Summary
entübasyon ile bir vantilatör kullanımını ortadan kaldırırken Minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) normal enine aort daralma (TAC) temellerini korur. Özellikle translasyonel çalışmalarda sol ventrikül aşırı, yüksek verimli çalışmalar için oldukça aranan bir yöntem olduğu kanıtlanmıştır.
Abstract
Minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) standart açık-göğüs enine aort daralma (TAC) daha farelerde enine aorta daralması için daha uygun bir yöntemdir. enine aort daralma sol ventrikül yüksek basınç indüksiyon için son derece işlevsel bir yöntem olmasına rağmen, bunun nedeni trakeal entübasyon ile suni havalandırma kullanımı için daha zor ve uzun bir prosedürdür. TAC yeni yöntemde, kumanda merkezinde olduğu gibi, aynı zamanda çoğu kez daha az survivable olduğunu ne bir havalandırma kurulum ile kaburga ve interkostal kaslar ne entübasyon kesim gerektirir. Göğüs boşluğuna erişmek için bir torakotomi aksine kumanda merkezinde, aortik ark boynun ön bölgesinde orta hat kesiden ulaşılır. Tiroid sternum çentik ortaya çıkarmak için geri çekilir. sternum daha sonra ikinci kaburga seviyesine kadar kesilir ve aortik ark bağ dokuları ve timus ayırarak sadece ulaşılır. itibarenOrada, bir dikiş kemer sarılı ve bir ayırıcı ile bağlı ve daha sonra sternum kesim ve cilt kapalı edilebilirler. MTAC sol ventrikül hipertansiyon ikna etmek için çok daha hızlı ve daha az invaziv bir yoludur ve yüksek verimli çalışmalar için olanak sağlar. daralma başarısı aort kavsi akış hızlarını belirlemek için yüksek frekanslı trans-torasik ekokardiyografi, özellikle renkli Doppler ve darbeli dalga Doppler kullanılarak doğrulandı ve sol olabilir sağ karotid arter, kan damarlarının boyut ve sol ventrikül fonksiyonu ve morfolojisi. Başarılı bir daralma aynı zamanda interstisyel ve perivasküler fibrozis ile kalp kası hücresi hipertrofisi olarak önemli histopatolojik değişiklikler, tetikleyecektir. Burada, kumanda merkezinde prosedürü karotid arterlerde ortaya çıkan akımı değişiklikleri ekokardiyografi, brüt morfolojisi ve kalbinde histopatolojik değişiklikler incelenmiştir nasıl gösteren tarif edilmektedir.
Introduction
Bu maddenin amacı, genel olarak farelerde aort daralma (TAC), daha basit ve daha uygun cerrahi üretilmesi için değiştirilebilir kadar transvers göstermektir. TAC ilk kez 1991 1 tanıtılan ve manipüle genomları 2, 3, 4, 5, 6 ile özellikle küçük hayvanlarda, sol ventrikül ve kalp yetmezliğine hipertrofisi neden hücresel ve moleküler yolları incelemek için moleküler biyologlar sağlanmıştır. İstenen basınç yükü üretmek onun etkinliğine rağmen, teknik nihai işlemi gerçekleştirmeden ve düşük hayatta kalma oranı ile zorluk ile sınırlıdır. TAC iletken bir cerrah endotrakeal entübasyon, torakotomi gerçekleştirmek ve akciğer çöküşü 1 önlemek için yapay havalandırma kullanmak gerekir.
