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Behavior

तनाव प्रेरित व्यवहार और शारीरिक घाटे को समझना के लिए Subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव का एक माउस मॉडल

Published: November 24, 2015 doi: 10.3791/52973
Automatic Translation
1,2, 1,2,3
1College of Agriculture, Ibaraki University, 2Cooperation between Agriculture and Medical Science, Ibaraki University, 3United Graduate School of Agricultural Science, Tokyo University of Agriculture and Technology

Summary

इधर, subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव का एक माउस मॉडल को विकसित करने के लिए तरीके का वर्णन किया और hyperphagia- और बढ़ शरीर के वजन को निम्नलिखित अतिपिपासा जैसे लक्षण सहित अवसाद की रोगजनक सुविधाओं की जांच करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं।

Introduction

तनाव की घटनाओं से कई प्रकार के मनुष्य का जीवन भर होते हैं। अत्यधिक तनाव अक्सर मनुष्यों और पशुओं में हानिकारक शारीरिक परिणाम होता है। मनुष्यों में तनाव की घटनाओं के ऐसे अवसाद के रूप में 1 मानसिक विकारों precipitating के लिए प्रमुख जोखिम कारक हैं। रोग के अध्ययन के लिए एक वैश्विक बोझ अवसाद विकलांगता 2 के साथ रहते थे विकलांगता से समायोजित जीवन वर्ष (डेली) और साल के मामले में सबसे अक्षम बीमारियों में से एक है कि संकेत दिया। इसके अलावा, अवसाद आत्महत्या डेली 3 का सबसे बड़ा अनुपात के लिए खातों। अवसाद से पीड़ित लोगों को यह कठिन अपने जीवन का प्रबंधन करने के लिए मिल जाए, और एक परिणाम के रूप में, उनके जीवन की गुणवत्ता अक्सर बिगड़ जाती है। इसलिए, इन रोगियों में जीवन की गुणवत्ता में सुधार करने के लिए प्रभावी चिकित्सा विज्ञान को विकसित करने के लिए एक मजबूत की जरूरत नहीं है।

कई अध्ययनों से प्रमुख अवसादग्रस्तता विकारों पर प्रदर्शन किया गया है, और पता चला है कि रोग susceptibilit के लिए आनुवंशिक योगदानY छोटे प्रभाव 4 के कई स्थलों के प्रभाव से समझाया गया है, जो लगभग 30-40% है। क्योंकि अवसाद अंतर्निहित जटिल रोगजनक तंत्र के रोग के बारे में विस्तृत एटियलजि मायावी बनी हुई है। क्लीनिकल रिपोर्टों कम है और क्रमश: 6, शरीर के वजन में वृद्धि हुई है जो बताते हैं ऐसे उदास और atypical अवसाद के रूप में 5 अवसाद के उपप्रकार, देखते हैं कि संकेत मिलता है। 25-30% और अवसाद के साथ रोगियों के 15-30% शुद्ध उदास और असामान्य सुविधाओं का प्रतिनिधित्व हालांकि, क्रमशः, उनमें से ज्यादातर दोनों उपप्रकार 7 की मिश्रित फीचर हैं। इसलिए, प्रमुख अवसाद के लक्षणों की एक विस्तृत श्रृंखला है। बायोमार्कर खोजने के लिए और मनुष्यों में अवसाद के विभिन्न प्रकारों के लिए उद्देश्य चिकित्सा विज्ञान को विकसित करने के क्रम में, यह अवसाद 8 के कई अलग अलग पशु मॉडल स्थापित करने के लिए महत्वपूर्ण है।

अवसाद के पशु मॉडल सीखा सहित कई तरीकों का उपयोग कर स्थापित किया गया हैलाचारी, पुरानी अप्रत्याशित हल्के तनाव है, और पुरानी सामाजिक हार तनाव (सीएसडीएस) 9-12। टोयोडा और उनके सहयोगियों चयापचय और अवसाद के साथ जुड़े रहे हैं कि व्यवहार को स्पष्ट करने के क्रम में चूहों और चूहों 13-17 की सीएसडीएस मॉडल की स्थापना की। अवसाद के पशु मॉडल चेहरे वैधता 18 से मूल्यांकन कर रहे हैं कि यह देखते हुए, मॉडल की स्थापना की है, जो भीतर संदर्भ में महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, गोल्डन एट अल। 19 में विस्तार से सीएसडीएस चूहों बनाने के लिए तरीकों की सूचना दी। यह सीएसडीएस चूहों के सामाजिक व्यवहार में घाटे पुरानी उपचार से बरामद किया है, लेकिन नहीं antidepressants के साथ तीव्र उपचार, से, और वे मस्तिष्क व्युत्पन्न neurotrophic के विनियमन के मामले में अवसाद के साथ रोगियों में उन लोगों के लिए इसी तरह के लक्षण का हिस्सा है कि हो सकता है कि जाना जाता है कारक है 6।

