Summary
نحن تصف مقايسة التشخيص القيمة التي يمكن استخدامها لاتخاذ قرار الانسحاب من كبت المناعة بعد زرع من دون مخاطر مرتفعة من رفض الكسب غير المشروع. يستخدم فحص مبادئ تأخر نوع فرط الحساسية ويوفر تقييم دقيق لكلا المانحة محددة المستجيب والتنظيمية الاستجابات المناعية التي شنت من قبل المستفيدين.
Abstract
تأخر استجابة من نوع فرط الحساسية (DTH) هو سريع في مظهر الجسم الحي من T الاستجابة المناعية التي تعتمد على خلية لمستضد الأجنبية (AG) أن النظام المناعي المضيف شهدت في الماضي القريب. غالبا ما تنقسم التفاعلات DTH إلى مرحلة التوعية، مشيرا إلى التجربة الأولية مستضد، ومرحلة التحدي، والذي يتبع عادة بعد عدة أيام التوعية. يعتبر كثير من الأحيان لعدم وجود تأخر من نوع فرط الحساسية استجابة إلى حج استدعاء يتبين من اختبار الجلد كدليل على استعطال. وقد تم فحص البيوت التقليدية المستخدمة بشكل فعال في تشخيص العديد من الالتهابات الجرثومية.
على الرغم من تقاسم ميزات المناعة مماثلة مثل تسلل لمفاوية، وذمة، ونخر الأنسجة، وDTH المباشرة ليست تقنية التشخيص ممكنا في مرضى زرع بسبب إمكانية الحقن المباشر مما أدى إلى توعية لمستضدات المانحة وفقدان الكسب غير المشروع. لتجنب هذه المشكلة، وهمهمةتم وضع إلى الفأر "عبر الجسم الحي" DTH مقايسة 1،2. هذا الاختبار هو في جوهره نقل DTH الفحص، التي تم حقن الخلايا البشرية في الدم المحيطي وحيدات النوى (PBMCs) ومستضدات محددة تحت الجلد في pinnae أو قاطع الطريق على فأرة الحاسوب السذاجة والبيوت مثل تورم يقاس بعد 18-24 ساعة 3. عرض المستضد بواسطة الخلايا مستضد تقديم الإنسان مثل الضامة أو البلدان النامية إلى خلايا T في الأنسجة الوعائية للغاية الماوس يتسبب في تتالي التهابات وتجذب الخلايا المناعية الماوس مما أدى إلى ردود التورم. الرد هو مستضد محددة ويتطلب توعية مستضد قبل. A إيجابية استجابة DTH المانحة التفاعلي في مقايسة تلفزيون DTH يعكس أن مريض زرع وضعت التصرف المناعة الموالية للالتهابات نحو alloantigens الكسب غير المشروع.
الميزة الأكثر أهمية من هذا الاختبار هو أنه يمكن أيضا أن تستخدم لكشف الخلايا التائية التنظيمية، التي تتسبب في قمع المارة. قمع المارة منDTH استجابة نذكر في وجود مستضد المانحة هو سمة من متلقى مع المغايرة المقبولة 2،4-14. قد رصد متلقى للalloreactivity والتنظيم من قبل تلفزيون DTH تحديد مجموعة فرعية من المرضى الذين يمكن أن يستفيدوا من تخفيض المناعة من دون مخاطر مرتفعة من الرفض أو تدهور وظائف الكلى.
ثمة مجال واعد هو تطبيق للمقايسة تلفزيون DTH في رصد المناعة الذاتية 15،16 وأيضا في ورم المناعة 17.
Protocol
1. إعداد الخلايا اللمفاوية
- جمع الدم إلى ACD (حمض سترات الدكستروز) أنابيب.
- عزل PBMC من الدم المحيطي الإنسان الطازجة باستخدام فصل الخلايا الليمفاوية متوسطة وفقا للأساليب القياسية.
- غسل PBMC ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني لإزالة الصفائح الدموية تلويث. تم العثور على الصفائح الدموية لتتداخل مع الجسم الحي عبر فحص البيوت. الحد الأقصى المسموح به من التلوث الصفائح الدموية إعداد PBMC هو ≤ 1X10 7 / الحقن.
- إذا كان هناك تلوث خلايا الدم الحمراء ملحوظ، نفذ تحلل من الخلايا الحمراء باستخدام العازلة تحلل ACK بعد غسل الأولى. إزالة العازلة ACK عن طريق غسل 2 مرات مع برنامج تلفزيوني.