içerik "> Çoğu zaman, basit ve daha az invazif bir yöntem arzu edilmektedir. Sonuç olarak, minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) 3 geliştirildi. sonuç (özellikle sol ventrikül hipertrofisi) aynı olmasına rağmen, prosedür önemli ölçüde daha az cihazları içerir ve hayvan daha az zarar. MTAC% 90 üzerinde, büyük bir hayatta kalma oranına sahip bir arzu bir yöntem olduğunu kanıtlamaktadır, ve çok atfedilebilecek olabilir başarılı bir cerrahi sonrası ölüm sadece 15 dakika ila 25. nadir vakaların bir operasyon süresine sahiptir muazzam sol ventrikül yüklenmesinin ve böbrekler gibi kritik organlara kan akımı ölümcül azalmaya neden aort kavsi -tight daralma.Prosedür tamamlandıktan sonra, ekokardiyografi bantlama ve kardiyak morfoloji ve fonksiyon başarısını değerlendirmek için kullanılabilir. Bir yüksek frekans ultrason sistemi çapını ölçmek ve sol ve sağ değişiklikleri akış kullanılabilirzirve akım hızı ölçümleri için aortik ark daralma görselleştirmek için, ve sol ventrikül duvar kalınlığı ve fonksiyonel parametreler 7, 8 belirlemek için, arterler düzeye ulaşmamıştır. Ötenazi sonra, organlar da, hematoksilen ve eozin boyama ve Picrosirius kollajen boyama ile histopatolojik çalışmalar için toplanan olabilir ikinci fibrozis gözlem için özellikle yararlı olmak.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
protokol Hong Kong Üniversitesi Eğitim ve Araştırma (CULATR) Canlı Hayvanların Kullanımı Komitesi kuralları takip eder.
1. Çalışma Sitesi Hazırlama
- % 75 izopropil alkol ile işlem sitesini dezenfekte edin. kalp değişiklikleri ve konu hayvanın solunum oranları önlemek için 37 ° C ısıtma yastığı sıcaklığını ayarlamak.
- 30 dakika için ya da diğer uygun yöntemlerle, 121 ° C de bir ağırlık yer değiştirme sterilizatör sterilize cerrahi aletleri kullanarak.
- Şekil 1'de görüldüğü gibi ligasyon ve doku ayrılması ve bir retraktörü olarak kullanılmak üzere bir araç yapmak için, 4 30-gauge iğne ve bir iğne tutucu ile eğri onları - Take 2. cerrahide kullanılacak pamuklu bir aplikatör şimdi eğimli iğne monte edin.
- o iğne tutucu ile 90º 27-gauge iğne ve eğri künt. ligasyon adımda bir 0,4 mm boşluk yapmak için sert bir yüzeye sürterek ucu pürüzsüz.
- Negatif kuyruk tutam refleksi ile anestezi teyit 100 mg / kg + 10 mg / kg ip: vücut ağırlığı ile ilgili olarak uygun bir ketamin ve ksilazin karışımı 2 aylık, Erkek, 22-25 g C57BL / 6N fare anestezisi .
- tüy dökücü krem 2- 3 dk uygulama ile ön boyun ve göğüs üzerinde saç çıkarın. ılık su ve pamuk aplikatör ile krem çıkarın.
- kornea kurumasını önlemek için bir hayvanın gözleri oftalmik merhem veya jel uygulanır.
- Sırtüstü pozisyonda bir ısıtma pedi üzerinde hayvan koyun ve her 15 dakika aralıklarla uygun belgeleri tutmak için emin olmak, intra-operatif izleme yapmak.
- Ameliyat sırasında doğru pozisyonda hayvan tutmak için ısıtma pedi ile bacaklarda güvenli cerrahi kağıt bant kullanın.
- alkol ve povidon-iyot çözeltisi ile üç kez dönüşümlü olarak cildi dezenfekte edin.
- steril bir dr kullanınBir açık işletme alanı ile maymun bulaşmasını önlemek için. Her fare ve gerektiğinde yeni steril eldiven kullanın.
3. Ligasyon Prosedür
- bir neşter ile boyun ve göğüs orta hat konumundaki fare cildi açın.
- nazikçe künt makas ile bağ dokuları ayırarak kafasına doğru tiroid bezi çekin.
- kavisli iğne ile her iki tarafta karşı orta hatta trakea kas tabakası ayırın.
- künt makas kullanarak, ikinci kaburga (yaklaşık 5 mm) sternum kesti. Bir retraktör veya kavisli bir forseps ile kesim açın.