गोटो एट अल। 13 पहले से तरीकों को संशोधित करके subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव (sCSDS) माउस मॉडल विकसितगोल्डन एट अल। 19 वर्ष की। sCSDS चूहों शरीर के वजन में लाभ और बढ़ शरीर पानी की मात्रा 13 निम्नलिखित polydipsia- और hyperphagia जैसे लक्षण दिखा। इस रिपोर्ट में, sCSDS माउस मॉडल की स्थापना के लिए प्रोटोकॉल प्रदान की जाती है और हम इस मॉडल की उपयोगिता पर चर्चा की।

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Protocol

जानवरों के अध्ययन ने मंजूरी दे दी है और पशु देखभाल और उपयोग इबाराकी विश्वविद्यालय की समिति और शिक्षा संस्कृति, खेल, विज्ञान मंत्रालय, और प्रौद्योगिकी (MEXT), जापान (अधिसूचना No.71) दोनों के दिशा निर्देशों से मुलाकात कर रहे थे। प्रोटोकॉल की एक पूरी सिंहावलोकन चित्र 1 में दिखाया गया है।

1. उपकरण

  1. पिंजरों के दो प्रकार तैयार करें: एक ही पिंजरे, और एक "सामाजिक हार (एसडी)" पिंजरे (चौड़ाई [डब्ल्यू] गहराई × [डी] ऊंचाई [एच] = 143 मिमी 148 मिमी × 293 मिमी × ×) (डब्ल्यू × डी × 135 मिमी × 320 मिमी) × एच = 220 मिमी।
  2. (: व्यास में 8 मिमी 3 × 5 मैट्रिक्स) चित्रा 2 में दिखाया गया है, 15 परिपत्र छेद के साथ एक एक्रिलिक पारदर्शी बोर्ड विभक्त (मोटी 5 मिमी) के साथ दो डिब्बों में एसडी पिंजरे विभाजित।
  3. सजाना पेड़, शुद्ध आहार खाना छर्रों, और एक पीने के पानी की बोतल से बना लकड़ी शेविंग चिप्स प्राप्त करते हैं। इसके अलावा, कागज तौलिये, एक मुखौटा है, और लेटेक्स दस्ताने प्राप्त करते हैं। सामाजिक संपर्क परीक्षण के लिए, (डब्ल्यू ग्रे polyvinylchloride से बना एक खुले मैदान क्षेत्र (डब्ल्यू × डी × एच = 40 सेमी × 40 सेमी × 40 सेमी), स्टील (190 ग्राम) से बना एक वजन, और एक प्लास्टिक की बातचीत बॉक्स तैयार × × एच डी = 10 सेमी × 10 सेमी × 13 सेमी, तीन तार-जाल खिड़कियां (डब्ल्यू × डी = 5 सेमी × 5 सेमी) (चित्रा 3) के साथ 100 ग्राम)।
  4. और जानवरों की सुविधा में व्यवहार परीक्षण के कमरे में एक स्वचालित ट्रैकिंग प्रणाली: एक सीसीडी कैमरा (; 1.4 1/3 इंच सीसीडी एफ = 1 2.8-12 मिमी) रखें। कम से कम 30 मिनट के लिए परीक्षण के कमरे के पर्यावरण के लिए चूहों अभ्यस्त करने के लिए व्यवहार परीक्षण के कमरे में माउस पिंजरों के लिए एक उपयुक्त शेल्फ रखें।

पर्यावरण के लिए 2. Habituation

  1. 5 महीने से अधिक पुराने हैं और एक पशु प्रजनन कंपनी से की सुविधा के लिए है कि उद्धार आईसीआर (आईसीआर) चूहों: 7 सप्ताह पुराना और पुरुष एसएलसी हैं कि पुरुष C57BL / 6JJmsSlc (बी -6) चूहों का प्रयोग करें।
  2. स्वतंत्र रूप से एन (बी -6 चूहों के दो समूहों के लिए कदम= की सुविधा के लिए प्रत्येक समूह में 12); आक्रामक आईसीआर चूहों और sCSDS मॉडल को विकसित करने के लिए एक और समूह (विषय बी -6 चूहों) स्क्रीनिंग के लिए एक समूह (screener बी -6 चूहों) का उपयोग करें।
  3. अपने आक्रामक व्यवहार स्क्रीन करने के क्रम में की सुविधा के लिए आईसीआर चूहों (एन = 12) परिचय दें।
  4. व्यक्तिगत रूप से एक 12 घंटे की प्रकाश अंधेरे चक्र के तहत एक सप्ताह के लिए एकल पिंजरों में सदन चूहों निरंतर (23 डिग्री सेल्सियस के आसपास) तापमान और नमी का स्तर (40% के आसपास) के साथ (100 लक्स फ्लोरोसेंट रोशनी के चारों ओर, 08:00 पर रोशनी) पर्यावरण के लिए उन्हें अभ्यस्त करने के लिए। चूहों पड़ोसी चूहों के व्यवहार से प्रभावित नहीं हैं, इसलिए है कि पिंजरों के बीच सफेद रंग का प्लास्टिक बोर्डों रखकर प्रत्येक पिंजरे विभाजन।
  5. शुद्ध आहार खाना छर्रों बनाओ और असमस पानी उपलब्ध यथेच्छ रिवर्स। अन्य गैर शुद्ध आहार छर्रों का तत्व भिन्न हो सकते हैं, क्योंकि ऐन-93g चाउ का प्रयोग करें।
  6. शरीर के वजन, भोजन का सेवन (इंटरनेट), और चूहों के पानी का सेवन (WI) में हर दिन उपाय। ख की गणनाप्रारंभिक दिन से ODY वजन बढ़ाने (बीडब्ल्यूजी)।

