Функция взрослых, родившихся нейронов млекопитающих остается активной областью исследования. Ионизирующее излучение подавляет рождение новых нейронов. Использование компьютерной томографии наведением фокусное облучение (CFIR), трехмерные анатомические нападения на конкретных нейронных популяций предшественников теперь могут быть использованы для оценки функциональной роли взрослого нейрогенеза.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Функциональная Допрос взрослых гипоталамуса нейрогенеза с Focal радиологической ингибирования
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Функциональная характеристика взрослых, родившихся нейронов остается сложной задачей. Подходы к ингибирует нейрогенез через инвазивной вирусной поставки или трансгенных животных имеют потенциальные путает, которые делают интерпретацию результатов этих исследований трудно. Новые радиологические инструменты появляются, однако, что позволяют неинвазивно исследовать функцию отдельных групп взрослых, родившихся нейронов через точной и достоверной анатомической адресности в мелких животных. Фокусное ионизирующего излучения подавляет рождение и дифференцировку новых нейронов, и позволяет адресности конкретных регионах нейронных предшественников. Для того, чтобы осветить потенциальное функциональную роль, что взрослые гипоталамо нейрогенез играет в регуляции физиологических процессов, мы разработали неинвазивный фокусное технику облучения они избирательно ингибируют рождение взрослых, родившихся нейронов в гипоталамо срединного возвышения. Мы опишем метод для C omputer томография наведениеме Ocal ИК-излучения (CFIR) доставка для точного и точную анатомическую ориентации у мелких животных. CFIR использует трехмерную объемную руководство изображения для локализации и адресности дозы облучения, минимизирует радиационного облучения nontargeted областях мозга, и позволяет конформной распределения дозы с границами острыми пучка. Этот протокол позволяет задать вопросы относительно функции взрослых, родившихся нейронов, но и открывает области на вопросы в областях радиобиологии, биологии опухоли, и иммунологии. Эти радиологические инструменты будут содействовать переводу открытий на скамейке к постели.
Введение
Недавние открытия показали, что мозг взрослого человека млекопитающих может пройти значительную степень пластичности. Нейроны взрослых, родившихся генерируются в течение взрослой жизни в специализированных нишах мозге млекопитающих 1. Что такое функция этих взрослых, родившихся нейронов? И тем более, они играют важную роль в физиологии и поведения? Исследования на эту тему традиционно сосредоточены на субвентрикулярной зоне боковых желудочков и под зернистым зоне гиппокампа, однако недавние исследования характеризуется нейрогенез в других регионах мозга, таких как гипоталамус млекопитающих 2. Нейрогенез сообщалось в послеродовом и взрослых гипот....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Животное Статистика
Получить одобрение от институциональной уходу и использованию животных комитета по протоколам стандарта уход и использование. Ток был разработан протокол для облучения координационных исследований по 5.5-10 недельных взрослых C57BL6 / J мышей, как описано ранее (рис. 2) 2. Однако другие возрасты и мелкие виды животных (крысы, хомяки, суслики и др.) также могут быть использованы, при условии, что эффективные протоколы анестезии и рентгенологические ссылки атлас, позволяющие идентифицировать области интереса (ROI) доступны.
1. Калибровка КТ-управляемой радиацио....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Оценка КТ наведением Таргетинг и точность
Механическое калибровка системы является критическим для обеспечения того, чтобы лучи от различных углов все пересекаются в одной точке. Калибровка была выполнена с полуавтоматической метода визуализации на основе, где точность выравнивание конца в конец была измерена быть 0,2 мм 29. Такая точность весьма критически, как объем гипоталамо средней структуры возвышения мало 2. Чтобы проверить эту калибровку, мы измерили распределение .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
КТ наведением фокусное облучение (CFIR) является новым и полным системный подход способен обеспечить поля излучения на цели в небольших животных при роботизированной контроля с использованием CT-руководство 32. Возможность CFIR доставить высоко сфокусированные пучки малого животных моделях предоставляет новые возможности исследования для преодоления лабораторные исследования и клинические перевод. Эта статья описывает подход CFIR для точной подачи излучения специально нацелены на гипоталамо нейронной населени.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
JW имеет финансирования научных исследований и консультационных соглашения с Xstrahl, Inc
Благодарности
Мы благодарим С. Montojo, J. Рейес, М. Armour для технических консультаций и помощи. Эта работа была поддержана американского Национального института здравоохранения гранта F31 NS063550 (до DAL), премию Василия О'Коннор Стартер Scholar и дотаций из Klingenstein фонда и NARSAD (в SB). СО является Кека Заслуженный молодой ученый в медицинских исследований.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Исследовательская платформа SARRP | Xstrahl | RS225A | http://www.xstrahl.com/xstrahlrs225.htm |
| SARRP бункер для облучения | Xstrahl | Опционально, но радиационное облучение должно быть ограничено с помощью альтернативного свинцового экранирования | |
| GAF хромовая пленка | IPS | GAFchromic ETB2 | |
| Мышиный фантом | Gammex | 457 | Приобретите 0,5 см х 30 см х 30 см твердых водяных плит от Gammex и нарежьте до нужного размера. |
| Мышиное антитело к фосфо-гистону H2AX Ser139 | Millipore, Inc. | 05-636 | клон JBW301 |
| Диета для грызунов с высоким содержанием жиров | Диеты | D12492i | 60% калорий в виде жира, пища должна быть облучена |
| Изофлуран | Baxter Healthcare Corporation | 10019-360-40 | |
| 0,01 M Цитрат натрия | Fisher Scientific | 1,471 г цитрата натрия, растворенного в 500 мл деионизированной воды | |
| Superfrost Plus слайды | Fisher Scientific | 12-550-15 | |
| DAPI | Fisher Scientific | Противоядерный противопятнистый | |
| материал | Предпочтительнее Fisher Scientific | Vectashield или Gelvatol |
Ссылки
- Ming, G. L., Song, H. Adult neurogenesis in the mammalian brain: significant answers and significant questions. Neuron. 70, 687-702 (2011).
- Lee, D. A., et al. Tanycytes of the hypothalamic median eminence form a diet-responsive neurogenic....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