2. إعداد مستضد خيفي
- عزل PBMC من الدم المحيطي المانحة باستخدام الإجراء هو موضح أعلاه.
- Resuspend المانحة PBMC في برنامج تلفزيوني في تركيز 120x10 6 خلية / مل (4x10 6 خلايا / 30 ميكرولتر).
- إضافة 1 ميكرومتر PMSF إلى الخليط لمنع البروتينتدهور.
- يصوتن تعليق الخلية باستخدام سبعة البقول 1 الثانية مع 2 مم مسبار sonicator. (ملاحظة: حافظ على البارد المادية وتجنب فقاعات المفرط في حالة حدوث الرغوة، والسماح للتعليق خلية الجلوس على الجليد لمدة 2-3 دقيقة.)
- تحقق من اختلال> 90٪ من الخلايا باستخدام عدادة الكريات.
- أجهزة الطرد المركزي الخليط في 14،000 دورة في الدقيقة في 4 درجات مئوية لمدة 20 دقيقة في microfuge مبردة.
- طاف لنقل 2.0 مل أنبوب آمن للقفل جديد وتحديد تركيز البروتين.
3. إعداد الخلايا لحقن
- لكل قسامة حقن 7x10 6 PBMC إلى 2.0 مل أنابيب آمنة للقفل.
- الطرد المركزي في 6،000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة في microfuge وإزالة طاف.
- resuspend الخلايا في برنامج تلفزيوني مع أو بدون المضادات. ضبط حجم الحقن إلى 35 ميكرولتر مع برنامج تلفزيوني. يتم استخدام مخطط التالية لحقن:
السيطرة السلبية: PBMC + PBS
مراقبة إيجابية: PBMC + TT / DT (25 و مو؛ ز / الحقن)
التجريبية مولدة استجابة محددة: PBMC + اختبار AG (4-8 ميكروغرام / الحقن)
التجريبية مولدة تنظيم محدد: PBMC + اختبار + حج TT / DT
4. قبل القياس، حقن، وبعد قياس
- تخدير CB17 الماوس SCID مع isoflurane و. قياس سماكة قاطع الطريق الخلفي باستخدام بنابض الفرجار. وضع الفرجار في وسط قاطع الطريق، مع حافة واحدة لمس لوحة المشي مشاركة في القدم، لتوفير معيارا للحفاظ على موقع قياس متسقة. وسجلت سماكة قاطع الطريق عندما استقر قراءة قياس.
- حقن ببطء تعليق خلية تحت الجلد في قطاع الطرق من الفئران باستخدام محاقن الأنسولين ½ سم مكعب مع إبرة عيار 28. أداء حقن مع إبرة لافتا نحو أصابع القدم، وشطبة مواجهة. (ملاحظة: تأكد من عدم وجود تسرب).
- 18-24 ساعة بعد الحقن، وتخدير الماوس مع isoflurane وقياس وتكرار قاطع الطريق التورم.
- Subtrالتصرف سمك كل قاطع الطريق قبل الحقن من قيمة حقن آخر للحصول على قيمة تورم قاطع الطريق، وتعرب عن البيانات في وحدات من 10 بوصة -4. حساب محددة مستضد تورم صافي بطرح التحكم قاطع الطريق تورم (PBMC + PBS) من القيم تورم قاطع الطريق تم الحصول عليها من العلاجات (PBMC + المانحة مستضد خيفي، TT / DT، أو المانحة مستضد خيفي + TT / DT). مطلوب استجابة مراقبة إيجابية للتذكير مستضد TT / DT من ≥ 25x10 بوصة -4 أكثر استجابة خلفية برنامج تلفزيوني لمدة الاختبار أن تعتبر صالحة.