- birbirlerine ve kavisli iğne ile bağ dokusu ayırarak alt göğüs duvarından timus lobları ayırın; enine aortik ark ve iki karotis arterler bu noktada açıkça görünür olacaktır.
- kemer altında kavisli iğne yerleştirin ve irin ile diğer tarafta damar duvarı ve bağ dokusu arasında perforateeğimli kafa dışarı hing.
- kavisli iğne kullanarak, aort kavsi altında 6-0 monofilament sütür çekin.
- döngüde boşluk koyun ve bir çift düğüm ile bir yerde dikiş düzeltmek. nazikçe boşluk çıkarın.
- düğüm pozisyonu ile başarılı bir daralma onaylamak ve sütür uçlarını kesin.
- Basit bir kesintiye dikiş deseni ile 6/0 ipek sütür kullanılarak göğüs duvarı kapatın. Sürekli dikiş desen bir 6/0 monofilament sütür ile cilt kapatın.
4. Post-operatif Bakım
- dikiş sitesine povidon-iyot çözeltisi uygulayın ve kurtarma ve post-operatif izlenmesi için önceden ısıtılmış kafeste hayvan yerleştirin.
- hayvan ağrıyı hafifletmek ve uygun yumuşak gıda ile fare sağlamak için kendine geldi sonra - (0.1 mg / kg sc 12 saatte 0.05) buprenorfin enjekte edilir.
- tam iyileşme sonrası 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü odasına hayvan dönün.
5.Ekokardiyografi: Başarılı LİGASYONU ve Ölçümlerinin Onay
- Bir 1 L / dak oksijen akış hızı ile, bakım için,% 1.5 - indüksiyon,% 5 izofluran ve 1 - Bir hafta sonra, 3 önceden bantlı fare anestezi.
- tüy dökücü krem kullanarak göğüs tüylerden. İyice ılık su ve pamuk aplikatör ile krem çıkarın.
- 37 ° C'de muhafaza hayvan taşıma platformuna yatar pozisyonda, fare elde edin. pençeleri elektrot jeli uygulayın ve onları elektrotlar ile yastığına bantlayın.
- Fare göğsüne ultrason jeli uygulayın. 40 MHz'lik MS550D prob ve yüksek frekanslı ultrason sistemi ile, aort arkı üzerinde yanı sıra, sol ve sağ karotid arter renkli Doppler ve darbeli dalga Doppler tarama gerçekleştirin.
- B-Modunu Kullanma, sol ventrikül bulun. M-Modunu Kullanma, sistolik ve diyastolik duvar kalınlığı ölçülebilir. gerektiği gibi kullanın Cine Mağaza ve Çerçeve Mağazası verileri ve görüntüleri kaydetmek için.
- UB-Mode şarkı dallanma noktasından önce sol karotis arter bulun. akışını değerlendirmek için darbeli dalga ve renkli Doppler kullanın. Benzer bir noktada sağ karotid artere ile tekrarlayın. Daha sonra analiz etmek Cine Store ve Çerçeve Mağazası modlarında görüntüleri kaydedin.
- Fare sol dekübit pozisyonunda olduğunu şimdiye kadar sola hayvan işleme platformu eğin. Aort arkı bulmak için X ve Y fare, parasternal pozisyonda kafasına bir pozisyon paralel ofset 30 ° hakkında soruşturma yerleştirin ve manipüle.
- daralma bulun. İki karotid arterler aortik arktan şube nerede kan noktası arasında dar bir kanal üzerinden akan olacak gibi, daha görünür daralma site yapmak için renkli Doppler modunu kullanın.
- zirve akış hızını ölçmek için darbeli dalga ve renkli Doppler kullanın. gerektiği gibi kullanın Cine Mağaza ve Çerçeve Mağazası verileri ve görüntüleri kaydetmek için.