आक्रामक आईसीआर चूहे 3. स्क्रीनिंग

  1. (00: 00-17 14) दोपहर में, जैसा कि ऊपर उल्लेख 1 सप्ताह के लिए आदी होना के बाद, screener बी -6 चूहों (उम्र के 8 सप्ताह घुसपैठिए) के साथ एक 3 मिनट के परीक्षण के लिए निवासी-घुसपैठिए परीक्षण का उपयोग आईसीआर चूहों (निवासी) स्क्रीन आवास के कमरे में चारों ओर 300 लक्स की प्रकाश व्यवस्था के तहत।
    1. विशेष रूप से, आईसीआर चूहों घुसपैठियों की ओर उच्च आक्रामकता दिखाने के जो खोजने के लिए संभव के रूप में कई अलग अलग -6 चूहों की ओर लगातार 5 दिनों के लिए प्रति दिन तीन परीक्षणों (कुल 15 परीक्षण) के लिए प्रत्येक आईसीआर माउस का परीक्षण करें। परीक्षण के दौरान, आक्रामक व्यवहार के हमले विलंबता और अवधि (हमले काटने के साथ तेजी से गतियों) रिकॉर्ड है।
  2. प्रत्येक परीक्षण के बाद बी -6 घुसपैठिए चूहों पर क्षति घावों की जाँच करके अति-आक्रामक आईसीआर चूहों को पहचानें।
  3. हमले विलंबता आक्रामकता स्कोर के लिए पहली बार एक सूचकांक के रूप में कम से कम 30 सेकंड है जिसमें परीक्षणों के अनुपात की गणना।
  4. सीहमले विलंबता आक्रामकता स्कोर का एक दूसरा सूचकांक के रूप में कम से कम 3 मिनट है जिसमें परीक्षणों के अनुपात alculate।
  5. पहले सूचकांक से आक्रामकता के स्कोर का मूल्यांकन। पहले सूचकांक बराबर है जब दूसरा सूचकांक का प्रयोग करें।
  6. आक्रामक आईसीआर चूहों के रूप में अति-आक्रामक व्यवहार के बिना उच्च आक्रामकता स्कोर था कि आईसीआर चूहों का चयन करें। उम्र के लगभग 12 महीने तक के प्रयोगों के अगले सेट के दौरान बार-बार आक्रामक आईसीआर चूहों का उपयोग करें; आईसीआर चूहों की आक्रामकता पुष्टि करने के लिए हर प्रयोग से पहले ऊपर वर्णित के रूप में हालांकि, आक्रामक आईसीआर चूहों के लिए जांच प्रक्रिया प्रदर्शन करते हैं।
  7. स्क्रीनिंग के प्रत्येक सत्र के बाद, screener बी -6 चूहों की चोट की डिग्री रिकॉर्ड है। एक माउस घायल हो जाता है, तो एक भी पिंजरे में माउस को अलग-थलग करने और अपने शरीर के वजन, भोजन का सेवन, और पानी के सेवन की जाँच करके प्रगति का निरीक्षण। चूहों में शरीर विज्ञान और व्यवहार को प्रभावित करने वाले गंभीर घाव के मामले में स्थानीय मैं के अनुसार उन्हें euthanizeACUC दिशानिर्देश।