- تحديد تثبيط الاستجابات نذكر في وجود مستضدات المانحة من خلال مقارنة تورم الصافي لكل الحقن باستخدام الصيغة التالية:
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
1. تقييم متلقي زرع الكلى للاستجابة المانحين مستضد محددة باستخدام مقايسة تلفزيون DTH
لاختبار المانحة التفاعلي المناعة الخلوية في متلقي زرع الكلى نحن حقن PBMC من هؤلاء المرضى مع مستضدات المانحة وحدها أو مع إستدعاء مستضد التيتانوس (TT). كما تم حقن الخلايا السيطرة الإيجابية مع ترينيداد وتوباغو وحدها. نلاحظ ثلاثة أنماط رئيسية من نوع فرط الحساسية المتأخر في متلقى (الشكل 1). استجاب جميع المرضى بشدة لأذكر AG (TT). المريض رقم 62 يدل على نمط تنظيمي، والتي تتميز استجابة ضعيفة لمستضد المانحة وقمع ملحوظة مرتبطة (67٪) أن نذكر استجابة مستضد في وجود مستضد المانحة. هذا هو النمط الذي تم جدت لتكون مرتبطة مع الجهاز التسامح طعم خيفي. المريض رقم 48 نمطا nonregulatory، التي لديها ميزة من استجابة ضعيفة إلى المانحة ولكن لا قمع المرتبطة (أو قمع مرتبط <50٪). هذاوقد لوحظ في كثير من الأحيان نمط في المرضى الذين يتناولون الأدوية المثبطة للمناعة. ومع ذلك، قد يكون بعض المرضى لا تزال تلقي آخر زرع المخدرات المثبطة للمناعة عرض المانحة قمع المستضد المرتبط من استجابتها المباشرة الى البيوت. المريض # 8 المعروضات نمط المانحين توعية، والتي تتميز استجابة عالية للمستضد المانحة وليس قمع المرتبطة. ويرتبط هذا الرد مع رفض الكسب غير المشروع في دراسات الحالة السريرية 8.
2. دور التنظيم المانحة الخاصة في الرصد السريري في زرع الكلى
PBMC من المرضى المسجلين في ITN507ST محاكمة الرصد، ("تحديد والتحقيقات الميكانيكية للمتسامح مرضى زرع الكلى") تم اختبار لالمانحة محددة مسار غير مباشر استجابات التنظيمية T المستجيب وT باستخدام مقايسة تلفزيون DTH والجهات المانحة (أو المانحين HLA- بديل متطابق) المستضد. كما هو مبين في الشكل 2A، غير المباشرة مسار T استجابات المستجيب لمستضدات المانحة يكشفمجموعة متميزة عبر مجموعات التحاق؛ زيادات تورم قاطع الطريق حيث يتراوح الحالة السريرية للمرضى من تلك التي هي متسامحة إلى تلك التي يتم رفض مزمن. PBMCs من المتلقين متسامح الناجم عن تخفيض أو تسبب أي ردود DTH في حين PBMCs من الأفراد ردود افعال رافضة تورم قوية.
قياس مكافحة المانحة غير المباشرة مسار T استجابة التنظيمية من قبل مقايسة قمع مرتبط أظهرت أن التنظيم المناعي كان آلية هامة لقبول طعم خيفي كلوي. يبين الشكل 2B انخفاضا في الاستجابات التنظيمية على نطاق معظم (تول) من خلال وسيط (مونو و SI) لأقل تسامحا (CR) من المرضى 14.
3. رصد المناعة الذاتية باستخدام مقايسة تلفزيون DTH
ثمة مجال واعد هو تطبيق للمقايسة تلفزيون DTH في رصد المناعة الذاتية. BOS، عملية الليفي مسد انسداد الشعب الهوائية الصغيرة فيزرع الرئة، هو السبب الأكثر شيوعا لفشل عملية زرع الرئة.
عن طريق اختبار دور الحصانة الخلية بوساطة لنوع الكولاجين V في هذه العملية، وجدنا أن لوحظ أعلى درجة من المخاطر النسبية لالتهاب القصيبات المسد متلازمة (BOS) التنمية في المرضى الذين طوروا استجابة إيجابية تلفزيون DTH لنوع الكولاجين V في حياتهم الدم المحيطي.
أظهر الرقم 3 أن PBMCs من متلقي زرع الرئة، ولكن ليس من ضوابط صحية أو مرضى متلازمة الكولاجين IV-التفاعل كودباستشر بعد زرع الكلى، وكانت في كثير من الأحيان الكولاجين V رد الفعل 15.