- Hayvan yüzüstü pozisyonda bir ısıtma pedi üzerinde kurtarmak için izin verin.tamamen anestezi kurtarıldı sonra 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü odasında orijinal kafesine hayvan dönün.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
MTAC zamanında sol ventrikül önemli hipertansiyon indüksiyon sağlar.
Poliüretan tüp ile yerine bükülüp yapılacak 4 ila 30-gauge iğne - Şekil 1 'de görüldüğü gibi, işlem için birincil araçların hazırlanması sadece 2 gerektiren basit ve az. cerrahi prosedür kendisi TAC ile karşılaştırıldığında, ve kolayca yapılabilir gibi, aynı zamanda daha az karmaşıktır. Tiroid geri edildikten sonra, göğüs kemiği kesilerek ve timus görünümünü temizlemek için taşınır. Aortik ark ligasyonu işlemi (Şekil 2) için kolayca locatable olduğunu.
MTAC güvenilir Bağlanmış farelerde sol ventrikül basınç yüklenmesi üretir. Daraltılmış enine aort açık w, Şekil 3C'de görülmektedir Şekil 3, açık bir şekilde, bu görüntülemektedirell 3D daralma sitesi aracılığıyla artan pik akım hızı olarak. Bu, normal yoğun akım hızı ile herhangi bir daralma gösterir Şekil 3A ve 3B'de görüldüğü sham operasyonu fare, karşılaştırılabilir. Şekil 4C'de görülen ligasyon bir sonucu olarak, akış hızı önemli ölçüde sağ karotid arterde artar ve çıkan aort oluşturmak ve kalp olabilir basıncı sol ventrikül hipertrofisi üretmek. Bununla birlikte, yukarı daralma bir sonucu olarak, akış hızı önemli ölçüde Şekil 4D'de gibi, sol ortak karotid arter azalır. Öte yandan, yakın denk karotid arter kan akışı Şekil 4A (sağ karotid arter) ve 4B'de (sol karotid arteri) 'de olduğu gibi, yapay olarak ameliyat edilmiş fare gözlenir.
Ortaya çıkan hipertrofisi ilgili parametres ve hayatta kalma eğrisi kolaylıkla MTAC-bağlanmış fare kalbi önemli ölçüde genişlemiş ve deforme olduğu görülmektedir, Şekil 5'te, gözlenmektedir. Sham-operasyonu ile fare ile karşılaştırıldığında MTAC çalışan fare kalp büyümesi sergileyen Şekil 6A ve 6B, gösterildiği gibi bu, sadece, ayrıca hücresel seviyede de görülmektedir. Ne daha fazla gözlenebilir olmayan bağlanmış farelere kıyasla artmış kardiyak kas hücre boyutunu ve fibroz MTAC farelerde (Şekil 6D, 6F ve 6H) 'nin (Şekil 6C, 6E ve 6G).
MTAC yüksek frekanslı ultrason sistemi tarafından kontrol edilebilir olduğundan, başarılı bir şekilde aortik ark daraltmak için yetmezliği Şekil 3B'de olduğu gibi, iki boyutlu ekokardiyografi enine aort görünür bir daralma eksikliğinden ortaya çıkacak 3D. Bu da darbeli dalga ve renkli Doppler modları ile kontrol edilebilir, başarılı bir daralma sol karotis (Şekil 4C ve 4D) bir sağ karotid arterde yüksek akış hızı ve düşük akım hızı göstermelidir.
