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Article de méthode

Non invasive Intratrachéal intubation pour étudier la pathologie et la physiologie des souris poumon

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DOI :

10.3791/50601

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8 novembre 2013

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Dans cet article

Résumé

L'utilisation d'un modèle qui reproduit l'état de maladies pulmonaires chez les humains est essentielle pour l'étude de la pathophysiologie et / ou de l'étiologie d'une maladie particulière et pour développer une intervention thérapeutique. Voici une méthode d'intubation trachéale non invasive qui peut directement livrer les matériaux exogènes aux poumons de souris est présentée.

Résumé

L'utilisation d'un modèle qui reproduit l'état de maladies pulmonaires chez les humains est essentielle pour l'étude de la pathophysiologie et / ou de l'étiologie d'une maladie particulière et pour développer une intervention thérapeutique. Avec la disponibilité croissante de knock-out et transgéniques dérivés, avec une grande quantité d'information génétique, les souris offrent l'un des meilleurs modèles pour étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la pathologie et la physiologie des maladies pulmonaires. Inhalation, l'instillation intranasale, instillation intratrachéale, et l'intubation trachéale sont les techniques les plus couramment utilisées par un certain nombre de chercheurs pour administrer des matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Il ya des avantages et des inconvénients de chaque technique en fonction des objectifs de l'étude. Voici une méthode d'intubation trachéale non invasive qui peut directement livrer les matériaux exogènes aux poumons de souris est présentée. Cette technique a été appliquée à administrer de la bléomycine poumons de souris en tant que modèle pour l'étude de la fibrose pulmonaire. </ P>

Introduction

Poumon est un organe où de nombreuses maladies dévastatrices sont généralement diagnostiqués. Parmi eux, le cancer du poumon est le deuxième cancer le plus diagnostiqué chez les hommes et les femmes, et la cause la plus fréquente de décès par cancer. Maladie pulmonaire obstructive chronique, également connu sous l'emphysème et la bronchite chronique, une maladie très grave et la troisième cause de décès aux Etats-Unis. En 2011, il a été estimé que 25,9 millions d'Américains avaient l'asthme, y compris 7,1 millions d'enfants de moins de 18 ans. L'asthme est la troisième cause d'hospitalisation chez les enfants de moins de 15 ans (American Lung ....

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Protocole

Le protocole suivant décrit une méthode non invasive, simple et rapide pour livrer les matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Cette procédure a été approuvée par le Comité de protection et d'utilisation des animaux par l'Institut national du cancer.

Une. Anesthésie

  1. Tout d'abord, anesthésier la souris en utilisant un mélange de kétamine et de xylazine (100 mg / kg de poids corporel et 10 mg / kg de poids corporel, respectivement). C'est le ACUC recommandé l'anesthésie et de la dose. Avec ce montant, les souris sont inconscientes au moins pour ~ 20 min.
  2. Appliquer vétérinaire pommade pour....

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Résultats

Initialement, solution vert-teinte a été utilisé pour intuber les souris pour la pratique. Le poumon a été réséquée immédiatement après l'intubation pour examiner le degré d'uniformité de la couleur a été distribué dans les poumons (Figure 2). Cette technique a été appliquée à l'étude de la fibrose pulmonaire induite par la bléomycine en utilisant souris C57BL / 6. Lorsque les souris ont été intubés par voie intratrachéale avec 1,2 U / kg de bléomycine ou de solution saline en tant que témoi.......

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Discussion

Intubation intratrachéale décrit ici est une méthode non invasive simple, mais excellente pour fournir uniformément des matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Cette méthode permet l'étude de l'effet et / ou le rôle de la substance administrée sur la physiologie et / ou pathologie de cancer du poumon. Les matériaux administrés peuvent être des molécules endogènes tels que les cytokines, ou des matériaux exogènes tels que les produits chimiques xénobiotiques / médicaments, les substances cancérigènes,.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le Programme de recherche intra-muros de l'Institut national du cancer, Centre de recherche sur le cancer.

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
KetaVedVedcoKétamine
AnaSed Injection 20 mgLLOYDXylazine
BioLite StandBraintree ScientificRIS100Pour souris
Système d’éclairage d’intubation BioLiteBraintree ScientificBIO MI-KITPour souris
22 G, 1 pouce cathéter i.v.TerumoSR-OX2225CAPour souris dessous 30 g. Le cathéter n’est utilisé que dans le cas où le système d’éclairage par intubation n’est pas utilisé.
20 g, cathéter intraveineux de 1 pouceTerumoSR-OX2025CAPour souris sur 30 g. Le cathéter n’est utilisé que dans le cas où le système d’éclairage par intubation n’est pas utilisé.

Références

  1. Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. A simple method of mouse lung intubation. J. Vis. Exp. (73), e50318(2013).
  2. Miller, M. A., et al. Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis....

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Réimpressions et autorisations

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