Suyun temiz ve doğru noktadan örneklenmesi için basit, müdahaleci olmayan ve güvenilir bir yöntem olan VacuSIP'i tanıtıyoruz. Sistem, partikül ve çözünmüş bileşiklerin uzaklaştırılmasını ve atılımını temiz bir şekilde ölçmek için bentik süspansiyon besleyiciler tarafından solunan ve solunan suyun yerinde eşzamanlı olarak toplanması için geliştirilmiş ve değerlendirilmiştir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
VacuSIP, bir Geliştirilmiş INEX Yöntemi için
Bu makalede
Özet
Özet
Bentik süspansiyon besleyiciler, deniz ekosistemlerinin işleyişinde önemli roller oynamaktadır. Büyük hacimlerde suyu filtreleyerek, plankton ve döküntüleri uzaklaştırarak ve partikül ve çözünmüş bileşikleri dışarı çıkararak, bentik-pelajik eşleşme için önemli maddeler olarak işlev görürler. Süspansiyon besleyiciler (süngerler, ascidyenler, poliketler, çift kabuklular gibi) tarafından uzaklaştırılan ve atılan bileşiklerin doğru bir şekilde ölçülmesi, fizyolojilerinin, metabolizmalarının ve beslenme ekolojilerinin incelenmesi için çok önemlidir ve bu organizmaların aracılık ettiği besin akışlarının ekolojik uygunluğunu belirlemek için esastır. Bununla birlikte, süspansiyon besleyicilerin doğada partikül ve çözünmüş bileşikleri işleme hızının değerlendirilmesi, şu anda mevcut metodolojilerin sınırlamaları ile sınırlıdır. Amacımız, bentik süspansiyonlu besleyicilerin mevcut açıklığı gibi belirli bir noktadan yerinde temiz ve kontrollü su örneklemesine izin verecek basit, güvenilir ve müdahaleci olmayan bir yöntem geliştirmekti. Yöntemimiz, özel olarak üretilmiş bir manipülatör cihazına monte edilmiş ve örneklenen organizmanın ekshalant deliğinin içine dikkatlice yerleştirilmiş dakika tüpleri kullanarak, incelenen organizmanın solunan ve solunan suyunun aynı anda örneklenmesine izin verir. Her tüpün distal ucuna bağlı bir şırınga iğnesi ile toplama kabı üzerinde bir septumun delinmesi, dış basıncın, numune alınan suyu numune alma tüpünden kaba yavaşça zorlamasına izin verir. Yavaş ve kontrollü numune alma hızı, sudaki doğal yamalılığın entegre edilmesine izin verirken, kontaminasyonsuz numune alma sağlar. Farklı partikül ve çözünmüş bileşiklerin analizleri için en uygun filtreleme cihazları, toplama kabı ve depolama prosedürleri için öneriler sunuyoruz. VacuSIP sistemi, farklı ekosistemlerdeki filtre besleyicilerin fizyolojisini ve işlevsel rolünü değerlendirmek için ucuz ve öğrenmesi ve uygulaması kolay, doğal koşullarda bozulmamış süspansiyon besleyici metabolizmasının nicelleştirilmesi için güvenilir bir yöntem sunar.
Giriş
Bentik süspansiyon besleyiciler deniz ekosistemlerinin 1 işleyişinde temel rol oynamaktadır. Su 2,3 geniş hacimli filtreleyerek, onlar kaldırmak ve partiküler (plankton ve detritus) ve (burada ve referanslar) çözünmüş bileşikler 1 ifraz ve bentik-pelajik bağlantı 4,5 ve besin döngüsü 6,7 önemli ajan vardır. Doğru partikül ve çözünmüş bileşikler kaldırılır ve (örneğin, süngerler, Ascidians, polychaetesi, ve Bivalvlerden gibi) bentik süspansiyon besleyiciler tarafından atılır ölçme onların fizyolojisi, metabolizma ve beslenme ekoloji anlamak esastır. Birlikte hızı ölçümleri pompalama ile, aynı zamanda bu organizmal....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. Hazırlık Adımları ve Temizlik İşlemleri
- Temizlik çözümü
- her zaman koruyucu giysiler, bir laboratuvar önlüğü ve eldiven giyin. toz ve duman ücretsiz temiz alanda bu hazırlık adımları uygulayın.
- Taze, yüksek kaliteli, iki kez distile su ile% 5-10 hidroklorik asit (HCl) çözeltisi hazırlayın.
- % 5 anyonik ve iyonik olmayan yüzey aktif madde çözeltisi, yüksek ölçüde çözünür bazik bir karışım hazırlayın, taze, yüksek kaliteli, iki kez distile su ile (Malzeme listesine bakınız).
- temiz tüm çözümleri saklayın, asit kapları yıkanır.