Şekil 1: 1-in, 30-gauge iğne İpucu bükülmesi ile İstenilen İğne kanca Şekillendirme Süreci. A) Orijinal 1-in, 30-gauge iğne ucu. B) iğne tutucu ile iğne ucu tutun ve uzunluğu boyunca yaklaşık yarım viraj. Şeklin sağ üst resimde döngü oluşturmak için, gerekli iğne tutucu ve ellerini kullanarak, bir döngü içine iğne bükün. C) yerinde kıvrılmış bir bölümü tutmak için bir poliüretan tüpü ile iğne kapağı. D) kullanmaiğne tutucu, istenen şekle döngü ucu bükün. Bu durumda, iki 45 bir iğne ucu - 60 ° dirsekler amaçlıdır gösterilmiştir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 2: Enine Aort Arch bağlanması işlemidir. A) aort arkı açıkça görülebilir. B) Söz konusu kanca iğne kullanılması, yakındaki bağ dokusu aort arkı ayırın. Kancalı iğne kullanılarak C), aortik ark altında dikiş kılavuz ve bir aralayıcı kullanılarak, arzu edilen çapa sahip bir daralma bağlar. D) Tamamlanan ligasyon. pl kolaylık, bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.
Şekil 3: Renk ve bağlandı ve Non-lige Farelerin Aort Arch Pulsed-dalga Doppler Ultrason Görüntüleme. Olmayan bir bağlanan fare aort kavsi A) Renkli Doppler görüntüleme. İki karotid arterleri açıkça görülebilir, hem de bunların arasındaki daralma eksikliği vardır. Olmayan bir bağlanan fare B) Aort zirve akım hızı. C) bağlanan fare aortik arkın Renkli Doppler görüntüleme. aort arkı iki karotid arter arasındaki daralma görülebilir (sarı ok başları) 'dir. D) daralma yerinde tepe akış hızı. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 4: Bağlanmış ve Non-lige Farelerin Sol ve Sağ karotis Arter gelen Pulsed dalga Doppler Görüntüleme. Olmayan bir lige farenin sol karotis A) Pulsed-Doppler görüntüleme. Olmayan bir lige farenin sağ karotid arter B) Pulsed-Doppler. Kan akışının hızı, sol karotid arter edilene hemen hemen aynı olduğu dikkat çekicidir. C) onun aort arkı üzerinde bir daralma ile bir farenin sağ karotis Pulsed-Doppler. Kan hızı önemli ölçüde bağlı sol karotid artere giriş alt daralma arttırılır. D) onun aort arkı üzerinde bir daralma ile bir fare sol karotis Pulsed-Doppler. kan akım hızının önemli ölçüde yukarı girişine sıkışıklığı nedeniyle azalırSol boyun arteri,. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 5: Kardiyak hipertrofisi ve İlgili Parametreler Survival Curve 3 haftalık Bağlanmış ve Non-bağlandı fareler ile. A) enine aort daralma olmadan 3 aylık fare kalbi. Kalp bir hemen belli patolojilerin olmayan sağlıklı ve normal bir şekle sahiptir. B) 3 hafta boyunca MTAC uygulanan 3 aylık fare kalbi. nedeniyle sol ventrikül duvar genişleme kalbin açıkça şekilsiz doğasını dikkat edin. arkus aorta üzerinde ligasyonu da görülebilir. C) 3 aylık olmayan bağlanan fare kalbinin bir kesit. D) 3 kalbinin bir kesit3 hafta boyunca enine aort daralma uygulanan -ay eski fare. Sol karıncığın genişlemesi açıkça görülebilir. Genel olarak kalp nedeniyle de kumanda merkezinde yol açtığı sol ventrikül basınç yükü büyütülür. E) kalpten vücut ağırlığı oranı önemli ölçüde 3 hafta bantlı farelerde artar. Kalp-to-sol tibia kemiği uzunluğu oranı önemli ölçüde farelerde artar F) 3 hafta (için bantlı *, p <0.05; ** p <0.01; *** p <0.001). 3 hafta süren deney (MTAC = 12 ve SHAM = 12) G) sağkalım eğrisi. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 6: Fare Kalp Histolojik Slaytlar. A) sh bir kesitFare kalbi am-işletilmektedir. B) kalınlaştırılmış sol ventrikül duvarı ve kısmen fibrozis, 3 hafta içinde MTAC-bağlanmış bir kalp bir kesit. genel kalp büyüklüğü de artar. C) sahte operasyona fare kalp kası liflerinin Boyuna kesit. D) Bir MTAC-bağlandı fare kalp kası liflerinin Boyuna kesit. onların artan çapı ile kanıtlandığı gibi çekirdeği aynı boyutta kalırken hücreleri, önemli ölçüde genişletilir. E) sahte operasyona fareden kas liflerinin enine kesiti. F) MTAC-bağlandı fare kalp kası liflerinin enine kesiti. Hücreler nedeniyle kumanda merkezinde bir sonucu olarak basınç yükü ile genişletilir. G) kolajen için Picrosirius Kırmızı ile boyandı sahte çalışan fare Koroner arterler. LH), bir MTAC-bağlanmış fare koroner arterler. kolajen doku önemli miktarda aro görülmektedirKoroner arterlerde basınç yüküne perivasküler fibrozis göstergesi genişlemiş kan damarı, und. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Rockman ve arkadaşları kalbinde basınç aşırı incelemek için bir yöntem olarak aort bantlama için ilk yöntem geliştirmiştir. Bu etkin araştırma hipertansiyon ve kalp yetmezliği 1 hücresel ve moleküler sonuçlarını ortaya çıkarmak için başlayacak. Geliştirilmiş bir yöntem olup, minimal invaziv transvers aortik daralma (MTAC), geleneksel çapraz aort daralma 9 sakıncaları olmayan, sol ventrikül basıncı, aşırı yük ve kalp yetmezliği indüksiyonu için müsait, zamana bağlı bir yöntem sağlar. TAC ile karşılaştırıldığında işlem kendisini önemli ölçüde daha kolay ve artan sağkalım oranları ile yapılabilir. Bu yöntemin en önemli avantajı aort daralma deney performansı sağlar, ama aynı ya da daha iyi bir sonuç için önemli ölçüde daha az ekipman, cerrahi beceri ve çalışma süresi ile olmasıdır.
TAC prosedüründe açık göğüs yöntemi g etkinleştirmek yaparreater erişim ve kalp ve damar bütünlüğü daha iyi bir görünüm. Potansiyel avantajı kolayca sağ ventrikül basınç yüklenmesi veya aort ark bantlama yapıldığı gibi aynı zamanda iskemik koşullar için koroner arter ligasyonu için pulmoner arter daralması performansı gibi diğer prosedürler, birlikte yapılabilir olmasıdır. Tersine, minimal invaziv bir yöntem artan veya enine aort kavsi daralma başka bir şey için uygun değildir.
Yöntem, uyarlanmış çeşitli şekillerde modifiye edilmiş olması dikkat çekicidir. onlar içeren standart TAC ve MTAC prosedürlerinde olabildiğince bantları kapalı kayma olamaz: Bazı durumlarda, aorta daraltmak için yerine dikiş titanyum klipleri kullanımı kolay tekrarlanabilir deneysel bir durum olduğu göz önüne alındığında, daha uygun görülmüştür dikişler 6. Yüksek frekanslı ultrason sistemi ile test durumunda,farelerin çok sayıda başarılı deneme sırasında bağlandı değil, daha fazla uygulama gereklidir. Belki yukarıda belirtilen titanyum klipleri uygulama cerrahi 6 başarı oranını artırabilir.
deney yaparken, aort etrafında dikiş çok sıkı olmadığı önemlidir. Bu aorta zarar ya da böbrek gibi kritik organlara da dahil olmak üzere vücudun geri kalanına kan akışının ölümcül azalmaya neden olabilir. Bakım ayrıca çevreleyen bağ dokusu ve damarlardan aorta ayırmak için kavisli kanca kullanırken pulmoner venlerin ve diğer damarları yaralayabilir ve ölümcül kan kaybına yol açabilir olarak, nazik olmak için alınmalıdır. Göğüs boşluğu negatif vardır ve dış ortam pozitif basınç vardır. Bu prosedürde, göğüs duvarı sternum açık kesildi ve aortik ark bantlı olmasına rağmen, göğüs boşluğu ve negatif basınç ortamı bozulmamıştı. kazadaA varsal hasarı ve iç negatif basınç akciğer çökerdi, değiştirildi ve hiçbir pozitif basınçlı ventilasyon orada olurdu çünkü hayvan, anında ölmüş olacaktı. ölümcül yaralanma varsa Genellikle, prosedür güvenle, hatta yavaş performans, 30 dakika içinde yapılabilir. Basınç azalabilir çünkü hayvan susuz, ya da hayvan ağrı nedeniyle ve zorlukla gıda ulaşan açlıktan eğer post-operatif bakım, aynı zamanda önemlidir. Kolayca kullanılabilir yumuşak gıda, analjezikler, ve rehidrasyon kurtarma için gerekli yanı sıra başarılı bir sonuç içindir.
