Akut och kronisk Taktil Sensorisk Provning efter ryggmärgsskada hos råttor

Summary

Vi beskriver två taktila sensoriska testmetoder för akuta eller kroniska perioder av ryggmärgsskada hos råttor. Dessa validerade procedurer kan upptäcka utveckling och underhåll av allodyni-liknande känsla.

Abstract

Ryggmärgsskada (SCI) försämrar sensoriska system som orsakar allodyni ^1-8. För att identifiera cellulära och molekylära orsaker till allodyni, känsliga och gäller sensoriska test i råtta SCI modeller behövs. Men fram till nyligen hade ingen enhetlig testningsförfarande har validerats för SCI, så att standardiserade metoder inte har genomförts i hela Labs. Dessutom kan tillgängliga testmetoder inte genomföras akut eller när svår Rörelsehinder funnits, förebygga studier av utvecklingen av SCI-inducerad allodyni ^3. Här presenterar vi två validerade sensoriska testmetoder med von Frey hår (VFH) monofilament som kvantifierar förändringar i taktila sensoriska trösklar efter SCI ^4-5. Ett test är väl etablerade Up-Down test som visar hög sensitivitet och specificitet mellan olika SCI svårighetsgrader vid test kroniskt ^5. Den andra testet är ett nyutvecklat dorsal VFH test som kan användas akut efter SCI närllodynia utvecklar, innan motorn återvinning ^4-5. Varje VFH monofilament gäller en kalibrerad kraft vid beröring med huden på baktassen tills den böjs. I upp-ner-metoden, är alternerande VFHs av högre eller lägre krafter används på plantar L5 dermatom att avgränsa flexor återtagströsklarna. Successivt högre krafter vidtas fram till dess uttag sker då lägre kraft VFHs används tills tillbakadragande upphör. Den kännbara tröskeln reflekterar den kraft som krävs för att framkalla abstinens hos 50% av de stimuli. För den nya testet är varje VFH appliceras på rygg L5 dermatom i tassen, medan råttan stöds av examinator. Den VFH stimulering sker i stigande ordning kraft förrän minst 2 av 3-program vid en viss kraft ger tassen tillbakadragande. Taktil sensorisk tröskel är den lägsta kraft för att framkalla tillbakadragande 66% av tiden. Acklimatisering, provning och scoring procedurer beskrivs. Avvikande studier som kräver ett omtest och typiska försök definieras. Djuranvändning wsom har godkänts av Ohio State University Animal Care and Use Committee.

Protocol

1. Upp / Ner Plantar Von Frey Testing Syftet med testet är att bestämma taktil känslighet genom att mäta hur mycket kraft som erfordras för att framkalla tassbortdragande från stimulus. Kommersiellt tillgängliga kalibrerade Von Frey Hår monofilament mellan intervallen 4,56 och 6,10 används för att stimulera tassen. Andra sinnesintryck som visualisering av stimulans eller proprioception kan förbrylla taktila tröskel åtgärder för svar baserade på visuella eller proprioceptiva ing…

Discussion

De VFH testmetoder presenteras här representerar två tester paradigm som är känsliga och gäller för användning i råtta SCI modeller. Viktigt var dorsala VFH testet skapades för bedömning av återvinning av taktila känsla av baktassarna akut efter mitten bröstkorg SCI när råttorna inte kan stå på deras bakdelar. Detta test paradigm kan också användas när råttorna återfå förmågan att stödja sin vikt och för bakbenen efter cervikal SCI.

De två paradigmer visat här an…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Semmes-Weinstein Monofilaments	Stoelting Co	58011
Fish Breeder Box	Aquarium Supply Store		Hole drilled in side for cereal delivery
Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid)	Hardware Store
Elastic to hold fish breeder box in place	Craft Store
Sugared Cereal	Grocery Store
Surgical Huck Towel 16″x 23″	Medical Supply Store