4. sCSDS

  1. 7 दिन (दिन -6) पर्यावरण के लिए उन्हें अभ्यस्त करने के लिए चूहों को व्यक्तिगत रूप से भी पिंजरों में प्रारंभिक तनाव जोखिम (1 दिन) और घर के दिन से पहले इस विषय बी -6 चूहों का परिचय।
  2. तीन दिन (दिन -2 पर) 1 दिन पहले, चूहों (एसडी पिंजरों में विषय बी -6 की एक ही नंबर उनके क्षेत्रों की स्थापना करने के लिए करते एक एक्रिलिक विभक्त द्वारा बांटा गया है जो प्रत्येक एसडी पिंजरे के एक डिब्बे में आक्रामक आईसीआर चूहों को स्थानांतरित चूहों)।
  3. ऊपर वर्णित एकल पिंजरे हालत में, के रूप में सफेद रंग का विभाजन बोर्डों का उपयोग करके एसडी पिंजरों फूट डालो।
  4. गैर-जोर दिया नियंत्रण -6 चूहों के लिए, एसडी पिंजरों (चूहों की आधी संख्या) जोड़े में चूहों को रखने के लिए तैयार करते हैं; 10 दिनों के लिए एक एसडी पिंजरे में विभक्त द्वारा विभाजित प्रत्येक डिब्बे में दो चूहों जगह है।
  5. 1 दिन पर दैनिक बीडब्ल्यूजी, वित्तीय, और वाई माप के बाद, afte में एसडी पिंजरों के डिब्बों (निवासी के घर-पिंजरे) में से एक में जगह विषय बी -6 चूहोंrnoon (14: 00-16: 00) आवास के कमरे में चारों ओर 300 लक्स की प्रकाश व्यवस्था के तहत और निवासी-घुसपैठिए परीक्षण पूरा करने के पहले हमले के काटने से शारीरिक संपर्क के समय को मापने।
  6. 1 दिन, पहला हमला काटने से 5 मिनट के लिए शारीरिक संपर्क समय निर्धारित करने और पर्यवेक्षकों Miczek एट अल द्वारा वर्णित के रूप में प्रतिद्वंद्वी की पीठ या कमर में रियायत के तौर पर निर्देशित कर रहे हैं कि आईसीआर चूहों द्वारा हमले के काटने की संख्या गिनती की है। 20 को बी -6 चूहों को शारीरिक तनाव की डिग्री का निर्धारण।
  7. शारीरिक संपर्क समय के बाद, बचाव विषय बी -6 चूहों, और जाँच और उनकी खाल की स्थिति और घाव रिकॉर्ड है। फिर, शारीरिक तनाव के लिए जोखिम अगले दिन जब तक अगले एसडी पिंजरों में आईसीआर चूहों को एक और डिब्बे में बी -6 चूहों जगह है।
  8. एसडी पिंजरे में एक्रिलिक विभक्त पारदर्शी है और छेद होता है क्योंकि पड़ोसी Compart में आईसीआर चूहों से दृश्य, श्रवण सहित विभिन्न भावनात्मक तनाव, और घ्राण उत्तेजनाओं के अधीन बी -6 चूहों का पर्दाफाश24 घंटा हर दिन के लिए एसडी पिंजरे के बयान।
  9. दैनिक नियंत्रण -6 चूहों के बीडब्ल्यूजी, वित्तीय, और वाई उपाय और फिर 1 दिन के लिए एसडी पिंजरों में प्रत्येक डिब्बे में उन्हें जगह है।
  10. 2 दिन, बीडब्ल्यूजी, वित्तीय, और वाई के दैनिक माप के बाद, शारीरिक तनाव को बेनकाब करने के लिए अन्य आईसीआर चूहों के प्रदेशों में इस विषय बी -6 चूहों परिचय।
  11. 2 दिन पहले हमले के काटने से 4.5 मिनट में शारीरिक संपर्क की अवधि सेट करें, और हमले के काटने की संख्या गिनती।
  12. अलग-अलग डिब्बों में नियंत्रण -6 चूहों ले जाएँ और हर दिन के जोड़े की नियुक्ति और साथी फेरबदल करने के लिए जोड़ी संयोजन बदल जाते हैं।
  13. 10 दिन पर अवधि पहले हमले के काटने से 0.5 मिनट के लिए सेट कर दिया जाता है, जिससे कि प्रति दिन 0.5 मिनट से शारीरिक संपर्क की अवधि घटाएं।
  14. 7 दिन, एसडी पिंजरों में डिब्बों के सभी में लकड़ी की छीलन के लगभग आधे की जगह।
  15. 10 दिन पर पिछले शारीरिक तनाव के लिए जोखिम के बाद, एकल पिंजरों में विषय बी -6 चूहों को स्थानांतरित। विषय बी -6 चूहों के लिए इसी प्रकार, 10 दिन पर एक पिंजरों में नियंत्रण -6 चूहों चलते हैं।
  16. एक आईसीआर माउस 1 से 10 दिनों पर प्रत्येक परीक्षण में 5 मिनट तक किसी भी हमले के काटने प्रदर्शित नहीं करता है, परीक्षण समाप्त। अतिरिक्त आक्रामक आईसीआर चूहों के साथ आईसीआर माउस बदलें और विषय बी -6 माउस के लिए एक विकल्प के परीक्षण का आयोजन करेगा।
  17. एक माउस घायल हो जाता है, तो एक भी पिंजरे में माउस को अलग-थलग करने और अपने शरीर के वजन, भोजन का सेवन, और पानी के सेवन की जाँच करके प्रगति का निरीक्षण। Analgesia के लिए अपने IACUC दिशा-निर्देशों का पालन करें। चूहों में शरीर विज्ञान और व्यवहार को प्रभावित करने वाले गंभीर घाव के मामले में, स्थानीय IACUC दिशा निर्देशों के अनुसार उन्हें euthanize।

