का निर्धारण. कई बार बहुत अधिक एंटीबॉडी (के रूप में विक्रेता द्वारा सुझाए) प्रयोग किया जाता है, ऊतक कि भी संकेत अंतर अंधेरे है जिसके परिणामस्वरूप में, आगे, एंटीबॉडी के अत्यधिक उपयोग से बहुत ही महंगा है.
अंत में, अगर एक एक सांख्यिकीय विश्लेषण से अधिक वैकल्पिक विचारों और डेटा की व्याख्या प्रदान किया जा सकता है, वे का उपयोग किया जाना चाहिए. इस विशेष अध्ययन में, यह सामान्य रैखिक मॉडल, correlational, और बहुआयामी स्केलिंग विश्लेषण डेटा के सबसे जानकारीपूर्ण दृश्य प्रदान किया गया.
The authors have nothing to disclose.
इस शोध कोई अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया था. राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (KGL के लिए) 0,723,341 है. हम भी हैं Schapiro अंडर ग्रेजुएट रिसर्च फैलोशिप प्रोग्राम और Randolph – Macon कॉलेज में मनोविज्ञान विभाग द्वारा उपलब्ध कराए गए योगदान के लिए आभारी हैं. आखिरकार, हम इस और इस वीडियो के लेख के लिए आर एम सी प्रयोगशाला की तैयारी में अमांडा Rzucidlo मदद शोध में क्रेग Kinsley सहयोगात्मक योगदान की सराहना करते है.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Binocular Compound Microscope | Motic | BA400 | |
BIOQUANT Life Science Software | BioQuant Image Analysis Corporation | Version 8.40.20 | |
Cryostat | Microm | HM525 | |
Masterflex Console Drive Easy-Load L/S (Perfusion Pump) | Cole-Parmer Instrument Company | 7518-00 | |
24 Well Cell Culture Cluster (tissue culture treated; non-pyrogenic polystyrene; sterile) | Corning Costar | 3526 | |
25x75x1mm Microscope Slides | Globe Scientific, Inc. | 1324W | |
22x50mm No.1 Cover Slip | Globe Scientific, Inc. | 1414-10 | |
Non-sterile 3mL Graduated Large Bulb Transfer Pipettes | Electron Microscopy Sciences | 70962-9 | &nbps; |
Alconox Detergent Powder | Alconox | 1104 | |
Sodium Chloride | Sigma-Aldrich | S9888-1kg | CAS 7647-14-5 |
Monobasic Sodium Phosphate | Spectrum | SO130 | CAS 10049-21-5 |
Sodium Phosphate Dibasic Dihydrate | Sigma-Aldrich | 30412 | CAS 10028-24-7 |
Triton X | Spectrum | TR135 | CAS 9002-93-1 |
Permount | Fisher | SP15-500 | CAS 108-88-3 |
Chromium potassium Sulfate | Sigma | C-5926 | CAS 7788-99-0 |
CitriSolv | Fisher Scientific | 22-143975 | |
Ethanol, High Den.Poly Bottles, 200 proof, 24 x 1 pint | Pharmco-AAPER | 111000200CSPP | |
Normal Goat Serum | Vector | S-1000 | |
Rabbit anti vasopressin Analyte specific reagent | Immunostar, Inc. | 20069 | |
Biotinylated anti-rabbit IgG (H+L) affinity-purified | Vector | BA-1000 | |
Elite Standard Vectastain ABC Kit | Vector | PK-6100 | |
DAB Peroxidase Substrate Kit | Vector | SK-4100 | |
Original Unflavored Gelatin (4-count envelopes) 1-oz box | Knox | Purchase at local grocery store | |
3% Hydrogen Peroxide | CareOne | Purchase at local pharmacy | |
Bleach | Clorox | Purchase at local grocery store |