Method Article

一个经济实惠,易于构建斑马鱼设施建设

DOI:

10.3791/51989

November 22nd, 2014

In This Article

Summary

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适合繁殖和体内研究的斑马鱼设施以简单且经济的方式建造。维护是最低限度的。该设施非常适合学生参与和独立研究。

Abstract

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在体内的生物医学研究的关键是在体外成果转化为临床应用进展翻译。小型学术机构以有限的资源发现它几乎是不可能的建立和维护典型的啮齿动物的设施进行研究。斑马鱼的研究已经证明是用于体内研究的药理学,生理学,发展和遗传研究一个有价值的替代。本文演示了一个功能斑马鱼设施可以建在一个简单而实惠的方式。我们证明,这样的设施可以建在大约一个工作日以最小的工具和专业知识。本研究构建了27 1.8升鱼缸斑马鱼设施的成本约为1500美元。我们估计,维修的初始工作150鱼殖民地的3个月是1000美元。这涉及到项目的学生,谁被介绍给aquaculturing斑马鱼的研究提出。

Introduction

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体内模型是进行全面的生物医学研究,因为它们允许在体外研究的系统和有机体水平翻译是必不可少的。例如,对于小的哺乳动物,即啮齿动物,研究已经证明有必要在药物的开发和在可用药物的提高。然而,复杂性(财政和后勤),可能使其几乎不可能建立和维护设施的啮齿动物做实验,提出在小型研究的学术机构。然而, 在体内研究可以使用需要更少精细物流其它动物物种中进行。斑马鱼( 斑马鱼 )已经被成功地用作在体内模型来研究遗传学,发展,病理生理学,药理学和1,2,10,11,12。相比于r容纳斑马鱼进行实验所需的设施都比较简单和显著便宜odent设施。 Kim 等人 3已经详细描述了最近的80罐的斑马鱼壳体系统,它可以为约1500,其包括两个部分和劳动力成本来构建。此形成鲜明对比的是近8500美元将需要从任意数量的商业供应商购买一个现成的,80箱系统。然而,由Kim 等人给出的描述。可能是复杂和难以遵循鱼研究的新手。我们认为,斑马鱼设施可以简化的方式为1500美元的投资来构建。

体内设备的小型学术机构的建立提供了自己的才能,用以生产更强大,更深入的研究一个额外的工具, 在体内的结果支持在体外的数据通常会产生更全面的生物医学研究比仅采用体外方法获得的数据。因此,该实....

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Protocol

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注意:这些协议遵循长老会学院的IACUC的指导方针。

1.获取的材料列于表1。

2.装配5架镀铬根据制造商的说明。这将用于安置该基金。

3.构建储水器和过滤系统(图1A和2)。

  1. 使用图1A作为指导,布局18加仑桶,泵,过滤器和紫外线灯,以确定最后的安装位置和大小。
  2. 一旦零件摆出来,测量和切¾“PVC管组装所需的长度。根据特定的空间的需要和限制变化所有管道的长度。
  3. 组装管材和管件的使用PVC底漆和水泥奠定了前面,见下文(3.3.2和3.3.3)。
    1. 砂用砂纸管子的切割边缘,直到它们光滑的触感的ð没有碎屑。
    2. 素管子的接头的与所购买的聚氯乙烯底漆与来自聚氯乙烯底漆包含的拭子的内侧到外侧的和。
    3. 通过使用附带的拭子施加聚氯乙烯水泥管的外水泥的管材和管件在一起。重复需要PVC固井的所有步骤。
    4. 放置18加仑桶到搁板结构的一侧。
    5. 在储槽的侧面安装一个舱壁连接器。
    6. 附加¾“PVC管的舱壁上。
    7. 附加¾“管子用3/4泵入口”的另一端部螺纹使嵌合。
    8. 过滤器连接到使用两个90度弯头和¾“PVC管的泵。
      1. 为了在水中过滤掉的碎片和减少氯和化学水平使用一个纸....

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Results

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泵和Flters体系建设
一旦机架组装和设置的第一步是建立泵和过滤系统。该过滤器被连接到该系统的泵和位于上方的第一搁架,其允许容易过滤器维护和更换的底部水平。类似地,UV灯与PVC管的过滤器连接和代替用塑料丝的关系保持,以允许容易地更换紫外灯的需要( 图4A)。紧接纸过滤,活性碳过滤器,和UV灯通过PVC管安装在泵上。 Biobal​​ls被添加到罐中细菌的生长,从而有毒废物氨转化为硝酸盐提供表面。每加仑的水系统中的一个biobal​​l是足够的面积,以允许细菌生长。塑料容器的盖子可装配以便一旦溢出的biobal​​ls将保持在贮存和孔塔米纳的机会灰被最小化。即使溢出事件是非常不可能的,一个排水系统(增加一个管排在储存器的顶部)是可以向系统中的容易的加成。

主供电线路建设
第二步骤是组装的主要供水管线,将饲料每隔室将包含斑马鱼箱( 图4B)。这条线被连接到紫外灯用一块​​PVC管。这条线垂直和横向运行到通过PVC三通机架。三通管的底端被用来连接一块PVC管的,.......