5. सामाजिक परिहार टेस्ट (सामाजिक संपर्क टेस्ट)

  1. 11 दिन पर (00: 00-12: 09) सुबह में सामाजिक परिहार के लिए व्यवहार परीक्षण प्रदर्शन करते हैं।
  2. तीस मिनट के परीक्षण से पहले, व्यवहार में (कम से कम 1 लक्स के मंद प्रकाश) एक शेल्फ पर नियंत्रण है और इस विषय बी -6 चूहों के पिंजरों हस्तांतरणकम से कम 20 लक्स की प्रकाश व्यवस्था के तहत परीक्षण के कमरे उन्हें पर्यावरण के लिए अभ्यस्त करने के लिए अनुमति देने के लिए।
  3. आदेश के प्रभाव को कम करने के लिए, बारी-बारी से नियंत्रण और इस विषय बी -6 चूहों का परीक्षण करें।
  4. (क्षेत्र के केंद्र में 20 लक्स की एक प्रकाश के साथ प्रकाशित) एक खुले मैदान के मैदान और प्रत्येक माउस मल, मूत्र को दूर करने के लिए व्यवहार परीक्षण से पहले 70% इथेनॉल के साथ लथपथ कागज तौलिए का उपयोग कर एक प्लास्टिक की बातचीत बॉक्स, और किसी भी odors साफ ।
  5. खुले मैदान तंत्र के पास एक भी पिंजरे से एक अपरिचित आईसीआर माउस (एक हमलावर के रूप में इस्तेमाल नहीं) रखें।
  6. चित्रा 4 में दिखाया गया है खाली बातचीत बॉक्स के खुले मैदान में एक बी -6 माउस रखें। मॉनिटर और (कदम 5.10 में वर्णित) स्वचालित विश्लेषण प्रणाली का उपयोग करते हुए 2.5 मिनट के लिए अपने व्यवहार का विश्लेषण।
  7. पहले परीक्षण के बाद, क्षेत्र से बी -6 माउस को हटा दें और अपने घर पिंजरे में जगह।
  8. इस के बाद, बातचीत बॉक्स में अपरिचित पुरुष आईसीआर माउस (सामाजिक लक्ष्य) जगह और फिर बी -6 परिचयमाउस खुले मैदान में और 2.5 मिनट के लिए अपने व्यवहार पर नजर रखने।
  9. दूसरा परीक्षण के बाद, उनके घर के पिंजरों को बी -6 और आईसीआर चूहों दोनों वापस, और क्षेत्र और उपरोक्त के रूप में बातचीत बॉक्स साफ।
  10. अपने सामाजिक व्यवहार का परीक्षण करने के लिए प्रत्येक -6 माउस के लिए इन चरणों को दोहराएँ। प्रत्येक सुनवाई के दौरान रिकॉर्ड शीर्ष दृष्टिकोण फिल्में एक सीसीडी कैमरे का उपयोग।
    1. व्यवहार परीक्षण के बाद, गोटो एट अल। 13 के रूप में दिखाया प्रत्येक परीक्षण के लिए (सेकंड में) और (सेकंड में) कोने क्षेत्र में बातचीत के क्षेत्र में बिताए समय की गणना। माउस के केंद्र पर आधारित माउस की स्थिति न्यायाधीश।
    2. कृष्णन एट अल। 21 में प्रकाशित तरीकों का पालन (लक्ष्य के बिना बातचीत के समय,) (लक्ष्य के साथ बातचीत के समय,) 100 × / के रूप में सामाजिक संपर्क स्कोर, गणना।

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Representative Results

10 दिन की अवधि में, आईसीआर चूहों द्वारा हमले के काटने की संख्या स्वयं एक शोधकर्ता द्वारा गिना गया के लिए शारीरिक तनाव की डिग्री पर नजर रखने के लिए। चित्रा 5A प्राप्त हमले के काटने की संख्या के लिए व्यक्तिगत मूल्यों को इंगित करता है। वहाँ प्रारंभिक चरण (1 दिन पर लगभग 10-120 काटने) में काफी परिवर्तनशीलता था, लेकिन इस परिवर्तनशीलता बाद में मंच (10 दिन पर लगभग 5-20 काटने) में कम हो गया था। चित्रा 5 ब हमले के काटने की औसत संख्या प्राप्त इंगित करता है कि शारीरिक संपर्क की अवधि (5 मिनट से 0.5 मिनट के लिए) में कमी आई है, क्योंकि धीरे-धीरे समय के साथ कम किया है।

