מאמר זה מתאר כיצד לבצע ריאה בעכברים. מודל חדש זה יקל על החקירה של המנגנון המולקולרי מעורבת ועוגב נזק.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
לב-ריאה במודל של עכברים: גישה מוזרה
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
כפי ממושך לב-ריאה הופכת לחיונית יותר במהלך התערבויות הלב, קליניים לדרישה גוברת מתעוררת עבור תהליך אופטימיזציה, למזער נזק לאיבר וכתוצאה מכך מהמחזור extracorporal ממושך. מטרת מאמר זה היה להפגין מודל מתפקדת במלואה, הרלוונטית קלינית של ריאה של עכבר. אנחנו מדווחים על עיצוב המכשיר, אופטימיזציה מעגל זלוף, בטכניקה מיקרוכירורגית. מודל זה הוא מודל חריפה, אשר אינו תואם עם הישרדות בצורך לציורים דם מרובים. בגלל המגוון של כלים זמינים עבור עכברים (למשל, סמנים, הסתרה, וכו '), מודל זה יקל על חקירת המנגנון המולקולרי של נזק לאיברים ואת השפעת לב-ריאה ביחס לשני מחלות רקע.
מבוא
מאז כניסתה של לב-ריאה (משטרת שיקאגו) לתוך המרפאה, ומילא תפקיד חיוני כירורגיית1. בניתוח לב מודרני, זמן ממושך משטרת שיקאגו חיוני לבצע שחזורים נרחבים אבי העורקים ונהלים משולב. למרות ההתקדמות הטכנולוגית היה עצום, השימוש של מחזור extracorporal מקושרת עם אינטרה -, לאחר הניתוח מערכתית, איברים המקומי נזק2,3.
מודלים בעלי חיים גדולים פותחו כדי לחקור את התפקיד של משטרת שיקאגו על תהליכים פיזיולוגיים4,5. אף על פי מודלים אלה סיפקו תובנות חלק משטרת שיקאגו הקשורים סיבוכים, הם מאוד יקרים, כלים (למשל, נוגדנים) מוגבלים ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הניסויים בוצעו בדרישות החוק להגנת בעלי חיים גרמנית (TierSchG), אושרו על ידי ועדת רווחת בעלי חיים מקומיים (התחתון סקסוניה המדינה משרד הגנת הצרכן ובטיחות מזון, פרוטוקול TSA 14/1556). משקל מינימלי של העכבר מתאים מודל זה הוא 25 ג
1. הכנות ממושכות
הערה: כל הפרוצדורות מתבצעות בתנאים נקי, שאינו סטרילי, עם מכשירים בלוק.
- במקום 50-60 ס מ 8 ארוך פרופילן סיבים במקביל צינור חלול והתחבר עם מתאם T משני הצדדים. למלא את החלל בין הסיבים חלול הענף החיצוני של T-המתאם עם דבק.
- אפשר לפחות 24 h עבור הדבק להקשיח. תעצור את צינור סיליקון אל אתרי חיבור גזורה הסיבים חלול המשתרעת החוצה המתאם-T באמצעות....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
פרוטוקול זה מתאר את מעגל זלוף, ניתוחים, וניטור של פרמטרים פיזיולוגיים במהלך משטרת שיקאגו של עכבר. כאשר מבוצעת על ידי microsurgeon מיומן בצורה הולמת, התוצאות בעקביות ובאופן reproducibly מתקבלים.
כדי לשמור על רקמות נאותה זלוף, הלחץ בעורקים רשע נשמרת תמיד בין 40 ל- 60 מ מ כספית על-ידי התאמת זרימת הדם משטרת שיקאגו והוספת נפח נוסף. בהתאם המשקל של החיה, מצב אמצעי האחסון, טמפרטורת הגוף, זרימת הדם extracorporal נשמר בין תיקון של אובדן נ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
. פיתחנו תפקוד מלא הרלוונטית קלינית מודל של משטרת שיקאגו בעכבר... עם יותר משלושים זני עכברים שיש מחלות לב וכלי דם, המודל שלנו יכול להיות נקודת התחלה לפיתוח פרוטוקולים פוטנציאליים חדשים הקשורים משטרת שיקאגו. יתר על כן, בשל שפע של ריאגנטים ספציפיים העכבר ועכברים נוק-אאוט, מודל זה רק לא נחליף את הדגם חולדה הנוכחית של משטרת שיקאגו אבל יקל על ניתוח המנגנונים המולקולריים המעורבים נזק לאיבר הקשורות משטרת שיקאגו. עד כה, משטרת שיקאגו לא הוחל בעכברים בשל אתגרים המיקרוכירורגית בטכניקה תעלות, כמו גם אתגרים טכניים, כולל הפיתוח של מיק.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים אין לחשוף.
תודות
המחברים לא תודות לך
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | נפח תחול, 1:1 עם Tetraspan |
| Tetraspan 6% תמיסת HES | B. Braun Melsungen AG | PZN: | 05565416 נפח תחול, 1:1 עם Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2.5 IU למ"ל תמיסת תחול |
| NaHCO3 8,4% תמיסה | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% בתמיסת תחול |
| KCL 7.45% תמיסה | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0.1 מ"ל לקרדיופלגיה |
| קרפרופן | Zoetis Inc., ארה"ב | PZN:00289615 08859153 | 5 מ"ג/ק"ג/BW |
| 1 Fr PU קטטר | Instechlabs INC., ארה"ב | C10PU-MCA1301 | עורק צוואר |
| 2 Fr PU קטטר | Instechlabs INC., ארה"ב | C20PU-MJV1302 | וריד הצוואר |
| Vasofix צנתר בטיחות 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | אינטובציה orotracheal |
| 8-0 תפר משי קלוע | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., ארה"ב | 75290 | ליגטורה |
| Isoflurane | Piramal טיפול קריטי Deutschland GmbH | PZN:9714675 | נרקוזה |
| CLINITUBES נימי דם | Radiomed GmbH | 51750132 | דגימת דם 60 - 95 מיקרוליטר |
| מספריים קפיציים - 6 מ"מ להבים | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | מכשירים |
| מספריים קפיציים - 2 מ"מ להבים | Fine Science כלים GmbH | 15000-03 | מכשירים |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | מכשירים |
| Dumont #55 מלקחיים | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | מכשירים |
| Castroviejo מחזיק מחט מיקרו - 9 ס"מ | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | מכשירים |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | מכשירים |
| בולדוג Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | מכשירים |
| מאוורר MiniVent לעכברים (דגם 845) | מכשיר הרווארד | 73-0044 | אוורור מכני |
| Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drä gerwerk AG & Co. KGaA | הרדמה 1.3 - 2.5% | |
| מכשיר לרכישת נתונים PowerLab 4/35 | ADInstruments Ltd, ניו זילנד | PL3504 | לחץ פולשני, א.ק.ג, טמפרטורה |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | ניתוח גזי דם | |
| עכברי NMRI | מעבדות צ'ארלס ריבר | Crl:NMRI(Han) | זכר, 30 - 35 גרם, בן 12 שבועות, שוכן לפחות שבוע לפני הניסוי |
מקורות
- Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
- Uysal, S., Reich, D. L.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
