Dieses Manuskript beschreibt die Protokolle für Prostata-Mikrodissektion und chirurgische Kastration im Labor Maus. Wir zeigen auch Vertreter von diesen Protokollen erzeugt Ergebnisse. Schließlich diskutieren wir die Vorteile und die Nutzung dieser Protokolle.
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Methodenartikel
Murine Prostata Micro-Dissektion und chirurgische Kastration
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Mausmodelle werden ausgiebig verwendet, um Prostatakrebs und andere Krankheiten zu untersuchen. Die Maus ist ein hervorragendes Modell für die Untersuchung der Prostata und wurde als Ersatz für Entdeckungen in der Entwicklung und Krankheit der menschlichen Prostata verwendet. Die Prostata-Mikrodissektion ermöglicht eine konsistente Untersuchung der lappenspezifischen Prostataanatomie, Histologie und zellulären Eigenschaften ohne Kontamination anderer Gewebe. Testosteron beeinflusst die Entwicklung und Erkrankungen der Prostata. Die Androgenentzugstherapie ist eine gängige Behandlung für Prostatakrebspatienten, aber viele Prostatatumoren werden kastrationsresistent. Die chirurgische Kastration von Mausmodellen ermöglicht die Untersuchung der Kastrationsresistenz und anderer Facetten der Hormonbiologie an der Prostata. Dieses Verfahren kann mit der Wiedereinführung von Testosteron oder der hormonellen Regeneration der Prostata gekoppelt werden, einer leistungsstarken Methode zur Untersuchung von Stammzelllinien in der Prostata. Zusammen eröffnen die Mikrodissektion der Prostata und die chirurgische Kastration eine Vielzahl von Möglichkeiten für eine robuste und konsequente Erforschung der Entwicklung und Erkrankung der Prostata. Dieses Manuskript beschreibt die Protokolle für die Mikrodissektion der Prostata und die chirurgische Kastration bei der Labormaus.
Einleitung
Die Prostata ist die häufigste Stelle von Krebs bei Männern in den USA. Fast 220.000 Menschen jedes Jahr wird mit Prostatakrebs diagnostiziert und etwa 27.000 Menschen werden auf ihre Krankheit 1 erliegen. Männer haben eine 1 in 7 Lebensdauer Risiko einer Prostatakrebsdiagnose in den USA 1. Benigner Prostatahyperplasie (BPH), eine altersbedingte noncancerous Vergrößerung der Prostata, ist ebenfalls ein weitverbreiteter Zustand, beeinflussen über 80% der Männer über 80 2. Als solche kann die Prostata ist im Mittelpunkt der Beträchtliche Forschung.
Mausmodelle wurden weitgehend zu studieren Erkrankungen der ....
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Protokoll
Dieses Protokoll erfüllt und folgt den Richtlinien festgelegt von der Johns Hopkins University Institutional Animal Care und Use Committee.
1. Mikro-Dissektion einer Maus Prostata
- Euthanize die Maus durch Erstickung mit Kohlendioxid oder einem alternativen genehmigten Verfahren in Einklang mit den institutionellen Tierpflege und Richtlinien zur Verwendung.
- Pin der Maus in Rückenlage auf eine Dissektion Bord durch einen Stift, der durch jede der vier Pfoten setzen.
- Sprühen Sie den Bauch mit 70% Ethanol.
- Halten Sie die Haut des Unterleibs mit einer Pinzette, und mit einer Schere durch die Haut zu schneiden und ca. 1 cm v....
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Ergebnisse
Alle sechs Prostatalappen wurden aus einer Maus über Prostata Mikrodissektion (Abbildung 1) entfernt wird . Der komplette Urogenitaltrakt (UGT) aus allen Prostatalappen besteht, die Harnblase, Samenbläschen und der Harnröhre (Abbildung 1a). Die Samenleiter wird an der Harnröhre, ist aber für Prostata - Mikrodissektion unnötig, und somit vor dem Entfernen des UGT gelöst werden kann durch die Harnröhre (1b-1c) zu schneiden. Der Urogenitalt.......
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Diskussion
Prostate Mikrodissektion ermöglicht lappen spezifische Experimente und die Analyse der Maus Prostata (Abbildung 1). In gentechnisch veränderten Maus-Modellen, in einem Lappen kann Phänotypen gesehen, die nicht in anderen gesehen wird. Auch für die histologische Analyse, versichert dieses Protokoll, dass die maximale Menge an reinem Prostatagewebe kann, ohne andere Urogenitaltrakt Gewebe in dem Abschnitt geschnitten und gefärbt werden. Schließlich ist für Single-Cell-Experimente ermöglicht dieses Protoko.......
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Offenlegungen
Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.
Danksagungen
Einige der Figuren in diesem Manuskript wurden großzügig durch das Labor von Bart O. Williams zur Verfügung gestellt. Die Autoren werden vom National Cancer Institute gewährt U54CA143803, CA163124, CA093900 UND CA143055 unterstützt.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Chirurgische Instrumente | Roboz | Verschiedenes | |
| Formaldehyd | Sigma | F8775 | |
| OCT Medium | VWR | 25608-930 | Muss zum Einfrieren auf Trockeneis gelegt und bei -80 & Grad gelagert werden; C |
| PBS | Life Technologies | 10010 | |
| Isofluran | Johns Hopkins | Auch online bei Anbietern erhältlich | |
| Cautery Pen | Medline | ESCT002 | |
| Seidennaht | AD Surgical | M-S330R19 | |
| Chirurgische Wundclips | Roboz | RS-9265 |
Referenzen
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Roehrborn, C. G. Pathology of benign prostatic hyperplasia. Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).
- Valkenburg, K. C., Williams, B. O.
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Nachdrucke und Genehmigungen
