Chronische Augenhypertension induziert wird mittels Laserkoagulation der Trabekelnetzwerk in Maus Augen. Der Augeninnendruck (IOP) wird für mehrere Monate nach der Laser-Behandlung erhöht. Die Abnahme der Sehschärfe und Kontrastempfindlichkeit von Versuchstieren werden anhand des optomotor Test.
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Methodenartikel
Ein Laser-induzierten Maus-Modell der chronischen Ocular Hypertension zu Sehfehler Charakterisierung
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Glaukom, häufig mit erhöhtem Augeninnendruck (IOP) verbunden sind, ist eine der führenden Ursachen für Erblindung. Wir versuchten, ein Maus-Modell von Augenhypertension die menschliche High-Tension Glaukom imitieren zu etablieren. Hier Laserbeleuchtung mit dem Hornhautrand, um die wässerige Abfluß photocoagulate, induzieren Engwinkel. Die Änderungen des IOP erfolgt über ein Rebound-Tonometer vor und nach der Laserbehandlung. Ein optomotor Verhaltens-Test wird verwendet, um die entsprechenden Änderungen in der visuellen Leistungsfähigkeit zu messen. Die repräsentatives Ergebnis von einer Maus, die nachhaltig IOP Erhebung nach der Laser-Beleuchtung entwickelt gezeigt. Eine verminderte Sehschärfe und Kontrastempfindlichkeit wird in diesem Augeninnendruck Maus beobachtet. Gemeinsam stellt unsere Studie einen wertvollen Modellsystem zur neuronalen Degeneration und die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen in glaukomatöse Mäusen zu untersuchen.
Protokoll
Verfahren
C57BL/6J-Mäusen (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) sind an der Northwestern University Animal Care Facility angehoben. Alle Tiere werden in Übereinstimmung mit den Protokollen von der Northwestern University Institutional Animal Care und Verwenden Ausschuss gestellt und den Leitlinien für die Verwendung von Tieren in Neuroscience Forschung vom NIH genehmigt werden.
1. Laserphotokoagulation
Das Verfahren der Laserkoagulation von zuvor veröffentlichten Protokollen 5-7 modifiziert.
- Anesthetize eine 40-60 Tage alten Maus durch eine intraperitoneale Injekt....
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Ergebnisse
Wie in den Verfahren beschrieben, ist die Laser-Beleuchtung an der Trabekelnetzwerk im Limbus Region, um die Kammerwasserabfluss photocoagulate Ziel, Induktion Winkel Verschluss (Abbildung 1). Die meisten gelaserten Augen zeigten keine erheblichen Sachbeschädigungen, Pigment Ablösung oder Infektion, im Einklang mit früheren Befunden 6. Wenn eine kleine Gruppe von Mäusen (weniger als 5% aller gelaserten Tiere) körperliche Anzeichen von schweren Schäden wie entleert Augäpfel, schwere Katarakt, .......
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Diskussion
Wir berichten über diesem anhaltenden Augenhypertension können durch Laser-Beleuchtung in Mäuseaugen induziert werden. Im Vergleich zur Injektion von Kochsalzlösung Modell 18 und der Vene cautery Modell 11 beide umfangreichen mikrochirurgischen Fähigkeiten erfordern, ist die Laserbestrahlung relativ einfach und leicht durchzuführen. Normalerweise können wir den Laser-Beleuchtung für 4-6 Mäuse in 2-3 Stunden durchzuführen. Die kritischen Schritte aufrechterhalten IOP Höhe erreichen sind die vordere .......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.
Die Autoren sind Vollzeit-Mitarbeiter von der Northwestern University.
Die Autoren erhielten keine Mittel, die von Unternehmen, die Reagenzien und Instrumente in diesem Artikel verwendet produzieren bereitgestellt.
Danksagungen
Die Arbeit in diesem Papier enthaltenen Informationen wurden von der Dr. Douglas H. Johnson Award für Glaukomforschung vom American Health Assistance Foundation (XL), die William & Mary Greve Besondere Scholar Award von der Forschung zur Verhütung Blindheit (XL), unterstützt die Illinois Gesellschaft zur Verhütung von Blindheit (HC) und NIH R01EY019034 (XL).
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Reagenz | |||
| Moxifloxacin | Alcon Labs, Inc. | NDC 0065-4013-03 | 0,5 %, nur Rx |
| Proparacainhydrochlorid | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06 | 0,5 %, nur Rx |
| Ophthalmic Solution USP | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06,5 | %, nur Rx |
| Ketamin | Butler Schein Animal Health | NDC 11695-0550-1 | 100 mg / kg |
| Xylazin | LLOYD Inc. of Iowa | NADA 139-236 | 10 mg / kg |
| Atropinsulfat-Lösung | Alcon Labs, Inc. | NDC 61314-303-02 | 1 %, nur |
| Equipment | |||
| Spaltlampe, TOPCON | Visual Systems Inc | SL-3E | powered by PS-30A |
| OptoMotry 1.8.0 virtual | CerebralMechanics Inc. | ||
| optokinetisches Prüfsystem | CerebralMechanics Inc. | ||
| Tonometer, TonoLab, für Mäuse | Colonial Medical Supply | ||
| Heizkissen | Sunbeam Products Inc | 722-810 | |
| Argonlaser | Coherent Inc | Ultima 2000SE | |
| DECAPICONE Kunststoff-Kegelhalter | Braintree Sci Inc. | MDC-200 | für Maus |
Referenzen
- Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
- Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
- McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W.
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Nachdrucke und Genehmigungen
