Évaluation de la régénération vasculaire dans le SNC Utilisation de la rétine de souris

Résumé

La rétine de rongeur a depuis longtemps été reconnue comme une fenêtre accessible au cerveau. Dans ce document technique que nous fournissons un protocole qui utilise le modèle de souris de la rétinopathie induite par l'oxygène d'étudier les mécanismes qui conduisent à l'échec de la régénération vasculaire dans le système nerveux central après lésion ischémique. Le système décrit peut également être mise à profit pour explorer des stratégies pour favoriser la repousse des vaisseaux sanguins fonctionnels au sein de la rétine et du système nerveux central.

Résumé

La rétine de rongeurs est peut-être le système de mammifère la plus accessible qui pour enquêter interaction neurovasculaire dans le système nerveux central (SNC). Il est de plus en plus reconnu que plusieurs maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, la sclérose en plaques, sclérose en plaques et éléments présents latérale amyotrophique de compromis vasculaire. En outre, les causes les plus importantes de cécité chez les populations pédiatriques et en âge de travailler (rétinopathie du prématuré et de la rétinopathie diabétique, respectivement) sont caractérisées par une dégénérescence vasculaire et l'échec de la repousse vasculaire physiologique. Le but de ce document technique est de fournir un protocole détaillé pour étudier la régénération du SNC vasculaire dans la rétine. Le procédé peut être utilisé pour élucider les mécanismes moléculaires qui conduisent à une défaillance de la croissance vasculaire après une lésion ischémique. En outre, les modalités thérapeutiques potentiels pour accélérer et restaurer plexus vasculaires sains peuvent être explorées. Les résultats obtained en utilisant l'approche décrite peut fournir des pistes thérapeutiques pour les rétinopathies ischémiques telles que celle du diabète ou de prématurité et de bénéficier éventuellement d'autres troubles vasculaires du SNC.

Introduction

Tout au long de développement du système nerveux central, des nerfs, des cellules immunitaires et des vaisseaux sanguins établir des réseaux remarquablement couplés pour assurer une perfusion tissulaire suffisante et permettre la transmission de l'information sensorielle ^5.1. La ventilation des résultats des systèmes vasculaires de l'oxygénation insuffisante des tissus et de l'offre de compromis métabolique et est de plus en plus reconnu comme un facteur important dans la pathogenèse des maladies neurodégénératives ^6. Abandon vasculaire et la détérioration de l'unité neurovasculaire dans le cerveau, par exemple, est associé à la ....

Protocole

Déclaration éthique: Tout l'expérimentation animale est conforme aux directives de protection des animaux établies par l'Association pour la recherche en vision et en ophtalmologie (ARVO) Déclaration pour l'utilisation d'animaux dans ophtalmique et Vision Research et le Conseil canadien de protection des animaux.

1. Oxygène induit la rétinopathie (OIR)

1. Enregistrer la date de naissance de souriceaux que P0.
2. Enregistrer tous les poids des animaux lors de l'entrée en O ₂ pour assurer une gamme de poids adéquat. Remarque: Pour C57BL / 6 à P17, le poids corporel doit être com....

Résultats

Le modèle de ROC est largement utilisée pour étudier la dégénérescence vasculaire induite par l'oxygène et l'ischémie induite par la néovascularisation pathologique dans la rétine et a joué un rôle dans le développement de traitements anti-angiogéniques actuellement utilisés pour les maladies oculaires ^{27, 29, 30.} Les résultats obtenus à l'aide de ce modèle peuvent être plus ou moins extrapolés à rétinopathies ischémiques telles que la rétinopathie diabétique proliférante et la rétinopathie du pré.......

Discussion

Quel est le moyen le plus efficace pour stimuler la croissance de nouveaux vaisseaux sains dans les tissus nerveux ischémique? Est-il thérapeutique valable pour intervenir et accélérer naturels repousse vasculaire? Dans les pathologies neuro-ischémiques telles que les rétinopathies ischémiques ou accident vasculaire cérébral, la dégénérescence vasculaire est associée à la fonction neuronale réduite ^35-38. Par conséquent, pour contrer blessure précoce, rétablir la micro-circulation régionale durant le segment .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
souris C57Bl/6 (d’autres souches peuvent être utilisées ; la réponse angiogénique varie d’une souche à l’autre)
CD1 mères allaitantes	Fournisseur de choix
Ciseaux d’opération droit	World Precision Instruments	14192
Ciseaux de dissection droit	World Precision Instruments	14393
Ciseaux Vannas Eye	Harvard Apparatus	72-8483
Pince à iris, courbée, dentelée	World Precision Instruments	15915
Brosses 362R taille 0	Dynasty
Dumont Forceps #3 ; droite	World Precision Instruments	500338
Lame chirurgicale, taille 10	Bard-Parker	371110
Rhodamine Griffonia (Bandeiraea) Simplicifolia Lectin I	Vector Laboratories, Inc	RL-1102
Lames de microscope	VWR	16004-368
Fluoromount G	Microscopie électronique Sciences	17984-25
Zeiss Axio Observer Z1 Microscope à phase inversée et à fluorescence	Zeiss
Leica MZ9.5 Stéréomicroscope	Leica
Fluorescéine isothicyanate-dextran, 70000	Sigma-Aldrich	46945