विषय चूहों वजन बढ़ाने परिवर्तन, साथ ही 10 दिनों के लिए sCSDS चूहों से संपर्क के बाद भोजन और पानी के अपने दैनिक खपत में परिवर्तन दिखाया। नियंत्रण और इस विषय चूहों (पी <0.0001 के बीच कुल शरीर के वजन में एक महत्वपूर्ण अंतर है, अयुगल दो पूंछ Stude नहीं थाNT की टी -Test)। विषय चूहों की है कि लगभग 2.0 ग्राम (चित्रा 6) था जबकि चूहों पर नियंत्रण की कुल बीडब्ल्यूजी, लगभग 0.5 ग्राम था। चूहों के दो समूहों (पी = 0.0904, अयुगल दो पूंछ छात्र के टी -Test) के बीच कुल फाई में एक विचारोत्तेजक अंतर नहीं था। नियंत्रण और इस विषय चूहों लगभग 30 ग्राम और भोजन की 33 ग्राम, क्रमशः (चित्रा 7) का सेवन किया। दो समूहों के बीच कुल WI में एक महत्वपूर्ण अंतर था (पी <0.0001, अयुगल छात्र टी -Test दो पूंछ)। 8 चित्रा के रूप में दिखाया विषय चूहों (लगभग 80 ग्राम) का कुल WI, चूहों पर नियंत्रण (लगभग 40 ग्राम) की तुलना में दो गुना अधिक था।

सामाजिक संपर्क स्कोर के लिए, दो समूहों (पी = 0.0033, अयुगल दो पूंछ छात्र के टी -Test) के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर था। चूहों पर नियंत्रण के स्कोर था 2, 100, विषय चूहों <100 (9 चित्रा) के स्कोर के लिए किया था, जबकि।

चित्र 1
Subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव की चित्रा 1. प्रायोगिक अनुसूची (sCSDS) प्रतिमान। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
Subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव में इस्तेमाल सामाजिक हार (एसडी) पिंजरे के चित्रा 2. तस्वीर (sCSDS) प्रयोगों। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 3 "src =" / फ़ाइलें / ftp_upload / 52,973 / 52973fig3.jpg "/>
सामाजिक संपर्क परीक्षण में इस्तेमाल किया गया था कि तीन तार-जाल खिड़कियों के साथ प्लास्टिक बातचीत बॉक्स चित्रा 3. तस्वीर। बॉक्स बढ़ने से चूहों को रोकने के क्रम में, स्टील के बने एक वजन बॉक्स पर रखा गया था। के लिए यहां क्लिक करें यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए।

चित्रा 4
सामाजिक संपर्क परीक्षण 4. योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व चित्रा। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
Attac की चित्रा 5. संख्या दिन 10 शारीरिक तनाव के स्तर को 1 दिन से प्राप्त काटने कश्मीर का दौरा पड़ने के काटने की संख्या की गिनती, जो एक शोधकर्ता द्वारा मूल्यांकन किया गया। (ए) व्यक्तिगत डेटा (एन = 23) प्रतिनिधित्व कर रहे हैं। प्रारंभिक चरण में 5 मिनट की अवधि के लिए परिवर्तनशीलता के एक उच्च राशि (लगभग 10-120 काटने) हालांकि वहाँ शारीरिक संपर्क की अवधि (5 मिनट मिनट 0.5 से) में कमी आई है, क्योंकि इस परिवर्तनशीलता धीरे-धीरे देर से मंच की ओर से कमी आई । (बी) डाटा (एन = 23) मतलब की मानक त्रुटि ± मतलब के रूप में दिखाया गया है। हमले के काटने की संख्या प्रारंभिक चरण में लगभग 35-40 था, यद्यपि यह संख्या लगभग 15-20 देर चरण में कमी आई है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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दिन 10 दिन से 1 चित्रा 6. शरीर के वजन को शरीर के कुल वजन बढ़ाने के मामले में (एन = 24) और subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव (sCSDS) (एन = 23) चूहों पर नियंत्रण के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर है (*** पी <0.0001, अयुगल दो पूंछ छात्र के टी -Test)। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 7
चित्रा 7. दिन 10 1 दिन से भोजन का सेवन यह नियंत्रण के बीच एक विचारोत्तेजक अंतर के मामले में (एन = 23) चूहों (एन = 24) और subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव (sCSDS) है, महत्वपूर्ण नहीं था, यद्यपि कुल भोजन का सेवन († पी = 0.0904, अयुगल दो पूंछटी -Test) छात्र है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