- Hazırlık aşamaları ve (laboratuvarda) temi....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Deniz suyu toplama yöntemleri optimizasyonu
Toplayıcı şişeleri ve temizlik prosedürü seçimi
VacuSIP uyumlu toplama hazneli numune bir şırınga iğnesi ile delinmesi ile başlatılabilir sağlayan bir septum olmalıdır. Onlar yüksek sualtı basıncı (derinlikleri çalışan tipik tüplü 2-3 bar) dayanıklı olmalıdır ve bir vakum tutmak g.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
hazırlık adımlar
DOM ve besin analizi için kolektör şişeler
Toplayıcı damarlar çözünmüş mikro bileşenleri ile etkileşime girebilir ve örnekleyici duvarları büyüme 30-34, DOM ve besin koleksiyonu için farklı şişeler test edildi bakteriler için bir substrat olabilir beri. Numuneler hızla 30 donmuş değilse cam şişe kadar iki kat silika ilk konsantrasyonunu artırabilir çünkü Borosilikat, silis miktarını.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Biz saha içinde yaptığı yardım için Manel Bolivar teşekkür ederiz. Biz araştırma ve örnekleme izinleri verdikleri destekten dolayı "Parc Natural del Montgri les Illes Medler i el Baix Ter" minnettarız. sualtı manipülatör Ayelet Dadon-Pilosof tarafından tasarlanan ve Sn Pilosof tarafından imal edilmiştir. Bu eser İspanyol Hükümeti projesi CSI-Mercan [RC ve MR hibe numarası CGL2013-43106-R] tarafından ve TM "Ministerio de Educación, Kültür y Deporte (• MECD)" bir FPU burs ile desteklenmiştir. Bu G. Yahel için Katalan Hükümeti [hibe sayısı 2014SGR1029] ve ISF hibe 1280-1213 ve BSF hibe 2012089 tarafından finanse edilen bir Deniz Biyojeokimya katkısı ve Küresel Değişim A....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| GorillaPod, Orijinal | Joby | GP000001 | esnek taşınabilir tripod ve nbsp; |
| Flanşsız Yüksük | IDEX Sağlık & Bilim | P-200X | 1/16" Mavi/pk |
| Erkek Somun | IDEX Sağlık & Bilim | P-205X | 1/16" Yeşil/10 pk |
| Kadından Kadına Luer | IDEX Sağlık & Bilim | P-658 | |
| Dişi-Erkek Luer | IDEX Sağlık & Bilim | P-655 | |
| Gözetleme Borusu (254 &mikro; m ID) | IDEX Sağlık & Bilim | 1531 | 1/16 "OD x 0.01 ID x 5 ft uzunluğunda. Alternatif kimlik kullanılabilir. |
| İki bileşenli reçine epoksi | IVEGOR | 9257 | Kullanmadan önce iki bileşenli reçineyi iyice karıştırın |
| (TOC) EPA Şişeleri | Cole -Parmer | 03756-20 | 40 ml cam şişeler. Yine Thomas Scientific tarafından üretilmiştir (ref. numarası 9711F09). |
| HDPE Şişeler | Wheaton | 986701 (E78620) | 20 ml yüksek yoğunluklu polietilen şişeler |
| Vacuette Z katkı maddesi içermez | Greiner bio-one | 455001 | üretici tarafından ön vakum |
| Septum Numune Şişeleri | Thomas Scientific | 1755C01 | 250 ml cam şişeler |
| HDPE şişeler için Septum Cap 1 | Wheaton | W240844SP (E7865R) | 22-400 & nbsp; |
| Septum Cap 2 | Wheaton | W240846 (1078-5553) | 24-400 cam şişeler ve şişeler için. Ayrıca Thermo Scientific National tarafından üretilmiştir (ref. 03-377-42). |
| Sıralı paslanmaz çelik Swinney Filtre tutucular | Pall | 516-9067 | 13 mm çap |
| PTFE Conta Yıkayıcı | Pall | 516-8064 | paslanmaz çelik filtre tutucular için halka |
| TCLP Cam Filtreler | Pall | 516-9126 | Bağlayıcı İçermeyen Cam Elyaf Filtreler, 13 mm çap, gözenek boyutu 0.7 &mikro; m |
| Polikarbonat Filtre | Tutucular Cole -Parmer | 17295 | 13 mm çaplı |
| İzopore Membran Filtreler | Millipore GTTP01300 | 13 mm çapında, gözenek boyutu 0.2 &mikro; m | |
| Contrad 70 Solüsyonu | Decon Labs | 1002 | anyonik ve iyonik olmayan yüzey aktif madde çözeltisinin yüksek çözünür temel karışımı |
| Steril Şırınga Filtreleri VWR | International Eurolab S.L. | 514-0061P | 25 mm çapında, gözenek boyutu 0.2 &mikro; m |
| Floresein | Sigma-Aldrich | (eski ref.28802) 46955-100G | 100 g |
| Holdex, tek kullanımlık, steril | Greiner bio-one | 450263 | steril, Vacuette Steril İğneler için merkez dışı luerli tek kullanımlık tüp tutucu |
| IcoGammaPlus | 5160 | 0.7 mm x 30 mm | |
| Kriyovialler Nalgene | Nalgene | V5007 (Kat. No.5000-0020) | 2 ml |
| Cryobox karton ve nbsp; | Rubilabor | M-600 | 145x145x55 mm p / mikrotüp 1.5 & nbsp; ml |
| Ortofosforik Asit | Sigma | 79617 veya Alternatif olarak Ultra Saf Hidroklorik asit, son konserasyon% 0.1 | |
| Paraformaldehit | Sigma | P6148 | 500 & nbsp; g |
| Glutaraldehit | Merck | 8,206,031,000 | %25, 1 L |
| El Vakum Pompası | Bü rkle | 5620-2181 veya Alternatif olarak standart laboratuvar vakum pompası |
Kaynaklar
- Gili, J. M., Coma, R. Benthic suspension feeders: their paramount role in littoral marine food webs. Trends. Ecol. Evol. 13 (8), 316-321 (1998).
- Reiswig, H. In situ pumping activities of tropical Demospongiae. Mar. Bio. 9, 38-50 (1971).
- McMurray,....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