4. تطبيق في علم المناعة ورم
عبر الجسم الحي DTH تفتح إمكانيات جديدة في أبحاث السرطان لتحديد أولويات مرضى سرطان البروستاتا لعلاج التلقيح. منذ الخلايا التائية التنظيمية تلعب دورا هاما في تطور مرض السرطان والتقدم، كنا تلفزيون DTH لاختبار التفاعل من PBMCS من مرضى السرطان تعامل مع الحمض النووي لقاح ترميز الفوسفاتيز الحمضي البروستاتي (PAP). استخدمنا قمع المارة من الاستجابة للتذكير مستضد لتحديد ما إذا كانت الأنشطة التنظيمية المحددة مستضد يجري أثارت ردا على التطعيم. وجدنا أن الخلايا التائية التنظيمية PAP محددة تنشأ بشكل عفوي في بعض مرضى سرطان البروستاتا، وتستمر خلال التحصين ومنع الكشف عن PAP محددة استجابات المستجيب بعد التحصين. في بعض المرضى حددنا PAP محددة تنظم الاستجابات تي خلية قبل التحصين. الخلايا التائية التنظيمية الموجودة من قبل محددة لPAP قد تترافق مع عدم القدرة على تطوير الاستجابات المناعية محددة مستضد TH1 من نوع بعد التطعيم. بدلا التنظيمية الاستجابات تي خلية موجودة مسبقا إلى PAP سوف يحدد المرضى الذين يحتمل أن تطوير استجابات المستجيب بعد التحصين متعددة. وفي كلتا الحالتين، وهذا الفحص يوفر ملاحظة هامة، لأنها قد تشير إلى وسيلة لتحديد أولويات أو استبعاد فرديالمرضى idual من المستضد محددة تقييم لقاح 17.
الشكل 1. أمثلة على الأنماط الرئيسية الثلاثة من تأخر نوع فرط الحساسية (DTH) وجدت في متلقي زرع الكلى. تم حقن المريض PBMCs في قطاع الطرق من CB17 الفئران SCID مع أي مستضد استدعاء (TT)، مستضدات المانحة أو مع كل من الجهات المانحة + مستضد التذكير. المعرض هو استجابة تورم صافي أكثر من الخلفية.
الشكل 2. . غير المباشرة طريق تحليل الخلايا T-المسجلين الموضوعات إلى خمس مجموعات: التوأم متطابقة، متسامح سريريا (تول)، وحيد الستيرويد(مونو)، كبت المناعة القياسية (SI) والرفض المزمن (CR) وقد تم التحقيق لاستجابات المستجيب T (A) والردود التنظيمية T (B) عن طريق فحص تلفزيون DTH. وتظهر النتائج الفردية من كل موضوع (الرموز الفردية) ومجموعة الوسيط (خط أفقي) مع الشرائح الربعية: كل اللوحات. وتظهر فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات؛ * P <0.05، ** P <0.01 و*** P <0.001؛ # P = 0.04، P = # # 0.03 # # # P = 0.008.
الشكل (3). قياس الكولاجين نوع V-المناعة الذاتية محددة من قبل مقايسة تلفزيون DTH. تلفزيون DTH ردود PBMCs تم الحصول عليها من ضوابط صحية طبيعية، متلقى الكلوي مع نظام تحديد المواقع أو متلقي زرع الرئة. كان جميع الفئات 3 الردود الإيجابية (≥ 25x10 بوصة -4 صافي تورم) أن نذكر مستضد، العقيد (I I)، والكولاجين fibrilar محددة لغضروف مفصلي، لم استثارة رد فعل تلفزيون DTH في المرضى أو ضوابط. قد متلقي زرع الكلى مع GPS مرتفعة يعني تورم الردود على العقيد (IV). لم متلقي زرع الرئة ليس الرد على العقيد (IV)، ولكن لم يستجيب إلى العقيد (V).
الشكل 4. استخدام مقايسة تلفزيون DTH لتقييم مناعي يسببها الورم. تم حقن PBMC من مرضى سرطان البروستاتا مع الفوسفاتيز الحمضي البروستاتي (PAP) وحده أو مع التذكير مستضد TT / DT وكعنصر تحكم مستضد البروستات محددة (PSA) تم حقن مع أو بدون أذكر مستضد TT / DT. حقن PAP + حددت TT / DT خلايا تنظيمية محددة مستضد PAP، كما شارك في إدارة PSA يست قادرة على قمع استجابة DTH إلى TT / DT مستضد التذكير.