आंकड़ा 8
चित्रा 8. जल का सेवन 1 दिन से दिन के 10 नियंत्रण के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर ** (एन = 24) और subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव (sCSDS) (एन = 23) कुल पानी का सेवन करने के मामले में (चूहों नहीं है * पी <0.0001, अयुगल) छात्र टी -Test दो पूंछ। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

9 चित्रा
दा पर चित्रा 9. सामाजिक बातचीत स्कोरY 11. वहाँ नियंत्रण के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर है (एन = 24) और सामाजिक संपर्क स्कोर (के लिए subchronic और हल्के सामाजिक हार तनाव (sCSDS) (एन = 23) चूहों ** पी = 0.0033, अयुगल दो पूंछ छात्र के टी - परीक्षण)। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

मानक सीएसडीएस प्रोटोकॉल 19 (प्रतिदिन हमलावरों के साथ शारीरिक संपर्क की 5 से 10 मिनट) के अधीन sCSDS चूहों और सीएसडीएस चूहों के बीच शरीर के वजन में निश्चित मतभेद थे। मानक सीएसडीएस चूहों तनाव अवधि 21,22,23 के दौरान शरीर के वजन में कमी देखी गई जबकि sCSDS चूहों, तनाव की अवधि के दौरान वृद्धि हुई बीडब्ल्यूजी दिखाया। 10 दिन के तनाव की अवधि के दौरान हमलावरों के साथ शारीरिक संपर्क की कुल अवधि के मामले में दो प्रोटोकॉल के बीच एक बड़ा अंतर है। मूल सीएसडीएस प्रतिमान हमलावर और कुल में अधीनस्थ चूहों (एक पूर्ण पैमाने पर सीएसडीएस) के बीच शारीरिक संपर्क की 50 या 100 मिनट में शामिल हैं, वहीं sCSDS विधि कुल (एक आधा पैमाने सीएसडीएस) में इस बातचीत के 27.5 मिनट भी शामिल थे। मानक सीएसडीएस चूहों पर शारीरिक तनाव की तीव्रता 19 से अनजान था, यद्यपि यह हमले के काटने की औसत संख्या लगभग 30 दिन प्रति sCSDS चूहों में था प्राप्त किया है कि इस बात की पुष्टि की गई थी। एगोटो एट अल। 13, sCSDS चूहों 1 महीने के भीतर सामान्य रूप से ठीक हो क्योंकि sCSDS चूहों (सामाजिक घृणा पिछले हार के तनाव के बाद अधिक से अधिक 1 महीने के लिए निरंतर है) 21 मानक सीएसडीएस चूहों की तुलना में अवसाद का एक मामूली मॉडल हैं में उल्लेख किया है पिछले हार के तनाव के बाद। इसके अतिरिक्त, Savignac एट अल। 24 हमलावरों के साथ अपेक्षाकृत कम शारीरिक संपर्क period.Interestingly तनाव के दौरान विषय चूहों के बीडब्ल्यूजी में तेजी लाने सकता है कि सूचना, वॉरेन एट अल। 23 भावनात्मक रूप से केवल एक अन्य चूहों के शारीरिक संपर्क देखा कि चूहों पर जोर दिया है कि सूचना दी है सीएसडीएस प्रतिमान के दौरान पता चला है शारीरिक तनाव के बिना बीडब्ल्यूजी कमी आई है। इस तरीके में, मूल और संशोधित सीएसडीएस मानदंड बीडब्ल्यूजी 13 phenotypes का एक व्यापक रेंज दिखा विभिन्न मॉडलों का उत्पादन। इन अभिव्यक्तियों में नुकसान और लाभ सहित उदास और असामान्य अवसाद से पीड़ित रोगियों में मनाया उन लोगों के लिए समान हैंशरीर के वजन में क्रमश: 6। इसके अलावा, सबूत की कई लाइनों शारीरिक शोषण सहित गंभीर तनावपूर्ण जीवन की घटनाओं दृढ़ता से मनुष्य 25,26,27 में अवसाद के साथ जुड़े रहे हैं कि सुझाव। तनाव प्रेरित वजन और ज्यादा खा लिए चेहरे वैधता 18 के संदर्भ में, sCSDS चूहों मानव में असामान्य अवसाद से संबंधित कुछ सुविधाओं हो सकता है।

