Die chronisch instrumentierten nicht-narkotisierten fetaler Schafsmodell wird verwendet, um die menschliche Entwicklung des Fötus in Gesundheit und Krankheit zu studieren, weil es chirurgische Platzierung und Wartung von Katheter und Elektroden, repetitive Blutentnahme, Substanz Injektion, Aufnahme der bioelektrischen Aktivität und in vivo-Bildgebung ermöglicht. Wir beschreiben die erforderlich ist, um dieses Modell zu etablieren Verfahren.
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Methodenartikel
Besetzung des Kurzfristige Fetal Schafe für Multivariate Chronische Non-narkotisierten Recordings
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Das chronisch instrumentierte trächtige Schaf wurde als Modell für die Entwicklung des menschlichen Fötus und die Reaktionen auf pathophysiologische Reize wie Endotoxine, Bakterien, Nabelschnurverschlüsse, Hypoxie und verschiedene pharmakologische Behandlungen verwendet. In diesem Modell wurden die lebensrettenden klinischen Praktiken der Glukokortikoid-Behandlung bei Frühgeburtsrisikofüßen und der therapeutischen Hypothermie entwickelt. Dies ist auf die einzigartige Zugänglichkeit des nicht anästhesierten fötalen Schafs für die chirurgische Platzierung und Wartung von Kathetern und Elektroden zurückzuführen, was eine wiederholte Blutentnahme, Substanzinjektion, Aufzeichnung der bioelektrischen Aktivität, Anwendung elektrischer Stimulation und In-vivo-Organbildgebung ermöglicht. Hier beschreiben wir das chirurgische Instrumentierungsverfahren, das erforderlich ist, um ein stabiles, chronisch instrumentiertes nicht-anästhesiertes fetales Schafmodell zu erreichen, einschließlich der Charakterisierung der postoperativen Erholung aus Sicht von Blutgasen, Stoffwechsel und Entzündungen.
Einleitung
Eine Vielzahl von Tiermodellen gibt es für die Untersuchung der normalen und kompromittiert Schwangerschaften, einschließlich Labornagern, nicht-menschlichen Primaten und Hauswiederkäuer. 1.2.3.4.5 Die chronisch instrumentierten trächtigen Schafen wurde ausgiebig seit 50 Jahren als verwendet ein Modell der menschlichen fötalen Entwicklung und antwortet pathophysiologische Stimuli, wie Lipopolysaccharid (LPS). 6-10 Die Läsionen nach der LPS-Exposition zu imitieren, was genau in Frühgeborenen mit Periventrikuläre Leukomalazie, was auf eine ähnliche Reifungsprofil beider Arten gesehen. 11, 12
Andere Komplikat....
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Protokoll
Tierpflege folgte den Richtlinien des Canadian Council on Animal Care und der Genehmigung durch die Université de Montréal Council on Animal Care (Protokoll # 10-Rech-1560). Detaillierte Informationen über Materialien und Methoden ist in der Tabelle 1 angegeben.
1. Anästhesie
- Legen Sie eine Single-Lumen-Katheter in eine Halsschlagader.
- Sedieren das Mutterschaf mit Acepromazin (Atravet 10 mg / ml) 2 mg intravenös etwa 30 min vor der Einleitung der Narkose, um Spannungen mit der Prozedur, die wiederum reduziert Cortisolspiegel zu reduzieren.
- Verabreichen Diazepam (Diazepam 5 mg / ml) 20 mg Ketamin (Ketalar 100....
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Ergebnisse
38 schwangere zeit vom Mutterschafe wurden bei 128 ± 2 Tagen der Trächtigkeit instrumentiert (DGA ~ 0,88 Trächtigkeit tige 145 DGA) mit arteriellen, venösen und Frucht Katheter und Elektrokardiogramm (EKG) Elektroden mit steriler Technik unter Vollnarkose (sowohl Mutterschaf und Fötus ). Im Falle einer Zwillingsschwangerschaft wurde der größere Fetus basierend auf Palpation und der Schätzung der intertemporalen Durchmesser gewählt wird; alternativ kann der Fötus instrumentiert werden nach dem Zufallsprinzip ausgewählt w.......
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Diskussion
Das Anästhetikum und chirurgischen Verfahren vorgestellt, das für die Herstellung eines Tiermodells zur Untersuchung der Physiologie und Pathophysiologie fötalen erforderlich sind: die chronisch mit Instrumenten nicht-narkotisierten fetalen Schafen.
Vier kritischen Schritte in dem Protokoll hervorzuheben. Erstens, vorbei an den Katheter und Elektroden durch das mütterliche Flanke: Es ist wichtig, dass dies sofort getan an inneren Organen Verletzungen zu vermeiden. Zweitens Befestigen des ute.......
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Offenlegungen
Es wurden keine Angaben gemacht.
Danksagungen
Autoren danken für die finanzielle Unterstützung durch die Molly Towell Perinatal Research Foundation, die Canadian Institutes of Health Research (CIHR) und den Fonds de Recherche du Québec – Santé (FRQS) (an MGF) und das CIHR-Quebec Training Network in Perinatal Research (QTNPR) (an LDD).
