Summary
Nós descrevemos o design do dispositivo "quick-linker" para o transplante de fígado de rato ortotópico mais fácil.
Abstract
Transplante ortotópico de fígado de rato é um modelo popular, que tem sido mostrado em trabalho JOVE recente com o uso do dispositivo de "quick-ligante". Esta técnica permite venoso mais fácil do manguito-anatomoses depois de uma curva de aprendizado razoável. O dispositivo é composto de duas alças, que são esculpidos a partir de lâminas de bisturi, um aproximador, que é obtido através da modificação de uma pinça Kocher, e punhos projetados a partir de tubos de polietileno fino calibre. Todo o processo pode ser realizado a uma utilização de material de laboratório comuns de baixo custo. O presente relatório fornece um protocolo passo-a-passo para o desenho das peças necessárias e inclui matrizes.
Introduction
A técnica de transplante de fígado de rato ortotópico tem sido demonstrado em um recente Journal of Experiments visualizadas papel 1. Veia porta e infra-hepático da veia cava anastomoses foram realizadas utilizando a técnica cuff assistida rápida vinculador. Esta técnica foi escolhida entre outras revisões da técnica do Kamada originais 2-4, pois permite anastomoses mais fácil e rápido, resulta em uma melhor hemodinâmica, e pode ser implementado com uma curva de aprendizado menor 1,5.
A técnica rápida de ligante exige a utilização de um cabo, um aproximador e punhos, todos os quais podem ser concebidos a partir de material comum de laboratório de acordo com a técnica descrita no presente relatório.
Protocol
1. Handle: Projeto e modelagem
- Proteger um Nr 10 carbono lâmina de bisturi em uma placa de madeira com uma fita.
- Marcar o centro do anel sob o microscópio. Ele deve estar localizado 1,2 centímetros em linha reta a partir do bosque da lâmina de bisturi.
- Perfurar um furo de 2 mm, com uma ponta de diamante esférica, montada sobre uma broca de alta velocidade.
- Alargar o buraco com fusiforme ou brocas de diamante cônicas. O diâmetro final varia de acordo com o peso do rato como se mostra na Tabela 1.
- Desenhar a forma de manivela com um marcador permanente. Figuras 1 e 2 podem ser usados como matrizes.
- Converter a broca para um mini-triturador de bancada e remover a parte da pá do lado de fora da forma.
- Termine a peça com uma velocidade baixa escova rotativa.
2. Aproximador: Projeto e modelagem
- O aproximador é obtido através da modificação de reta Klemmer cirúrgico ou pinça de Kochers.
- Cortar a metade de um ramo sob o microscópio utilizando o mini banco moinho de alta velocidade.
- Faça sulcos simétricos em ambos os lados para permitir a alça para deslizar completamente.
- Cortar uma fenda longitudinal no braço longo e verificar que o centro do braço longo e um punho posicionado são bem num mesmo eixo.
- Desenhar um entalhe no braço longo voltada para o centro da pega.
- Faça o ramo o mais fino possível e completam a peça com a baixa velocidade da escova rotativa.
3. Algemas: Projeto e modelagem
- Pinças Cuff variar de acordo com o peso dos ratos e estirpe. Por outro lado, o seu comprimento deve ser mantido de cerca de 4 mm.
- Leve tubo de polietileno fina e arredondar uma aresta com um bisturi n º 10.
- Projete um bosque 0,5 milímetros a partir da borda, e cuidadosamente cortar uma encosta indo para o bosque.
- Cortar um ou dois cortes de espessura total na tubulação. Estes serãoajudar a manipular o cuff durante o preparo dos enxertos e transplantes.
- Corte o manguito a 4 mm da sua borda.