ultrason sistemleri, özellikle renkli Doppler modunda, sonraki kullanılması enine arkus görselleştirme, başarılı daralma ve kumanda merkezinde etkilerini sağlar. ultrason sistemi arter duvarlarının kalınlığı, karotid arterlerde akış hızının ölçülmesini sağlayan, ve sol ventrikül morfolojisi.Özellikle, normal ya da yapay olarak ameliyat edilmiş farelerde akış oranlarının oranı yaklaşık 1 ila 10 olması gerekir. Daralma sitesinde zirve akım hızı karotis oranı gibi güvenilir bir parametre için modifiye Bernoulli denklemi (4 x V max 2) kullanılarak basınç farkı hesaplamak için kullanılabilir. Bu ekokardiyografi sırasında, vücut ısısı ve kalp hızı fizyolojik sınırlar mümkün olduğunca kapalı tutulmalıdır ve karşılaştırılabilir veri noktaları 10 üretmek için hayvanlar arasında benzer olmalıdır fazlalaştı.
daralma çeşitli düzeylerde operatörlerinin farklı bir deneyim seviyelerine elde edilebilir ve önemli ölçüde elde morfoloji etkileyebilir. basınç farkı seviyeleri ile başarılı daralma kontrol ve sadece bu tür 40-80 mmHg arasında bir basınç eğimi olarak belli sınırlar içinde fareler kullanılarak, tutarlı sonuçlar elde etmek için, önemlidir. Mümkün olduğunda, yüksek frekanslı echocardiography çalışma sonuçlarında tutarlılığı sağlamak için onay ve hayvan seçim kriterleri için kullanılmalıdır. Bununla birlikte, ekokardiyografi MTAC yöntemi kendisi için gerekli değildir.
Yüksek frekanslı ekokardiyografi mevcut değilse, başarılı bir daralma, kalp ağırlığı ve görece oranları ve deneyin sonunda histopatolojik inceleme ile doğrulanabilir. Başarılı daralma yalın kalp ağırlığı ve vücut ağırlığı ve sol tibia kemik uzunluğuna göre oranı artacaktır. Benzer bir şekilde, kalp kası hücre hipertrofisine ve her iki geçiş ve perivasküler fibroz de başarıyla bağlanmıştır farelerde görülür. Bu 3 hafta süren deney kalp hipertrofisi ikna etmek, ancak bir başarısızlık neden sadece tasarlanmıştır. 8 hafta veya daha sonra - kalp büyümesi ve kalp yetmezliği genellikle 6 sonra ayarlanır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Biz Vevo 2100 ultrason sisteminin sağlanması için Hong Kong Politeknik Üniversitesi Yaşam Bilimleri (ULS) Üniversite Araştırma Tesisi kabul etmek istiyorum. eğitim ve kolaylaştırılması için Biyomedikal Mühendisliği, Hong Kong Polytechnic Üniversitesi, Disiplinlerarası Bölümü Dr. Chunyi Wen özel teşekkürler. Bu çalışma HK hükümeti RGC Grant GRF 17127215, 764812 ve Billy KC Chow HKU6 / CRF / 11g tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Depilatory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Eye Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
References
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
- Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
- Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
- Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
- Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
- Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
- Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
- Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
- Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).