= "jove_content" FO: المحافظة على together.within الصفحات = "دائما"> 
الشكل 5. تم إذابة استنساخ مقايسة تلفزيون DTH. الخلايا Cryopreserved الحصول كتبها فصادة الكريات البيض في 1/15/2007، وغسلها مع برنامج تلفزيوني، ويخلط مع برنامج تلفزيوني أو EBV أو P37-TE + EBV (الببتيد الذاتي) أو P37-MA + EBV (المانحة الببتيد) و حقنها في قطاع الطرق. تم اختبار خلايا في النقاط التالية: الوقت: 7/29/2008، 2/23/2010، 9/1/2011، 10/11/2011، 12/15/2011.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
وDTH مقايسة عبر الجسم الحي هو اختبار تشخيصي الرواية مع التطبيق السريري المحتملة في تقييم الاستجابات الخلية بوساطة في زرع والسرطان ومرضى المناعة الذاتية. ومن المفيد لأنه مفيد ليس فقط في رصد استدعاء استجابات المستجيب T، ولكن أيضا فإنه يمكن الكشف عن استجابات التنظيمية T. وهناك طريقة يمكن الاعتماد عليها للكشف عن تنظيم DTH الإنسان قد توقع سلامة انسحاب كبت المناعة في المرضى الذين هم المرشحين للحيد أو التسامح المحاكمات.
على تلفزيون DTH حساس جدا للكشف عن مسار غير مباشر من allorecognition من MHC. ومع ذلك TV-DTH يمكن تعديلها لكشف alloresponse المباشر ضد جزيئات MHC سليمة المانحة. للكشف عن الجهات المانحة قمع المستضد المرتبط من البيوت، وخلايا EBV LCL-معربا عن احد المانحين HLA الصف الأول أو الصف الثاني يمكن coinjected مع PBMC المريض. عندما استخدمت EBV LCL-كمصدر للمستضد في مقايسة DTH، كانت خلايا غاما المشع مع 10،000 راد، وكانت تشارك 200،000 الخلاياحقنوا PBMC في قاطع الطريق من الفئران SCID.
أثناء تطوير تلفزيون DTH نجد أن العديد من الشروط يمكن أن تؤثر على هذا الاختبار. أهم واحد هو شرط للكشف عن قمع المارة. قدمنا دليلا على أن من أجل الكشف عن تثبيط من البيوت نذكر ردا على المشارك المترجمة مستضد المانحة، كل من موقع التحدي وأهلية مناعية من المضيف بالتبني الماوس هي العوامل الحاسمة الحد من حساسية الاختبار تلفزيون DTH. PBMC من متلقى متسامح بوساطة قمع المارة فقط عندما تم حقن PBMC في قطاع الطرق، وليس آذان، وفقط في العوز المناعي، والفئران لا مناعيا 3.
مثل جميع المقايسات اختبار تلفزيون DTH لديه القوة ونقاط الضعف. تشمل مزايا هائلة للمقايسة تلفزيون DTH ما يلي: 1) حساس جدا ويمكن الكشف بشكل موثوق الخلايا التائية التنظيمية الإنسان، 2) يكشف خلايا T التنظيمية من وظيفتها وليس من قبل رالنمط الظاهري ريث، 3) أن يكتشف كلا ال-1 والردود المستجيب ال 17 4) الخلية لست الخام يمكن أن تستخدم لكشف التنظيم دون توعية المرضى للمستضد المانحة 5) ويعرض هذا الاختبار استنساخ عالية / الاستقرار (الشكل 5). مساوئ هي: 1) أنه يتطلب عددا كبيرا نسبيا من PBMC في الحقن؛ 2) يتطلب تقنية تدريب واسع النطاق، لا سيما في مقايسة قمع المارة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
واضعو هذا المخطوط ليس لديهم تضارب المصالح في الكشف عنها.
Acknowledgments
فإن الكتاب أود أن أنوه مساهمات AM VanBuskirk في تطوير فهمنا للاستجابة DTH التنظيم في متلقى. وأيد هذا العمل منح المعاهد الوطنية للصحة PO1AI084853 وR01AI066219-06، والتي ترعاها الاتحاد الأوروبي دراسة واحدة.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ACD tube for blood collection | BD | 02-684-26 | |
| Lymphocyte Separation Medium | Cellgro | 25-072-CV | |
| Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline | Cellgro | 21-031-CM | Without calcium & magnesium |
| ACK Lysis Buffer | BioWhittaker | 10-548E | |
| TT/DT or EBV | Sanofi Pasteur Inc./ Meridian Life Science, Inc. | TT/DT 25 μg/injection EBV 8 μg/injection | |
| Protease inhibitor PMSF | Sigma-Aldrich | 78830 | |
| Eosine for cell count | Sigma-Aldrich | E-6003 | |
| Alloantigen | Purified HLA antigens, synthetic allopeptides can be used instead of donor cell-free lysates | ||
| 50 ml sterile centrifuge tubes | Fisher Scientific | 06-443-18 | |
| 10 ml pipettes and pipettor | BD Falcon | 13-675-20 | |
| 2 ml safe-lock tubes | Costar | 3213 | |
| 1000 μl, 100 μl , 10 μl pipettes with sterile tips | |||
| Hemocytometer | Fisher | 02-671-10 | |
| Full size centrifuge and microfuge | Beckman Coulter/Eppendorf | ||
| 1/2cc or 1cc insulin syringes | Becton Dickinson | 14-826-79 | 28 gauge |
| Vibracell sonicator | Divtech Equipment Co. Sonocs Materials Inc | 2 mm probe | |
| Dial thickness gauge | Mitutoyo, Japan | ||
| SCID mice | Harlan | ||
| Isoflurane | Piramal Healthcare | Inhalant anesthesia |
References
- Carrodeguas, L., et al. Trans vivo analysis of human delayed-type hypersensitivity reactivity. Hum. Immunol. 60, 640-651 (1999).
