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Article de méthode

basée capillaire dispositif microfluidique centrifuge pour Taille contrôlable formation de microgouttelettes monodisperse

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DOI :

10.3791/53860

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22 février 2016

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Dans cet article

Résumé

Ici, nous démontrons une méthode de production simple pour des microgouttelettes d’eau dans l’huile (W/O) monodispersées à taille contrôlée, à l’aide d’un dispositif microfluidique centrifuge à base capillaire. Cette méthode ne nécessite qu’un petit volume d’échantillon et permet une production à haut rendement. Nous nous attendons à ce que cette méthode soit utile pour des analyses biochimiques et cellulaires rapides.

Résumé

Ici, nous démontrons une méthode simple pour la production rapide de,, W microgouttelettes / S monodisperses taille contrôlable à l'aide d'un dispositif microfluidique centrifuge basé capillaire. microgouttelettes W / S ont été récemment utilisé dans des méthodes puissantes qui permettent miniaturisés expériences chimiques. Par conséquent, le développement d'une méthode polyvalente pour obtenir monodisperse W / O microgouttelettes est nécessaire. Nous avons développé un procédé pour produire des micro-gouttelettes monodispersées W / O en fonction d'un dispositif de co centrifuge à écoulement capillaire à base de révolution microfluidique. Nous avons réussi à contrôler la taille des micro-gouttelettes en ajustant l'orifice capillaire. Notre méthode nécessite un équipement qui est plus facile à utiliser que d'autres techniques microfluidiques, nécessite seulement un petit volume (0,1-1 pi) de la solution de l'échantillon pour l'encapsulation, et permet la production de centaines de milliers nombre de W microgouttelettes d'E / S par seconde . Nous prévoyons que cette méthode aidera études biologiques qui nécessitent s biologique précieuxDes exemples de conservation du volume des échantillons pour l'analyse biochimique rapide et quantitative des études biologiques.

Introduction

W / O microgouttelettes 1-5 avoir de nombreuses applications importantes pour l'étude de la biochimie et de la bioingénierie, y compris la synthèse des protéines 6, la cristallisation des protéines 7, émulsion PCR 8,9, encapsulation de cellules 10, et la construction de systèmes analogues à des cellules artificielles 5,6. Pour produire des microgouttelettes W / S pour ces applications, les critères importants sont le contrôle de la taille et monodispersibility des microgouttelettes W / O. Dispositifs microfluidiques pour faire monodisperse, taille-réglable W / O microgouttelettes 11 sont....

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Protocole

1. Fabrication d'un dispositif microfluidique à base capillaire-

  1. Mettre en place des titulaires
    Remarque: La conception du support est présenté sur la figure 2A.
    1. Découper chacun des quatre disques des supports (Figure 2A (i) - (iv)) à partir de plaque en matière plastique polyacétal 2 mm d'épaisseur en utilisant une machine de broyage. Utiliser les dimensions suivantes pour chacun des quatre disques du titulaire: (i) une disque de diamètre 8,5 mm, le trou capillaire (CH) de diamètre 1,3 mm, le trou de vis (SH) de diamètre 1,8 mm; (Ii) deux disques de diamètre 8,7 mm, diamètre 2,0 mm....

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Résultats

Dans cette étude, nous présentons une méthode simple pour la génération de micro-gouttelettes de cellules de taille W / O en utilisant un dispositif microfluidique centrifuge basé capillaire (Figure 1). Le dispositif microfluidique est composé d'un support de capillaire (figure 2B), deux capillaires en verre creux (capillaires en verre interne et externe de la figure 3C), et un microtube contenant une huile dont tensioactif. On injec.......

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Discussion

En utilisant ce dispositif, l'monodisperse W / O microgouttelettes ont été générés par l'instabilité de Rayleigh-Plateau d'un jet-débit 17. L'examen microscopique n'a pas révélé la présence de gouttelettes satellites. Dans la fabrication de l'appareil, trois étapes critiques sont essentiels pour générer avec succès microgouttelettes E / H monodisperses. Tout d'abord, de fournir un flux linéaire de l'huile contenant un agent tensioactif et une solution aqueuse, les trous capilla.......

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Déclarations de divulgation

Aucun conflit d’intérêts n’est déclaré.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le domaine de recherche PRESTO « Conception et contrôle des fonctions cellulaires » de l’Agence japonaise pour la science et la technologie (JST), une subvention pour la recherche scientifique dans les domaines innovants « Robotique moléculaire » (projet n° 24104002) du ministère de l’Éducation, de la Culture, des Sports, de la Science et de la Technologie (MEXT), Japon, une subvention pour les jeunes scientifiques (A) (projet n° 24680033) et la recherche scientifique (B) (projet n° 26280097) de la Société japonaise pour la robotique. la Promotion de la science (JSPS) et le cours de conception créative pour les biosciences et la biotechnol....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Plaque en plastique polyacétal de 2 mm d’épaisseurOutilNikkyo Technos, Co., Ltd. (Japon)244-6432-08
FraiseuseOutil Roland DG Co., Ltd. (Japon)MDX-40A
Fraise en bout RSE230-0.5*2.5OutilNS Tool Co., Ltd. (Japon)01-00644-00501
Vis M2*40OutilJujo Chimie synthétique Labo. (Japon)Référence 0001-024
Outil d’extraction en verreNarishige (Japon)PC-10
Outil MicroforgeNarishige (Japon)MF-900
Outil capillaire intérieur en verreNarishige (Japon)G-1
Outil capillaire extérieur en verreWorld Precision Instruments Inc. (États-Unis)1B200-6
Outil de tube d’échantillon de 1,5 mlINA OPTIKA CO., LTD (Japon)ST-0150F
Réactif d’hexadécaneWako Pure Chemical Industries Ltd. (Japon)080-03685  ;
Monooléate de sorbitan (portée 80)RéactifTokyo Chemical Industry Co., Ltd. (Japon)S0060
Système Milli QRéactifMerck Millipore Corporation (Allemagne)ZRQSVP030
Mini-centrifugeuse de type pivotantHitech Co., Ltd. (Japon)ATT101
Outil de microscope numériqueKEYENCE Corporation (Japon)VHX-2001

Références

  1. Song, H., Chen, D. L., Ismagilov, R. F. Reactions in droplets in microfluidic channels. Angew. Chem., Int. Ed. 45 (44), 7336-7356 (2006).
  2. Huebner, A., et al. Microdroplets: a sea of applications? Lab Chip. 8, 1244-1254 (2008).
  3. Taly, V., Kelly, B. T., Griffiths, A. D.

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Réimpressions et autorisations

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