Representative Results
Cinco kits, incluindo cinco aproximadores e 11 alças foram fabricados. Um punho quebrou durante a final escovação. Este problema deve-se ao fato de que o anel do cabo era muito estreita, e tem sido resolvido através da criação da parte mais estreita do anel identificador de 0,5 mm. Sem problemas ocorreram durante a formação dos aproximadores.
| Peso Rat (g) | Porta pega (diâmetro interno) (mm) | Porta cuff (diâmetro exterior) (mm) | IVC pega (diâmetro interno) (mm) | IVC cuff (diâmetro exterior) (mm) |
| 120-180 | 2.2 | 1.7 | 2.6 | 2.08 |
| 180-270 | 2.6 | 2.08 | 3,4-3,7 | 3,0-3,25 |
| > 270 | 2.9 | 2,42 | 4.2 | 3,7 |
Tabela 1.
Figura 1. Porta alça stencil. Se impresso com uma escala de 1:01 pode ser usado para orientar a alça modelagem. Clique aqui para ver a figura maior .
Figura 2. IVC alça stencil. Se impresso com uma escala de 1:01 pode ser usado para orientar a alça modelagem. Clique aqui para ver a figura maior .
Figura 3. Porta v.porta e VCI punhos vista lateral. Do enxerto deve ser fixo à ranhura central, enquanto que o vaso de recipiente para a lateral. Esse expediente permite melhor contato intima-a-íntima.
Figura 4. Porta e IVC algemas vista frontal. Pinças adequadas para ratos pesando 180-270 g estão representados.
Discussion
O presente relatório descreve o projeto e construção do sistema de quick-vinculador para facilitar o transplante de fígado de rato.
Transplante de fígado de rato é um modelo popular com 125-180 papéis relacionados publicados anualmente desde o início de 1990 ( www.pubmed.com ). Ela permite uma vasta gama de ensaios, incluindo a exploração de questões de preservação imunológicos e de enxerto. O uso do kit "quick-linker" permite anastomoses mais fácil e rápido com garantia contato intima-a-íntima. Uma descrição detalhada e uma discussão das etapas técnicas de um transplante de fígado de rato foram descritos anteriormente 1.
O kit rápido vinculador pode ser construído a baixo preço a partir de material de laboratório comum. O principal desafio encontrado tem sido relacionada com a ruptura de uma pega durante a última escovagem, e que o problema foi resolvido definindo o par mais reduzidat de o anel pega a 0,5 mm (Figuras 1 e 2 mostram os tamanhos apropriados). No que respeita à qualidade da lâmina, apenas de aço inoxidável deve ser considerada. Embora um pouco menos flexível em comparação com a média de lâminas de aço carbono, lâminas de aço inoxidável não desenvolvem ferrugem, permitindo um uso na vida das alças.
De notar que a concepção das pegas e golas actuais é o resultado de um processo, o que conduziu a que os tamanhos propostos, tendo em conta as anastomoses mais eficientes. Cuff diâmetros variam conforme os pesos de rato (Tabela 1). Variações mínimas poderão ser tolerada em termos de comprimento, com um comprimento usual de cerca de 4 mm (Figuras 3 e 4).
Quanto ao aproximador, pinça do Kocher selecionado deve ter pegas pelo menos 4 cm do fulcro. Isto permite um fecho seguro da cremalheira fora abdómen do animal.
Em geral,o dispositivo proposto pode permitir a anastomose veia mais fáceis para o transplante de fígado e de outros tipos de enxertos em ratos.
Disclosures
Os autores não têm nada a revelar.
Acknowledgments
O estudo foi financiado pela Fundação Artères, a Astellas Europe Foundation e da Fundação Boninchi. CT foi apoiado pela Swiss National Science Foundation (SCORE concessão 3.232.230-126.233).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Porta cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1729 800/100/420 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| IVC cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1733 800/100/540 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| Mini-drill | Dremel | 100 series | 35,000 rpm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7103 | 2 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7105 | 4.4 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7144 | 2.4 mm dremel.com |
| Cut-off wheels | Dremel | 420 | dia: 23.8 mm thickness: 0.5 mm dremel.com |
| Quick-linker handles | dltchiropody (DLT) | PAR 10 | modified scalpel blades dltchriopdy |
| Quick-linker approximator | pharmap | UD-04-275 | modified Kocher's forceps pharmap.ch |
References
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic Liver Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (65), e4143 (2012).
- Hori, T., et al. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120 (2010).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47 (1979).
- Oldani, G., et al. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