- VanBuskirk, A. M., et al. Human allograft acceptance is associated with immune regulation. J. Clin. Invest. 106, 145-155 (2000).
- Burlingham, W. J., Jankowska-Gan, E. Mouse strain and injection site are crucial for detecting linked suppression in transplant recipients by trans-vivo DTH assay. Am. J. Transplant. 7, 466-470 (2007).
- Burlingham, W. J., et al. Loss of tolerance to a maternal kidney transplant is selective for HLA class II: Evidence from trans-vivo DTH and alloantibody analysis. Human Immunology. 61, 1395-1402 (2000).
- Geissler, F., et al. Human liver allograft acceptance and the 'tolerance assay': In vitro anti-donor T cell assays show hyporeactivity to donor cells but, unlike DTH, fail to detect linked suppression. Transplantation. 72, 571-580 (2001).
- Jankowska-Gan, E., et al. Human liver allograft acceptance and the 'tolerance assay'. II. donor HLA-A, -B but not DR antigens are able to trigger regulation of DTH. Hum. Immunol. 63, 862 (2002).
- Minor H Antigen HA-1-specific Regulator and Effector CD8+ T Cells, and HA-1 Microchimerism, in Allograft Tolerance. J. Exp. Med. Cai, J., et al. 199, 1017-1023 (2004).
- Rodriguez, D. S., et al. Immune regulation and graft survival in kidney transplant recipients are both enhanced by human leukocyte antigen matching. Am. J. Transplant. 4, 537-543 (2004).
- Xu, Q., et al. Human CD4+CD25low adaptive T regulatory cells suppress delayed-type hypersensitivity during transplant tolerance. J. Immunol. 178, 3983-3995 (2007).
- Derks, R. A., Jankowska-Gan, E., Xu, Q., Burlingham, W. J. Dendritic cell type determines the mechanism of bystander suppression by adaptive T regulatory cells specific for the minor antigen HA-1. J. Immunol. 179, 3443-3451 (2007).
- Jankowska-Gan, E., et al. Successful reduction of immunosuppression in older renal transplant recipients who exhibit donor-specific regulation. Transplantation. 88, 533-541 (2009).
- Jankowska-Gan, E., et al. Pretransplant immune regulation predicts allograft outcome: bidirectional regulation correlates with excellent renal transplant function in living-related donor-recipient pairs. Transplantation. 93, 283-290 (2012).
- Knechtle, S. J., et al. Early and limited use of tacrolimus to avoid rejection in an alemtuzumab and sirolimus regimen for kidney transplantation: clinical results and immune monitoring. Am. J. Transplant. 9, 1087-1098 (2009).
- Haynes, L. D., et al. Donor-specific indirect pathway analysis reveals a B-cell-independent signature which reflects outcomes in kidney transplant recipients. Am. J. Transplant. 12, 640-648 (2012).
- Burlingham, W. J., et al. IL-17-dependent cellular immunity to collagen type V predisposes to obliterative bronchiolitis in human lung transplants. J. Clin. Invest. 117, 3498-3506 (2007).
- Bobadilla, J. L., et al. TH-17, Monokines, Collagen Type V, and Primary Graft Dysfunction in Lung Transplantation. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 177 (6), (2008).
- Olson, B. M., et al. Human prostate tumor antigen-specific CD8+ regulatory T cells are inhibited by CTLA-4 or IL-35 blockade. J. Immunol. 189, 5590-5601 (2012).