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Discussion

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本文的主要目的是要证明的功能斑马鱼设施建设不复杂,并且可以通过新手鱼的研究人员以最小的结构的知识来构建。此外,这篇文章显示,对于这一功能的斑马鱼设施的材料可从当地的宠物用品商店或硬件商店容易,经济地获得。一旦所有的材料和工具已经获得了系统的建设和鱼缸大约需要1个工作日。在72小时的第一次运行可以在系统中的任何故障,例如泄漏或低水压,待确定。这第一次运行还允许在系统内的污染物被从循环中删除。例如,PVC胶水可包含将在第一几个小时循环的去除有害的有机材料。该系统具有主排水阀,允许和便于体积和水替代mainten调整 ANCE。此外,该系统具有压力缓解行也有利于水的压力的调整。当只有一个或两个隔室(货架)将被使用,因为它允许水压力的调节这条线是很有用的。

该工厂采用模块化设计允许的1,2或3车厢的利用率(对1.8升36鱼缸),以满足个别研究人员的能力需求。该开闭阀设置在每个隔室便于系统的不同部分的隔离。此阀门系统也是有用的,以避免潜在的感染传播,并便于系统的由车厢内的清洁。此外,每鱼缸供水有两个阀,一个在9端口冲洗和一个在所述柔性管在鱼箱的入口。这双阀系统允许的水压进行微调,.......

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Disclosures

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作者宣称对本文没有利益冲突。

Acknowledgements

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笔者想感谢药长老会学院派研究办公室本项目通过小药店奖研究与协作(SPARC)奖的资金支持。作者感谢约翰·Smink先生,水产动物研究​​实验室经理,克莱姆森大学,克莱姆森,SC为他的技术援助的手稿版本。

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
商品品牌数量
74英寸高 x 48英寸宽 x 18英寸深 5层钢制独立式货架单元风格选择1
18加仑通用桶/手提袋Centrex塑料:LLC 坚固的手提袋1
6插口电源板配15英尺电线电工大师1
9瓦紫外线水花园净化器过滤器和紫外线灯Smartpond 
全屋水替换过滤器而浦6
不透明全屋预过滤外壳惠而浦2
螺纹密封带William H Harvey1
8液体盎司低VOC PVC水泥油 
8 液量盎司 LO-VOC 底漆Oatey 
1/4英寸x 100英尺乙烯基滴灌分配管泥浆园艺师 
1/4英寸带刺滴灌开/关阀Mister Landscaper33
9端口NPT灌溉歧管带过滤器 Mister Landscaper6
带房屋的落地过滤器 惠而浦6
个 2 英寸直径 90 度 PVC 弯头LASCO3
个 2 英寸直径 90 度三通LASCO3
3/4 英寸直径 90 度滑动弯头LASCO15
3/4 英寸直径 PVC 适配器LASCO7
3/4 英寸直径 PVC 三通LASCO12
2 英寸直径 PVC 帽LASCO3
1英寸直径x 3/4英寸直径 PVC适配器LASCO2
3/4英寸PVC插座直列球阀美国阀门5
1/2英寸直径 x 3/4英寸直径 PVC适配器Lasco8
3/4英寸直径 PVC帽Lasco1
2英寸x 5英尺PVC管Charlotte管4
¾英寸 x 10英尺PVC管Charlotte Pipe3
11/16x1-7/80 PVC环SXT10
½”PVC 公适配器SXT1
¾”PVC 接头 SXT1
½”PVC 母适配器 SXT1
link
1.8 L 双 Beta 保持顶部鳍27
¾”PVC 男性适配器(带 #18 O 型环)SXT28
90 度 ¾”螺纹 PVC 弯头SXT27
细网N/A1 码
隔板连接器N/A1
钢锯N/A1
钻头N/A1
孔锯N/A1
活动扳手N/A1
钳子 N/A1
卷尺N/A1
安全眼镜N/A1
工作手套N/A1
个个1个惠个个111器

References

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  1. Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
  2. Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. <....

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