Die Autoren danken Esther Simard, Marco Bosa, Carl Bernard und Carmen Movila für ihre technische Unterstützung.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| ACE Lichtquelle | Schott-Fostec | A20500 | |
| Präparierschere | Fine Science Tools | 14060 - 11 | |
| Abgewinkelte Präparierschere | Fine Science Tools | 15006 - 09 | |
| Skalpellgriff | Fine Science Tools | 10003 - 12 | abwechselndes Präparierwerkzeug |
| Gebogene Skalpellklingen #12 | Fine Science Tools | 10012 - 00 | abwechselndes Präparierwerkzeug |
| Knochenschere | Fine Science Tools | 16044 - 10 | |
| S & T Nahtbindezange | Fine Science Tools | 00272 - 13 | |
| Dumont SS Pinzette - abgewinkelt | Fine Science Tools | 11203 - 25 | |
| Geflochtenes Seidennaht Größe 6-0 | Teleflex Medical | 07 - 30 - 10 | |
| Medical Tape | Transpore | 3M | |
| Ketaminhydrochlorid 100 mg/ml | Hospira | NDC 0409 - 2051 - 05 | Final Does is 80 mg/kg |
| Tranqui Ved Injection (Xylazin 100 mg/ml) | Vecdo | NDC 50989 - 234 - 11 | Final Does is 10 mg/kg |
| Reactive orange 14 | Sigma - Aldrich | R - 8254 | |
| Ringers Lösung Komponenten | Die Lösung ist gasausgeglichen mit 95 % O2 und 5 % Co2, endgültiger pH-Wert 7,4 | ||
| Natriumchlorid | Sigma - Aldrich | S7653 | Endkonzentration: 118 mM |
| Kaliumchlorid | Fisher Scientific | P217 - 3 | Endkonzentration: 4,7 mM |
| Calciumchlorid-Dihydrat | Fisher Scientific | C79 - 500 | Endkonzentration: 2,5 mM |
| Kaliumphosphat einbasisch | Fisher Scientific | P -285 | Endkonzentration: 1,2 mM |
| Magnesiumsulfat | J.T. Baker | Jan-00 | Endkonzentration: 0,57 mM |
| 4-(2-Hydroxyethyl)piperazin-1-ethansulfonsäure (HEPES) | Fisher Scientific | BP 310 - 500 | Endkonzentration: 5,95 g/L |
| Glukose | Sigma - Aldrich | G8270 | Endkonzentration: 5,5 mM |
| LifeWindow | Digicare Biomedical Technology | ||
| CED-Bioverstärker und ADC-Einheiten | Cambridge Electronic Design Limited, Unit 4, Science Park, Milton Road, Cambridge CB4 0FE ENGLAND. | Bioamp: 1902; ADC: micro1401; Datenerfassungssoftware: Spike 2, V7.13 | |
| Neurolog Analogsignal-Bioverstärker | Digitimer Ltd 37 Hydeway Welwyn Garden City Hertfordshire, AL7 3BE, England | NL108A | |
| ABL800Flex | Radiometer Kanada; 200 Aberdeen Dr, London, ON N5V 4N2 | ||
| Eppendorf 5804R | Eppendorf Kanada; 2810 Argentia Road, #2 Mississauga, Ontario, L5N 8L2 | ||
| Arrow Jugularkatheter-Set | Arrow International, Inc., 2400 Bernville Road, Reading, PA 19605 USA | ||
| Atravet | 10 mg/ml | ||
| Diazepam | 5 mg/ml | ||
| Ketamin Ketalar | 100 mg/ml | ||
| Propofol | 10 mg/ml | ||
| SurgiVeT | Endotrachealtuben; Smiths Medical ASD, Inc. St. Paul, MN 55112, USA | ||
| Cook Atemwegsaustauschkatheter mit RAPI-FIT-Adaptern | Cook Critical Care 750, Bloomington IN 47402-0489 USA | ||
| Dispomed Beatmungsgerät | Dispomed Ltd., 745 Nazaire-Laurin, Joliette, Quebec J6E 0L6 | ||
| BD Insyte-W | Becton Dickinson, Infusion Therapy Systems Inc., 9450 S State St, Sandy Utah 84070 USA | 22 bis 20 G; 1,1 x 30 mm [0,9 x 25 mm] bis 1,16 Zoll [1,16 Zoll] | |
| Edwards Lifesciences Ref: PX272 Drucküberwachungskit mit TruWave Einweg-Druck-LifeWindow | |||
| LW6000 | Digicare Biomedical Technology 107 Commerce Road, Boynton Beach, FL 33426-9365 USA | ||
| Gaymar | |||
| Babcock | |||
| Polyvinyl-Katheter | SCI (Scientific Commodities Inc.) | 2 Meter | |
| 2-0 Vicryl | |||
| Castroviejo Schere | |||
| Elektrokardiogramm (EKG) | LIFYY, Metrofunk Kabel-Union, Berlin, Deutschland | vier Kupferelektroden in einer Hülle, 2 | |
| Meter 2-O Vicryl | |||
| 3-0 Vicryl | |||
| PDS II USP | |||
| Trimethoprim Sulfadoxin | |||
| Ampicillin | |||
| Stopcock | Argon Medical, Cat 041220001A | Doppelter 4-Wege-Absperrhahn mit männlicher Luer-Lock-Nadel | |
| Tyco Healthcare 8881202389 | Monoject Aluminium-Nabe, stumpfe Nadeln, 22Gx, 0,7 mm x 38,1 mm: für fetale arterielle und venöse Katheter | ||
| Nadeln Tyco | Healthcare 8881202322 | Monoject Aluminium-Nabe, stumpfe Nadeln, 16Gx, 1,6 mm x 38,1 mm: für Amnionkatheter |
Referenzen
- Barry, J. S., Anthony, R. V. The pregnant sheep as a model for human pregnancy. Theriogenology. 69, 55-67 (2008).
- Morrison, J. L. Sheep models of intrauterine growth restriction: fetal adaptations and consequences. Clin Exp Pharmacol Physiol. 35<....
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Nachdrucke und Genehmigungen
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