हालांकि, अवसाद की एक मॉडल के रूप में sCSDS चूहों की कुछ सीमाएं हैं। पशु मॉडल, अवसाद की तरह परिवर्तन में (जैसे, सूक्रोज वरीयता परीक्षा में anhedonia, मजबूर तैरना और / या पूंछ निलंबन परीक्षण में निराशा की तरह व्यवहार) मॉडल का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं। उनकी निराशा की तरह व्यवहार 13 के मामले में sCSDS और गैर-जोर दिया चूहों के बीच कोई मतभेद नहीं थे, anhedonia भविष्य में विश्लेषण किया जाना चाहिए। इसके अलावा, हाइपोथैलेमस पीयूषिका आधिवृक्क (एचपीए) प्रणाली में आणविक परिवर्तन, प्रतिरक्षा प्रणाली, और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र चाहिएजांच की जानी। इसके अलावा, अवसादरोधी दवाओं के साथ दवा प्रयोगों का आयोजन किया जाना चाहिए। जैसा कि ऊपर कहा, चेहरा, निर्माण, और अवसाद की एक मॉडल के लिए भविष्य कहनेवाला validities sCSDS चूहों के लिए जमा किया जाना चाहिए।

sCSDS चूहों अत्यधिक WI व्यवहार (तनाव प्रेरित अतिपिपासा के लक्षणों की तरह) से पता चला है। मानसिक विकारों, साइकोजेनिक अतिपिपासा और / या बहुमूत्रता और अतिपिपासा के साथ पानी के नशे से पीड़ित रोगियों में आमतौर पर 28 मनाया जाता है। द्रव प्रतिबंध और व्यवहार और pharmacologic उपचारों 29 सहित कुछ उपचार कर रहे हैं हालांकि, इन लक्षणों के अंतर्निहित pathophysiology अस्पष्ट बनी हुई है। इसलिए, अतिपिपासा के पशु मॉडल तनाव प्रेरित अतिपिपासा के तंत्र को समझने के लिए आवश्यक हैं। Polydipsic एसटीआर / एन चूहों 30 और अनुसूची प्रेरित अतिपिपासा मॉडल 31 अतिपिपासा के प्रसिद्ध मॉडल हैं। इन मॉडलों के अलावा, sCSDS चूहों नीति का एक उपयोगी मॉडल हैंतनाव प्रेरित अतिपिपासा की सुविधाओं को समझने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि ydipsia।

इसके अलावा, लेखकों चूहों एक शुद्ध आहार (ऐन-93g), बजाय एक unpurified भोजन खिलाने, sCSDS चूहों की स्थापना के लिए बेहद महत्वपूर्ण है कि विश्वास करते हैं। पशु प्रभावित कर सकते हैं पेट microbiota 32 व्यवहार, क्योंकि हर जानवर और प्रत्येक पशु सुविधा के स्वदेशी बैक्टीरिया वनस्पति की आंतों बैक्टीरिया वनस्पति भविष्य में जांच की जानी चाहिए। गोटो एट अल। 13,14 समर्थन उनके उपयोग के पिछले निष्कर्ष, इस मॉडल पर अतिरिक्त अनुसंधान sCSDS चूहों की वैधता को बढ़ाने के लिए आयोजित किया जाना चाहिए, जबकि अब तक, अवसाद की एक मॉडल के रूप में sCSDS चूहों के उपयोग के संबंध में सबूत की कमी थी, और अवसाद की एक मॉडल के रूप में। हालांकि, वर्तमान अध्ययन के परिणामों sCSDS चूहों हमें आगे तनाव प्रेरित वजन और polydip अंतर्निहित तंत्र को समझने में मदद कर सकते हैं क्योंकि sCSDS चूहों का उपयोग फायदेमंद है सुझाव है किsia- और hyperphagia जैसे लक्षण।

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Disclosures

लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषणा।

Acknowledgments

लेखकों डीआरएस धन्यवाद। Kentaro Nagaoka (कृषि और टोक्यो प्रौद्योगिकी विश्वविद्यालय) और उपयोगी चर्चा के लिए Wataru Iio (इबाराकि)। इस शोध कृषि और चिकित्सा विज्ञान (IUCAM) (MEXT, जापान) और कृषि उत्पादों और स्वास्थ्य को बढ़ावा देने के लाभ के साथ फूड्स के विकास पर अनुसंधान परियोजना (NARO) के बीच इबाराकी विश्वविद्यालय के सहयोग से समर्थित किया गया था (MAFF, जापान) ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
single cage Charles River Laboratories Japan width [W] × depth [D] × height [H] = 143 × 293 × 148 mm
M cage Natsume Seisakusho W × D × H = 220 × 320 × 135 mm
Whiteflake Charles River Laboratories Japan Wood-shaving chips made from spruce trees
AIN-93G Oriental Yeast purified-diet food pellets
Kimtowel Nippon Paper Crecia Co. Paper towels
open-field arena O’Hara & Co. made of gray polyvinylchloride

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References

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Goto, T., Toyoda, A. A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits. J. Vis. Exp. (105), e52973, doi:10.3791/52973 (2015).

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